Глюкоза

№

п/п

Дата

Тема

Количество часов

1

Ознакомление с обязанностями, порядком выполнения работ фармацевта-аналитика организацией и техникой оснаенностьюрабочего места для выолнения задач контроля качества ЛС. Формирование правовойкомпетенции-освоение правил ТБ при работес химическими реактивами.

3

2

Изучение нормативных документов, методической литературы и форм ведения отчетности ознакомление с суествующей системой контролья качества ЛС в испытательной лаборатории. Проведение анализа ЛС с применением современной аппаратуры:

-спектрофотометрия вУФ и видимой областях

3

3

Выполнение обязанностей фармацевта-аналитика по контролю качества и сертификации ЛС в испытательной лаборатории: Продолжение проведение анализа ЛС средств с применением современной аппаратуры:

-спектрофотометрия вУФ и видимой областях

3

4

Проведение анализа ЛС с применением современной аппаратуры:

-хроматографические методы(ТСХ,ВЖХ,ГХ)

3

5

Ознакомление спостановкойй контроля качества и сертификации ЛС в испытательной лаб.

Проведение анализа ЛС

3

6

Ознакомление с постановкой контролья качества и сертификации ЛС в контрольно-аналититической лаб

3

7

Закрепление умений и навыков проведения фармацевтического анализа в соответствии с требованиям нормативно-тех документов по контролью за качествоми безопасностью ЛС

3

8

Соверенствование навыков обения и консультирование со специалистами. Прогнозирование средств исходя из физических, химических свойств и способа их получения

3

9

Дифференцированный зачет

10

Дифференцированный зачет

11

Дифференцированный зачет

12

Дифференцированный зачет

13

Дифференцированный зачет

14

Дифференцированный зачет

устанавливать предметы, загромождающие проходы и доступ к средствам пожаротушения.

6. Курить разрешается только в отведенном и оборудованном для этой цели месте.

Курить в помещениях лаборатории строго запрещается!

7. Без разрешения начальника лаборатории и лица, ответственного за противопожарные мероприятия, запрещается установка лабораторных и нагревательных приборов, пуск их в эксплуатацию, переделка электропроводки.

8. Все нагревательные приборы должны быть установлены на термоизолирующих подставках.

9. Запрещается эксплуатация неисправных лабораторных и нагревательных приборов.

10. После окончания работы необходимо отключить электроэнергию, газ и воду во всех помещениях.

11. Каждый сотрудник лаборатории, заметивший пожар, задымление или другие признаки пожара обязан:

- немедленно вызвать пожарную часть по телефону;

- принять меры по ограничению распространения огня и ликвидации пожара;

- поставить в известность начальника лаборатории, который в свою очередь должен известить сотрудников, принять меры к их эвакуации и ликвидации пожара.

Обязанности фармацевта-аналитика

а) владеть всеми видами химического и физико-химического методов анализа;

б) осуществлять контроль за соблюдением технологии приготовления и условий хранения лекарств и медицинских препаратов, сроками хранения концентратов и полуфабрикатов;

в) в необходимых случаях давать консультации по вопросам хранения, технологии приготовления и контроля лекарств, санитарного режима и др.;

г) проводить выборочно качественный анализ препаратов, вызывающих сомнение;

д) проводить полный химический изъятых проб медицинских препаратов;

е) проводить в установленном порядке изъятие образцов препаратов на переконтроль;

ж) руководить работой подведомственного фармацевтического персонала;

з) о всех случаях ошибок докладывать руководителю аптеки и принять меры к их устранению.

Хранение химических реактивов в лаборатории

1. В рабочих помещениях допускается хранить нелетучие и малотоксичные твердые вещества и водные растворы, разбавленные кислоты и щелочи, в количествах, необходимых для анализов.

2. Концентрированные кислоты в объеме не более 2 куб. дм хранятся в

03.05.2017

Стеклянной посуде с притертыми стеклянными крышками или пластмассовыми пробками в эксикаторе или стеклянной емкости с крышкой в вытяжном шкафу.

Для лучшей герметичности надевают резиновые колпачки.

3. Концентрированные растворы щелочей хранят в вытяжном шкафу отдельно от кислот, в полиэтиленовой таре. Вместе с щелочами хранится аммиак.

4. Хранение легковоспламеняющихся жидкостей (ЛВЖ) допускается в толстостенных герметичными пробками бутылях, вместимостью не боле 1 куб. дм, особо опасные ЛВЖ – в объеме не более суточной потребности (таблица 1). Бутыли с ЛВЖ помещают в специальные металлические ящики вдали от источников тепла и окислителей (хлоратов, нитратов, азотной кислоты, перекиси водорода, перманганатов).

Тема:Изучение нормативных документов, методической литературы и форм ведения отчетности, есть два ЛС в испытательной лаборатории. Проведение анализа лекарственных средств с применением современной аппаратуры:

Фотометрия в УФ области спектра

• основы законодательства РК об охране здоровья граждан и соответствующие директивные документы

• теоретические основы фармацевтического анализа:

• общие статьи Государственной Фармакопеи, приказы и инструкции Минздрава РК, инструктивно-методические материалы по изготовлению и контролю качества лекарственных средств, изготовляемых в аптеках, условия и правила хранения, в том числе содержащих ядовитые и наркотические лекарственные вещества:

• систему организации службы контроля качества лекарственных средств; порядок проведения организационно-методической работы провизора-аналитика в аптеке;

• правила прописывания и оформления рецептов (требований) в том числе, содержащих сильнодействующие, ядовитые и наркотические вещества, их высшие и разовые дозы.

• технологию различных видов лекарственных форм, в том числе особенности изготовления стерильных лекарственных форм, концентратов, полуфабрикатов, внутриаптечной заготовки, настоев, отваров, суппозиториев и др;

• правила и нормы санитарно - гигиенического и противоэпидемического режима, правила асептики изготовления лекарственных средств, фармацевтический порядок в соответствии с действующими нормативными документами, приказами и инструкциями;

• правила получения, сбора и хранения воды очищенной и воды для инъекций;

• правила хранения лекарственных средств в аптеке.

