Лабораторная работа № 1.

Подготовка лабораторной посуды к сухожаровой стерилизации.

Оснащение: крафт бумага, ватно-марлевые пробки, вата, чашки Петри, пробирки, пипетки, сухожаровой шкаф.

Ход работы:

1. Проверьте: посуда для стерилизации должна быть сухая и чистая.

2. Пробирки, флаконы, бутыли, колбы закройте ватно-марлевыми пробками. Поверх пробки на каждый сосуд (кроме пробирок) надевают бумажный колпачок. Заверните пробирки в бумагу по 10 штук в упаковке.

3. Заверните чашки Петри в бумагу по 1-5 штук так, чтобы нигде не виднелось стекло.

4. Упакуйте пастеровские пипетки по 3-5-10-15 штук. Их заворачивают в крафт бумагу, в верхнюю часть каждой пипетки вкладывают кусочек ваты. (Во время работы пипетки из пакета вынимают за верхний конец).

5. Градуированные пипетки заворачивают в полоски бумаги шириной 5-6 см (полоска располагается под углом 20⁰ – 30⁰ к пипетке, обороты бумаги плотно прилегают друг к другу).

Форма отчетности: представить преподавателю посуду, подготовленную к сухожаровой стерилизации.

Лабораторная работа №2.

Приготовление и окраска микробиологических мазков

Приготовьте два препарата из культуры, выращенной в чашке Петри, окрасьте один препарат простым способом, второй препарат – по Граму. Приготовьте препарат из зубного налета и окрасьте его по методу Грама.

Оснащение: наборы лабораторных принадлежностей для приготовления мазков и окраски препаратов. В каждый набор входит: спиртовка, спички, предметные стекла, марлевые салфетки, бактериальные петли, пинцеты, пипетки, дистиллированная вода, раствор генцианвиолета, раствор Люголя, спирт этиловый 96%, фуксин Пфейфера, хозяйственное мыло, перекись водорода 3%, ватные тампоны, поддон для слива красок, микробиологические мостики, подставки под препараты, фильтровальная бумага.

Ход работы:

Приготовление мазка из культуры, выращенной на плотной питательной среде:

1. Со стороны дна чашки Петри отметьте восковым карандашом участок с интересующей вас колонией бактерий.

2. Поставьте чашку перед горящей спиртовкой слева от вас.

3. Обезжирьте предметное стекло с помощью кусочка мыла и марлевой салфетки. Проведите несколько раз обезжиренную сторону через пламя спиртовки. Положите стекло на подставку перед спиртовкой обезжиренной стороной вверх.

4. Бактериальной петлей нанесите на стекло каплю дистиллированной воды (на обезжиренном стекле капля растекается).

5. Прокалите бактериальную петлю, держа её вертикально в пламени до покраснения.

6. Осторожно приоткройте чашку Петри, введите петлю.

7. Остудите петлю о крышку или стенку чашки.

8. Осторожно коснитесь петлей колонии.

9. Аккуратно выньте петлю, закройте чашку.

10. Размешайте культуру в капле на стекле. Сделайте мазок размером с двухрублевую монету.

11. Высушите мазок при комнатной температуре или в теплом воздухе над пламенем горелки (на высоте 50-60 см).

12. Зафиксируйте мазок путём трехкратного проведения над пламенем горелки.

13. Мазок окрасьте простым способом или по Граму.

14. Промыть водой.

15. Высушить фильтровальной бумагой или на воздухе.

Окраска препарата по Граму

1. Нанесите на мазок раствор генцианвиолета на 5 минут.

2. Тщательно промойте дистиллированной водой пастеровской пипеткой или промывалкой.

3. Нанесите 2-3 капли раствора Люголя на 1 минуту. Слейте.

4. Нанесите несколько капель спирта до отхождения фиолетовых капель, но не более, чем на 30 секунд.

5. Мазок тщательно промойте водой (сливая воду на ребро стекла).

7. Докрасьте мазок фуксином – 0,5 – 1 минуту.

8. Промойте водой.

9. Высушите фильтровальной бумагой.

Окраска препарата простым способом

1. Нанесите на препарат 2-3 капли фуксина Пфейфера на 1-2 минуты или метиленовый синий на 3-5 минут.

2. Смойте краситель водой (сливая воду на ребро стекла).

3. Высушите фильтровальной бумагой или на воздухе.

Приготовление мазка из зубного налета

1. Небольшое количество зубного налета снять острым концом спички или зубочисткой.

2.Растереть на предметном стекле размером с двухрублевую монету.

3. Мазок зафиксировать путём трехкратного проведения над пламенем горелки.

4. Мазок окрасить по Граму.

5. Промыть водой.

6. Высушить фильтровальной бумагой или на воздухе.