• условия хранения и сроки годности лекарственных форм, внутри аптечной заготовки, полуфабрикатов и концентратов, изготовленных в аптеке;

• все виды внутриаптечного контроля лекарственных средств в соответствии с требованиями действующей Инструкции по контролю качества лекарственных средств, изготовляемых в аптеках (приемочный, письменный, опросный, органолептический, физический, химический и контроль при отпуске);

• экспрессные методы качественного анализа лекарственных средств в условиях аптеки. Краткую теорию флюоресцентного и микрокристаллического методов идентификации лекарственных веществ

основными с возбуждением электронов.

Поглощение света инфракрасной области спектра (ИК) обусловлено молекулярными колебаниями

В зависимости от диапазона длин волн, при которых измеряют светопоглощение растворов химических веществ, методы, основанные на измерении светопоглощения,

подразделяються на спектрофотометрию в УФ – области спектра 9400-760 нм) и спектрофотометрию в инфракрасной области спектра (760-20 000нм). Но обычно единицей измерения длин волн ИК- спектров является микрон ( 1 мк= = 10 -4 см)

или волновое число (см -1), т.е, число волн 1 см.

В фармацевтическом анализе чаще используется спектроскопия в УФ – ивидимой области спектра.

Метод УФ- спектроскопии включен в ГФ IX, ГФ Х и МФ II, а также в последние издания фармакопеи почти всех стран для определения подлинности, чистоты и количественного определения вещества в препаратах.

При построении кривых спектров погашения в УФ – и видимой части спектров можно использовать величины удельных показателей погашения (J 1%i см) или молярного показателя поглощения (е )2, где е – оптическая плотность 1М раствора вещества при вещества в 100 мл раствора при толщине слоя в 1 см.

Эти величины определяются экспериментально, для многих веществ они приведены в литературе.

Характеристикой спектра поглощения является положения максимумов (минимумов) поглощения света веществом, а также интенсивность поглощения, что характеризуется оптической плотностью (D) или удельным показателем поглощения (J 1%i см) при определенных длинах волн.

УФ- спектрофотометрическое измерения проводят обычно в растворах. В качестве

• принцип работы приборов (микроскопа, ультрафиолетового облучателя);

• количественный анализ лекарственных средств использованием различных титриметрических, рефрактометрического, колориметрического, нефелометрического и фотоэлектроколомерического методов. Применение перечисленных методов, их возможности и точность;

• определение величины рН растворов с использованием индикаторных бумаг, индикаторов и поенциометрического метода. Принцып работы рН- метра, иономера, правила работы с ними;

• методы оределения концентрации этилового спирта в водно- спиртовых растворах;

• инструкцию по оценке качества лекарственных средств, изготовляемых в аптеках. Характер и причины ошибок при изготовлении лекарственных средств и фасовке промышленной продукции в аптеках. Характер и причины ошибок при изготовлении и отпуске лекарственных средств. Порядок учета внутриаптечных ошибок;

• лекарственные растения, произрастающие в области (крае), (календарные сроки сбора; общие правила и техника сбора; способы сушки) – требования Государственной Фармакопеи к качеству лекарственного растительного сырья. Показатели брака растительного сырья. Предварительный контроль лекарственного растительного сырья.

• организацию рабочего места провизора- аналитика, оборудование контрольно- аналитического кабинета (стола);

• номенклатура титрованных растворов, реактивов, правила при их приготовлении. Составление заявок на реактивы и титрованные растворы;

• затруднительные, нерациональные и несовместимые лекарственные прописи. Классификация несовместимостей. Порядок отпуска лекарственных средств при наличии несовместимостей или технологических затруднений;

• учет работы провизора – аналитика аптеки. Ведение журналов регистрации результатов контроля;

• нормы и правила охраны труда, техники и безопасности и противопожарной безопасности.

• Правила внутреннего трудового распорядка;

Фотометрические (абсорбционные методы анализа основаны на способности анализируемого вещества избирательно поглощать свет.

Анализ вещества, основанный на измерении светопоглощения, включает спектрофотометрическую и фотоколориметрическую.

Спектрофотометрия основана на поглощении монохроматического света, т.е. света определенной длины волны (1-2 нм) в видимой, ультрафиолетовой и инфракрасной областях спектра.

Такого рода измерения поглощения света осуществляются при помощи спектрофотометров различных марок, в которых используется всегда монохроматический поток световой энергии, получаемый посредством оптической системы, называемой монохроматором.

Поглощение в ультрафиолетовой (УФ) и видимой областях спектра связоно в

04.05.2017

растворителей используется дистиллированная вода, кислоты, щелочи, спирты (этиловый, метиловый) и некоторые другие органические растворители.

ИК-спектр гидрокортизона

Растворитель не должен поглощать свет в той области спектра, что и исследуемое вещество. Характер спектра может изменяться в различных растворителях, а также при изменении рН среды.

Тема: Фотометрия в видимой области спектра. Фотометрические детекторы.

Наиболее часто в ЖХ применяют фотометрические детекторы, работа которых основана на измерении поглощения (абсорбции) света в ультрафиолетовой или видимой областях спектра. Это связано с тем, что большинство химических соединений имеют достаточно интенсивные полосы поглощения в диапазоне длин волн 200-800нм. Наличие подходящих растворителей, прозрачных в этом диапазоне длин волн, делает фотометрические методы особенно пригодными для градиентного элюирования. Фотометрические детекторы имеют достаточно высокую чувствительность для поглощающих свет веществ, широкий линейный динамический диапазон (до 10⁵), малый рабочий объем ячеек (<1мкл), небольшое экстраколоночное расширение пиков и высокую воспроизводимость показаний. Они являются недеструктивными, относительно нечувствительными к колебаниям потока подвижной фазы и изменениям температуры. Чувствительность фотометрических ультрафиолетовых детекторов может доходить до 0,001 единиц оптической плотности на всю шкалу при 1% шума. При такой высокой чувствительности могут быть зафиксированы малые количества (до нескольких нг) слабо абсорбирующих УФ веществ. Широкая линейная область позволяет анализировать как примеси, так и основные компоненты на одной хроматограмме.

Фотометрические детекторы подразделяют на детекторы с фиксированной длиной волны, дететоры со сменной с помощью фильтров длиной волны и спектофотометрические детекторы с плавно изменяемой длиной волны в определенной длин волн.

Характерной особенностью многих фильтровых УФ детекторов является использование в них источников линейчатого спектра. Кроме ртутной применяют кадмиевую и цинковую лампы с линиями на 229 и214 нм соответственно. Применяют также преобразователи излучения с 254 на 280-290 нм и другие длины волн, отсутствующие в спектре ртути. Фильтровый УФ детектор, например, с четырьмя интерференционными филтрами на 217 нм (полуширина полосы пропускания 20 нм)6, 254 нм(42 нм)6 263 нм (15 нм)6 279 нм (12 нм) перекрывает область 200-300 нм и реализует полные возможности 4-волновой записи хроматограмм, в том числе получение разностных хроматограмм и спектральных отношений. В этих случаях хроматографически неразделенные пики можно выделить количественно вычитанием стандартного сигнала из сигнала проб.

В связи с вышеизложенным, применение Уф детекторов с дейтериевой лампой в качестве источника света и набором широкополосных фильтров позволяет выпускать недорогие 2-х -4-хволные детекторы с выбором длин в диапазоне 200-300 нм.

Дополнительные возможности в детектировании дают спектрофотометрические детекторы, позволяющие работать в многоволновом режиме. Такие детекторы предназначены для фотометрирования элюата, выходящего из хроматографической колонки при различных длинах волн, например, в спектральном диапазоне 190-360 нм. Спектрофотометрической детекторы состоит из источника чвета, монохраматора и фотометра. В качестве источника света применима дейтериевая лампа. Изменение длины волны осуществляется поворотом дифракционной решетки монохраматора с помощью шагового двигателя. Монохроматический световой пучок, управляемой вибратором, поочередно проходит через рабочию и сравнительную проточные ячейки. На мониторе ВЭЖХ прибора фиксируется хроматограмма при нескольких аналитических длинах волн, в остановленном потоке имеется возможность зарегистрировать спектр поглащегия индивидуального сорбента.

1. Никотиновая кислота.

2. Тиамин

3. Пиридоксин

4. Цианокоболамин

5. Аскорбиновая кислота

6. Рибофлавин.

Хроматограмма стандартно смеси водорастворимых витаминов.

Колонка: Synergi Hydro-Rp 150x4.6 мм 4 мкм; защитная колонка: SecurityGrand C18 Aq 4x3.0 мм, подвижная фаза : А-1% Н3РО4 в воде, В-ацетонитрил; градиент: А/В (97:3)- 1 мин, А/В (55:43) – за 8мин, А/В (10/90) – за мин. А/В (90/10) – 4 мин, А/В (97/3) – за 0,5 мин, А/В (97/3) – 6,5 мин; расход: 0,9мл/мин; оюъем пробы: 20мкл; детектирование: спектофотометрическое, длина волны 254нм.

Одним из песпективных направлений развития фотометрических детекторов

является применение фотодиодной матрицы. В таких детекторах непрерывное излучение источника проходит через проточную рабочую ячейку и попадает на дифракционную решетку. Луч отклоняется и фокусируется на плоскости, где расположено фотодиодная матрица, состоящая из 200-250 элементарных фото-диодов. Детектор выдает информацию сразу обо всем диапазоне длин волн 190-600 нм с дискретностью 2-5 нм в течение 10 мс. В связи с тем, что при регистрации спектра создается большое массив информации, обработка и запись спектров производится с помощью быстродействующих компьютера и регистратора. Фотодиодные матричные детекторы позволяют получить за время одного анализа до 200-250 хроматограмм при разных длинах волны или трех-мерную спектрохроматограмму, в которой по одной оси откладывается время удерживается, по другим- оптическим плотность и длина волны. Замечательная особенность детекторов на фотодиодной матрице заключается в том, что они позволяют проводить количественные оценки даже в случае, когда хроматографические пики не разделяются и перекрываются на всех длинах волн.

Фотометрия, раздел прикладной физики, занимающийся измерениями света. С точки зрения фотометрии, свет-это излучение, способное вызывать ощущение яркости при воздействии на человеческий глаз. Такое ощущение вызывает вызывает излучение с длинами волн от ~0.39до~0,78 мкм, причем самым ярким представляется излучение с длиной волны ок. 0,555 мкм (желто-зеленого цвета).

Поскольку чувствительность глаза к разным длинам волн у людей неодинакова, в фотометрии принят ряд условностей. В 1931 Международная комиссия по ос-вещению (МКО) ввела понятие «стандартного наблюдателя» как некоего среднего для людей с нормальным восприятием. Этот эталон МКО – не что иное, как таблица значений относительной световой эффективности излучения с длинными волн в диапазоне от 0,380 до 0,780 мкм через каждые 0,001 мкм. Яркость, измерения в соответствии с эталоном МКО, называется фотометрическое яркостью или просто яркостью. Фотометрические величины. Поток световой энергии измеряется в люменах. Определить световой поток в 1 лм невозможно, не обращаясь к светящимся телам, и основной мерой света долгое время была «свеча», которая считалась единицей силы света. Настоящие свечи уже более века не используются в качестве меры света, так как с 1862 стала применятся специальная масленая лампа, а с 1877- лампа, в которой сжигался пентан. В 1979 была принята несколько отличающаяся от нее международная единица, названая кандела (кд). Кандела равна силе света в данном направлении источника, испускающего монохроматическое излучения частоты 540Ч1012 Гц (1=555нм), энергетическая сила светового излучения которого в этом направлении составляет 1/683 Вт/ср.

Протяженный источник света или освещения предмет характеризуется определенной яркостью (фотометрическое яркости). Если сила света, испускаемого 1 и2 такой поверхности в данном направлении, равна 1 кл, то ее яркость в этом направлении равна 1 кд/м2.(Яркость большинства тел и источника света в разных направлениях неодинакова,)

Виды фотометрических измерений. Основные виды фотометрических измерений таковы: 1) Сравнение силы света источника;2) измерение полного потока от источника света;3) измерение освещенности в заданной полоскости;4) измерение яркости в заданном направлении;5) измерение доли света, пропускаемой частично

05.05.2017

прозрачными объектами; 6) измерение доли света, отражаемой объектами. ОБЩИЕ МЕТОДЫ ФОТОМЕТРИИ Существуют два общих метода фотометрии: 1) визуальная фотометрия, в которой при выравнивании механическими или оптическими средствами яркости двух полей сравнения используется способность человеческого глаза ощущать различия в яркости; 2) физическая фотометрия, в которой для сравнения двух источников света используются различные приемники света иного рода – вакуумные фотоэлементы, полупроводниковые фотодиоды и т.д. При обоих методах для того, чтобы результаты имели универсальную значимость, условия наблюдения (или работы приборов) должны быть такими, чтобы фотометр реагировал на разные длины волн в точном соответствии со «стандартным наблюдателем» МКО. Важно также, чтобы световой выход лампы не изменялся в ходе измерений. Для стабилизации и измерения тока и напряжения в таких условиях обычно требуется довольно сложная электрическая аппаратура. В самых точных фотометрических измерениях приходится стабилизировать ток через лампу с точностью до (2 – 3)Ч10–3%.

Визуальная фотометрия. История визуальной фотометрии начинается с П.Бугера (1698–1758), замечательного ученого, который в 1729 изобрел способ сравнения двух потоков света и сформулировал почти все основные принципы фотометрии. И.Ламберт (1728–1777) далее систематизировал теорию фотометрии, и дальнейшее ее развитие шло в основном по линии совершенствования методов. В настоящее время визуальная фотометрия применяется ограниченно – при измерении весьма слабых световых потоков, когда трудно однозначно интерпретировать результаты физической фотометрии.

Физическая фотометрия. Начало физической фотометрии положили Ю.Эльстер и Г.Гейтель, открывшие в 1889 фотоэффект. В 1908 Ш.Фери разработал электрический фотометр, чувствительность которого к разным длинам волн была близка к чувствительности человеческого глаза. Но лишь в 1930-х годах, после усовершенствования вакуумных фотоэлементов и изобретения селенового фотодиода, физическая (электрическая) фотометрия стала широко применяемым методом, особенно в промышленных лабораториях.

Тема: Тонкослойная хроматография

Тонкослойная хроматография (ТСХ) является планарной разновидностью жидкостной хроматографии, в которой подвижная фаза двигается в пористой структуре адсорбента

Общие сведения

Процесс подобен бумажной хроматографии, но его преимуществом является большая скорость анализа, более высокое качество разделения, и возможность выбора одной из неподвижных фаз, обладающей наиболее подходящими свойствами. В настоящий момент тонкослойная хроматография (ТСХ) является одним из основных методов анализа смесей органических веществ в научных лабораториях и полностью вытеснил бумажную хроматографию.

Техника

Пластина с нанесенными каплями образцов (смесь красного и синего компонента) в процессе разделения.

Варианты тонкослойной хроматографии

Самым простым вариантом планарной хроматографии является бумажная хроматография, когда разделение производят с использованием специальной бумаги.

Для разделения используется пластины на основе оксида алюминия и силикагеля. Наиболее распространены пластины на основе силикагеля. Оксид алюминия и силикагель, как правило, размещается на стеклянной, металлической или пластиковой основе. В ряде случаев к сорбенту добавляется флуоресцентный индикатор синего или зеленого цвета.

хроматограмма 10 эфирных масел, проявлена ванилином.

Также существуют NH₂-, CN-, ДИОЛ, и RP модифицированные сорбенты для анализа веществ не разделяющихся на силикагелях напрямую. Разделение, как правило, производится в специальных герметичных камерах для ТСХ.

Препаративная и аналитическая ТСХ

Аналитическая ТСХ является качественным методом анализа веществ. Необходимо помнить, чтоинтенсивность цвета пятен далеко не всегда является даже приблизительной количественнойхарактеристикой. Такая оценка возможна при использовании универсальных проявителей, тогдадетектирование производится визуально либо с помощью денситометра.

Препаративная ТСХ является методом выделения вещества или группы близких веществ из смеси. В этомслучае смесь наносится на старт в виде сплошной полосы. Далее отрезается край пластины (илизакрывается вся остальная часть) и производится проявление. Часть пластины, соответствущая целевомувеществу соскребается, вещество отделяется от адсорбента. Препаративную ТСХ следует использовать, еслив лаборатории нет высокоэффективного жидкостного хроматографа (ВЭЖХ).

Фотогалерея

Рахвитие процесса хроматогирования во времени:

ВЭЖ Х, ГХ

Высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ, англ. HPLC, High performance liquid chromatography) — один из эффективных методов разделения сложных смесей веществ, широко применяемый как в аналитической химии, так и в химической технологии. Основой хроматографического разделения является участие компонентов разделяемой смеси в сложной системе Ван-дер-

Ваальсовых взаимодействия (преимущественно межмолекулярных) на границе раздела фаз. Как способ анализа, ВЭЖХ входит в состав группы методов, которая, ввиду сложности исследуемых обьектов, включает предварительное разделение исходной сложной смеси на относительно простые. Полученные простые смеси анализируются затем обычным физико-химическими методами или специальными методами, созданными для хроматографии.

Принцип жидкостной хроматографии состоит в разделении компонентов смеси, основанном на различии в равновесном распределении их между двумя несмешивающимися фазами, одна из которых неподвижна, а другая подвижна.

Отличительной особенностью ВЭЖХ является использование высокого давления ( до 400 бар) и мелкозернистых сорбентов (обычно 3 – 5 мкм, сейчас до 1,8 мкм). Это позволяет разделять сложные смеси веществ быстро и полно (среднее время анализа от 3 до 30 мин).

Метод ВЭЖХ находит широкое применение в таких областях, как химия, нефтехимия, биология, биотехнология, медицина, пищевая промышленность, охрана окружающей среды, производство лекарственных препаратов и во многих других.

По механизму разделения анализируемых или разделяемых веществ ВЭЖХ делится на адсорбционную, распределительную, ионообменную, эксклюзионнкю, лигандообменную и другие.

Следует иметь в виду, что в практической работе разделение часто протекает не по одному, а по нескольким механизмам одновременно. Так, эксклюзионное разделение бывает осложнено адсорционными эффектами, адсорбционное – распределительными, и наоборот. При этом чем больше различие веществ в пробе по степени ионизации, основности или кислотности, по молекулярной массе, поляризуемости и другим параметрам, тем больше вероятность проявления другого механизма разделения для таких веществ.

Нормально – фазовая ВЭЖХ

Неповижная фаза более полярна, чем подвижная, поэтому в составе элюента преобладает неполярный растворитель:

• Гексан: изопропанол = 95:5 (для малополярных веществ)

• Хлороформ: метанол = 95:5 (для среднеполярных веществ)

• Хлороформ: метанол = 80:20 (для сильнополярных веществ)

Обращенно – фазовая ВЭЖХ

Неподвижная фаза менее полярно, чем подвижная, поэтому в составе элюента почти всегда присуствует вода. В этом случае всегда можно обеспечить полное растворение БАС в подвижной фазе, почти всегда возможно использовать УФ – деткетирование, почти все подвижные йазы взаимно смешиваются, можно использовать градиентное элюирование, можно быстро переуравновесить колонку, колонку можно регенерировать.

Обычными элюентами для обращенно-фазовой ВЭЖХ являются:

• Ацетонитрил:вода

• Метанол:вода

• Изопропанол: вода

Прививки неподвижной фазы

Нормально – фазовая ВЭЖХ:

• Неподвижная фаза с пропилнитрильной прививки (нитрильной);

• Неподвижная фаза с пропиламинной прививкой (аминной).

Обращенно – фазовая ВЭЖХ:

• Неподвижная фаза с алкильной прививкой;

• Неподвижная фаза с алкилсилильной прививкой.

Энд – кэппирование – защита непривитых участков сорбента дополнительной прививкой «маленькими» молекулами. Гидрофобный энд – кэппинг (С1, С2) : выше селективность, хуже смачиваемость; гидрофильный энд – кэппинг (диол): ниже селективность, выше смачивемость.

Детектор для ВЭЖХ

• Ультрафиолетовый

• Фотодиодно – матричный

• Флуориметрический

• Электрохимический

• Рефрактометрический

• Масс – селективный

Газовая хроматография

Газовая хроматография – разновидность хроматографии, метод разделение летучих компанентов, при котором подвижной фазой служит инертный газ (газ – носитель), протекающий через неподвижную фазу с большой поверхностью. В качестве подвижной фазы используют водород, гелий, азот, аргон, углекислый газ. Газ – носитель не реагирует с неподвижной фазой и разделяемыми веществами.

Различают газо – твердофазную и газо – жидкостную хроматографию. В первом случае неподвижной фазой является твердый носитель (силикагель, уголь, оксид алюминия), во втором – жидкость, нанесенная на поверхность инертного носителя.

Газо – жидкостная хроматография – разделение газовой смеси вследствие различной растворимости кампанентов пробы в жидкости или различной стабильности образующихся комплексов. Неподвижной фазой служит жидкость, нанесенная на инертный носитель, подвижной – газ.

Разделение основано на различиях в летучести и растворимости ( или адсорбируемости) компонентов разделяемой смеси.

Этот метод можно использовать для анализа газообразных, жидких и твердых веществ с молекулярной массой меньше 400, которые должны удовлетворять

Определенном требованиям, главные из которых – летучесть, термостабилность, инертность, легкость получения. Этим требованиям в полной мере удовтетворяют, как правило, органические вещества, поэтому газовую хроматографияю широко используют как серийный метод анализа органических соединеий.

Оборудования для газовой хроматографии

Хроматографические колонки

Под колонкой подразумевается сосуд, длина которого значительно больше диаметра. Для газовой хроматографии используют 2 типа колонок — капиллярные и насадочные. Насадочные колонки имеют внешний диаметр от 2 до 4 мм и длину от 1-го метра до 4-х метров. Внутренний диаметр капиллярных колонок (ID — inner diameter) — 0,15-0,53 мм,, а длина — 15-100 м. Материалом для изготовления колонок служит стекло, нержавеющая сталь, медь, иногда фторопласт. В последнее время наибольшее распространение получили капиллярные колонки изготовленные из плавленного кварца, с нанесенной внутри неподвижной фазой. Длина подобных колонок может достигать сотен и даже тысяч метров, хотя чаще используются колонки длиной 30-60 м.

Крайне важно плотное наполнение колонок неподвижной фазой, а также обеспечение постоянства температуры колонки в течение всего процесса хроматографирования. Точность поддержания температуры должна составлять 0,05-0,1 °C. Для точного регулирования и поддержания температуры используют термостаты.

Детекторы

Детекторы предназначены для непрерывного измерения концентрации веществ на выходе из хроматографической колонки. Принцип действия детектора должен быть основан на измерении такого свойства аналитического компонента, которым не обладает подвижная фаза.

В газовой хроматографии используют следующие виды детекторов:

• пламенно-ионизационный детектор

• детектор по теплопроводности (катарометр)

• детектор электронного захвата

• пламенно-фотометрический детектор

• Термоионный детектор

• Фотоионизационный детектор

• Масс-спектрометр

• Ик-фурье спектрометр

08.05.2017

Проведение анализа ЛС

Calcii chloride

Кальция хлорид

Описание. Бесцветные кристаллы без запаха, горько-соленого вкуса. Препарат очень гигроскопичен, на воздухе расплывается.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, вызывая при этом сильное охлаждение раствора, легко растворим в 95% спирте.

Подлинность. Препарат дает характерные реакции на кальций и хло­риды (стр. 744; 747).

Прозрачность и цветность раствора. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды должен быть прозрачным и бесцветным.

Сульфаты. 4 г препарата растворяют в 20 мл воды. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,005% в препарате).

Тяжелые металлы. 5 мл того же раствора, разведенные водой до 10 мл, должны выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,0005% в препарате).

Железо. Раствор 15 г препарата в 10 мл воды должен выдерживать испытание на железо (не более 0,0002% в препарате).

Барий. 2 г препарата растворяют в 40 мл воды. К 10 мл полученного раствора прибавляют 5 мл насыщенного раствора сульфата кальция; в течение 1 часа в растворе не должна появляться муть.

Железо, алюминий, фосфаты. К 10 мл того же раствора прибавляют 1 мл раствора хлорида аммония, 1 каплю раствора фенолфталеина и раствор аммиака до появления розового окрашивания; в полученном растворе ни при комнатной температуре, ни при кипячении не должна появляться муть.

Цинк. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды не должен давать реакции на цинк.

Мышьяк. 0,5 г препарата должны выдерживать испытание на мышьяк (не более 0,0001% в препарате).

Количественное определение. Около 0,8 г препарата (точная навеска), отвешенные в закрытом бюксе, растворяют в воде, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и тща­тельно перемешивают.

К 25 мл приготовленного раствора прибавляют 5 мл аммиачного бу­ферного раствора, 0,1 г индикаторной смеси или 7 капель раствора кис­лотного хром темно-синего и титруют 0,05 мол раствором трилона Б до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 мол раствора трилона Б соответствует 0,01095 г СаCl2 * 6Н20, которого в препарате должно быть не менее 98,0%.

Заключение: Иследованный препарат кальция хлорид соответсвует к требованию ГФ.

10.05.2017

Novocainum

Новокаин

Описание.Бесцветные кристаллы или белый кристаллический порошок, без запаха, горького вкуса. На языке вызывает чуство онемения.

Расворимость. Очень легко растворим в воде, легко растворим в спирте, мало растворим в хлороформе, практически нерастворим в эфире.

Подлинность. Препарат дает характерные реакции на ароматические первичные амины и хлориды.

0,05 г препарата растворяют в 2 мл воды, прибавляют 3 капли разведенной серной кислоты и 1 мл 0,1 н. раствора перманганата калия; фиолетовая окраска моментально исчезает ( отличие от совкаина ).

0,2 г препарата расворряют в 2 мл воды, прибавляют 0,5 мл раствора едкого натра; выделяется бесцветный маслянистый осадок.

Температура плавления 154-156⁰.

Прозрачность и цветность раствора. Раствор 0,5 г препарата в 5 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды должен быть прозрачным и бесцветным.

Кислотность. При прибавлении к этому раствору 1 капли раствора метилового красного может получится розовое окрашивание, которое должно перейти в желтое от прибавления не более 0,15 мл 0,05 н. раствора едкого натра.

Органические примеси. Раствор 0,2 г препарата в 2 мл концентрированной серной кислоты должен быть бесцветным.

Раствор 0,5 г препарата в 5 мл азотной кислоты должен быть бесцветным.

Количественное определение. Около 0,3 г препарата (точная навеска) растворяют в 10 мл воды и 10 мл разведенной соляной кислоты и далее поступают, как уазано в статье «Нитритометрия». В случае применения внуренных индикаторов исползуют нейтральный красный или тропеолин 00 в смеси с метиленовым синим.

1 мл 0,1 мол раствора нитрита натрия соответствует 0,02728 г С₁₃Н₂₀N₂O₂ * HCl, которого в препарате должо быть не менее 99,5%.

• Термоионный детектор

• Фотоионизационный детектор

• Масс-спектрометр

• Ик-фурье спектрометр

11.05.2017

Проведение анализа ЛС

Calcii chloride

Кальция хлорид

Описание. Бесцветные кристаллы без запаха, горько-соленого вкуса. Препарат очень гигроскопичен, на воздухе расплывается.

Растворимость. Очень легко растворим в воде, вызывая при этом сильное охлаждение раствора, легко растворим в 95% спирте.

Подлинность. Препарат дает характерные реакции на кальций и хло­риды (стр. 744; 747).

Прозрачность и цветность раствора. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды должен быть прозрачным и бесцветным.

Сульфаты. 4 г препарата растворяют в 20 мл воды. 10 мл полученного раствора должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,005% в препарате).

Тяжелые металлы. 5 мл того же раствора, разведенные водой до 10 мл, должны выдерживать испытание на тяжелые металлы (не более 0,0005% в препарате).

Железо. Раствор 15 г препарата в 10 мл воды должен выдерживать испытание на железо (не более 0,0002% в препарате).

Барий. 2 г препарата растворяют в 40 мл воды. К 10 мл полученного раствора прибавляют 5 мл насыщенного раствора сульфата кальция; в течение 1 часа в растворе не должна появляться муть.

Железо, алюминий, фосфаты. К 10 мл того же раствора прибавляют 1 мл раствора хлорида аммония, 1 каплю раствора фенолфталеина и раствор аммиака до появления розового окрашивания; в полученном растворе ни при комнатной температуре, ни при кипячении не должна появляться муть.

Цинк. Раствор 1 г препарата в 10 мл воды не должен давать реакции на цинк.

Мышьяк. 0,5 г препарата должны выдерживать испытание на мышьяк (не более 0,0001% в препарате).

Количественное определение. Около 0,8 г препарата (точная навеска), отвешенные в закрытом бюксе, растворяют в воде, переносят в мерную колбу емкостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и тща­тельно перемешивают.

К 25 мл приготовленного раствора прибавляют 5 мл аммиачного бу­ферного раствора, 0,1 г индикаторной смеси или 7 капель раствора кис­лотного хром темно-синего и титруют 0,05 мол раствором трилона Б до сине-фиолетового окрашивания.

1 мл 0,05 мол раствора трилона Б соответствует 0,01095 г СаCl₂ * 6Н₂0, которого в препарате должно быть не менее 98,0%.

Заключение: Иследованный препарат кальция хлорид соответсвует к требованию ГФ.

12.05.2017

15.05.2017

16.05.2017

Местноанестезирубщее средство.

Заключение: Иследованный препарат новокаин соответсвует к требованию ГФ

 Glucosum

Глюкоза

Описание. Бесцветные кристаллы или белый мелкокристаллический порошок без запаха, сладкого вкуса.

Растворимость. Растворим в 1,5 ч. воды, трудно растворим в 95% спирте, практически нерастворим в эфире.

Подлинность. К раствору 0,2 г препарата в 5 мл воды прибавляют 10 мл реактива Фелинга и нагревают до кипения; выпадает кирпично-красный осадок.

Удельное вращение от +51,5° до +53° (10% водный раствор). Пре­парат предварительно сушат при 100-105° до постоянного веса. Изме­рение угла вращения производят после прибавления к раствору препа­рата 2 капель раствора аммиака.

Прозрачность и цветность раствора. 5 г препарата растворяют в 25 мл свежепрокипяченной и охлажденной воды. Полученный раствор должен быть прозрачным и бесцветным.

Кислотность. Полученный выше раствор разводят свежепрокипячен-ной и охлажденной водой до 100 мл. При прибавлении к 10 мл этого раствора нескольких капель раствора фенолфталеина и 0,2 мл 0,01 н. раствора едкого натра должно появиться розовое окрашивание.

Хлориды. 2 мл того же раствора, разбавленные водой до 10 мл, долж­ны выдерживать испытание на хлориды (не более 0,02% в препарате).

Сульфаты. 10 мл того же раствора должны выдерживать испытание на сульфаты (не более 0,02% в препарате).

Потеря в весе при высушивании. Около 0,5 г препарата (точная на­веска) сушат при 100-105° до постоянного веса. Потеря в весе не долж­на превышать 10%.

Мышьяк. 0,5 г препарата не должны давать реакции на мышьяк.

Заключение: Иследованный препарат глюкоза соответсвует к требованию ГФ

Закрепление умений и навыков проведения фармацевтического анализа в соответствии с требованиями нормативно-технических документов по контролю за качеством и безопасностью ЛС.

Результаты качественного химическому контролю(качественному и количественному анализу)подвергаются все растворы для иньекций и инфузий до стерилизации,включая определение величины Рн,изотонирующих и стабилизирующих веществ.У растворов для иньекций и инфузий после стерилизации проверяют величину Рн,подлинность и количественное содержание действующих веществ.Стабилизаторы в этих растворах после стерилизации проверяются в случаях,предусмотренных действующими нормативными документами.Для проведения полного химического контроля после стерилизации отбирается один флакон раствора каждой серии.Контролю подвергаются стерильные растворы для наружного применения(офтальмологические растворы для орошений,растворы для лечения ожоговых поверхностей и открытых ран,для интравагинального введения и др.)

Контролю подвергаются глазные капли и мази,содержащие наркотические и ядовитые вещества.Стабилизирующие вещества и вещества,обеспечивающие физиологическое значение осмотического давления(изотонирующие вещества),в глазных каплях определяются до стерилизации.

Обязательному полному химическому контролю подвергаются все лекарственные формы для новорожденных детей.При отсутвии методик количественного анализа ЛФ для новорожденных детей эти ЛС анализируют качественно.

В порядке исключения сложные по составу ЛФ для новорожденных детей,не имеющие методик качественного и количественного анализа,изготавливают под наблюдением првизора-аналитика или провизора-технолога.

Количественному и качественному анализу подвергают растворы атропина сульфата и соляной кислоты(для внутренного употребления),растворы серебра нитрата,все концентраты,полуфабрикаты,тритурации,в том числе жидкие гомеопатические разведения неорганических и органических ЛВ и их тритурации до третьего десятичного разведени.В порядке исключения изготовление гомеопатических ЛС,не имеющих методик качественного и количественного анализа,производится под наблюдением провизора-аналитика провизора-технолога.

Полный химический контролю подвергают спирт этиловый,определяя его концентрацию при разведении в аптеке или при приеме со склада,а также в водно-спиртоаых гомеопатических растворах и каплях.Гомеопатические гранулы проверяют на распадаемость(каждая серия).

Выборочно качественному и количественному анализу(полный химический контроль)подвергаются ЛФ,изготовленные в аптеке по индивидуальным рецептам или требованиям лечебных учреждений в количестве не менее трех при работе в одну смену с учетом ивсех видов ЛФ.Особое внимание обращается на ЛФ для детей;средства,применяемые в глазной практике,а также содержащие наркотические и ядовитые вещества;растворы для лечебных клизм.

Результаты полного химического контроля регистрируются в журнале по специальной форме.

Особые требования и контролю качества стерильных растворов.Изготовление и контроль качества стерильных растворов в аптеках осуществляется в соответствии с требованиями действующих ГФ,<<Методических указаний по изготовлению стерильных растворов в аптеках˃˃,действующих нормативных документов,приказов и инструкций.

К стерильным растворам аптечного изготовления относятся:растворы для иньекций и инфузий,глазные капли,офтальмологические растворы для орошений,все растворы для новорожденных детей,отдельные растворы для наружного применения.

Изготовление стерильных растворов запрещается при отсутвии данных о химической совместимости входящих в них лекарственных веществ,технологии и режиме стерилизации,а также при отсутствии методик анализа для их полного химического контроля.

Подготовка вспомогательных,укупорочных материалов,посуды,средств малой механизации должна осуществляться в соответствии с требованиями действующих нормативных документов,приказов и инструкций.

Вода очищенная,вода для иньекций,лекарственные вещества и вспомогательные материалы,используемые при изготовлении стерильных растворов,должны соответсвовать требованиям действующих ГФ и других нормативных документов.

Категорически запрещается одновременное изготовление на одном рабочем месте нескольких стерильных растворов,содержащих ЛВ с различными наименованиями или одного наименования ,некоторых конценрациях.

Стерилизацию раствора необходимо прводить не позднее,чем через три часа от начала изготовления,под контроля фармацевта или провизора.

Микробиологический контроль растворов на стерильность и испытание на пирогенность растворов для иньекций и инфузий проводится в соответствии с требованиями действующей ГФ.

Стрильные растворы должны храниться в условиях,учитывающих свойства входящих в них веществ,и не более установленного срока годности стерильные растворы подлежат изьятию.Стерильные растворы считаются забракованные в несоответсвии требованиям нормативных документов по внешнему виду,полдлинности и корличественному содержанию входящих веществ механических включений;при недопустимых отклонениях раствора,нарушениях фиксированное укупорки,нарушениях к оформлению ЛС,предназначенных к отпуску.

Контроль при отпуске.Данному виду контроля подвергаются все изготовленные в аптеках ЛС(в том числе гомеопатические).

При этомпроверяется соответсвие:

Упаковки ЛС физико-химическим свойствам входящих в них ЛВ;указанных в рецепте доз ядовитых,наркотических или сильнодействующих ЛВ возрасту больного;

Номера на рецепте номеру на этикетке;

соответствие фамилии больного на квитанции, на этикетке и рецепте или его копии; копий рецептов прописям рецептов; оформления Л С действующим требованиям.

Предупредительные мероприятия внутриаптечного контроля качества Л С. При изготовлении ЛС в аптеке должны строго соблюдаться санитарные нормы и правила, противоэпидемический режим в соответствии с действующими нормативными документами, инструкциями и приказами.

Обязательным является также соблюдение правил получения, сбора и хранения воды очищенной, воды для инъекций; своевременная санитарная обработка трубопровода; контроль за своевременным изъятием стерильных растворов, воды очищенной, воды для инъекций, для испытаний на стерильность в соответствии с действующими требованиями. Емкости для воды очищенной, воды для инъекций должны иметь четкую надпись: «Вода очищенная», «Вода для инъекций». Здесь же должна быть прикреплена бирка с указанием даты ее получения, номера анализа и подписи проверившего. При одновременном использовании нескольких водосборников они должны быть пронумерованы.

Тема: Рефрактометрия

Рефрактометрический метод является одним из самых про­стых физико-химических методов анализа с затратой очень не­больших количеств анализируемого вещества и проводится за очень короткое время. В фармацевтическом анализе этот метод применяется для идентификации лекарственных веществ, уста­новления их чистоты и количественного анализа.

Рефрактометрический метод анализа основан на измерении показателя преломления анализируемого вещества. Показатель преломления - одно из основных физических свойств вещества: индивидуальное вещество, свободное от примесей, характери­зуется определенным показателем преломления. Когда луч све­та переходит из одной прозрачной среды в другую, на границе сред направление его изменяется - луч преломляется.

Отношение скорости распространения света в воздухе (v$ к скорости распространения света в веществе (и₂), равное отно­шению синуса угла падения луча света (а) к синусу угла его

преломления (р), называется по­казателем (коэффициентом) пре­ломления (п) и является величи­ной постоянной для данной дли­ны волны:

бесцветное разграничение светлого и тем­ного поля в поле зрения окуляра. Вращая винт, нанести линию света и тени точно до совпадения с точкой пересечения линии в "Верхнем оконце окуляра. Вертикальная линия в нижнем оконце "окуляра указывает результат измерения - показатель прелом­ления воды при 20 °С-1,333. В случае других показаний пока­затель преломления устанавливают винтом на 1,333, а при по­мощи ключа (регулировочный винт снять) приводят границу "света и тени к точке цересечения линий.

3.  После установки прибора на нулевую точку приподнима-

ют камеру осветительной призмы, фильтровальной бумагой, марлевой или фланелевой салфеткой снимают воду. Затем на­носят 1-2 капли исследуемого раствора на плоскость измери­тельной призмы, камеру закрывают. Вращают винты до совпа­дения границы света и тени с точкой пересечений линий. Пб шкале в нижнем оконце окуляра производят отсчет коэффициен­та преломления раствора. Концентрацию раствора определяют по соответствующим таблицам. При измерении концентрации растворов, температура которых отличается от 20°С, следует пользоваться иной таблицей.

4.  После каждого определения необходимо обе камеры про­мыть водой и вытереть досуха фильтровальной бумагой или салфеткой, между камерами заложить прокладку из тонкого слоя ваты.

5.  Определение концентрации по таблицам. Существуют таблицы для определения концентрации лекарственных средств, изготовленных весовым или весо-объемным методом. В табли­цах приведены коэффициенты преломления и соответствующие им 

Концентрация веществ. В некоторых таблицах приведены коэффициенты преломления с точностью до третьего знака. В этом случае концентрация, соответствующая значению показателя преломления, взятому с четвертым знаком, определяется интерполированием.

Пример. Коэффициент преломления раствора кальция хлорида 1,3453. Ближайшие показатели в таблице 1,3450 и 1,3460 – соответствующая концентрация 10% и 10,9% , разность между ними (0,9%) равна единице третьего знака. Отсюда концентрация испытуемого раствора составит :

Меры предосторожности при работе. Быстрее всего в приборе выходят из строя призмы, поэтому необходимо соблюдать следующие меры предосторожности при обращении с ними:

1. Перед определением показателя преломления призмы тщательно очищаются от грязи и пыли.

2. Не допускается измерение показателей преломления кислот в щелочей, так как они разъедают поверхность призм.

3. После измерений протирают поверхности призм чистой мягкой салфеткой, смоченной водой или спиртом, вытирают насухо и закладывают между призмами небольшую сухую чистую салфетку или вату.

4. Категорически запрещается :

А)вращать винт, окрашенный красной краской; Б)оставлять на продолжительное время между призмами исследуемую жидкость, особенно раствор кальция хлорида, так как поверхность призм после этого покрывается тонким матовом слоем и измерение показателя преломления становится невозможным.