Лабораторная диагностика сифилиса

В соответствии с общеизвестным положением диагноз сифилиса должен быть подтвержден данными лабораторного исследования: обнаружением трепонемы или положительными серологическими реакциями крови.

Методы обнаружения Treponema pallidum подразделяют на прямые (заражение животных, микроскопия в темном поле) и непрямые (серологические тесты для выявления антител). Нечто среднее между прямым и непрямым методами идентификации Treponema pallidum представляет собой существенно новый метод - полимеразная цепная реакция (ЦПР). Суть её сводится к многократной амплификации генного материала микроба, что приводит к резкому возрастанию чувствительности поиска. Ведь достаточно присутствия лишь одной единицы микробного субстрата, чтобы зарегистрировать положительный результат.

Микроскопическое исследование на бледную трепонему.

Микроскопическое исследование на бледную трепонему имеет особое значение при диагностике первичного серонегативного сифилиса. Материалом для исследования служит тканевая жидкость в области папул, эрозивно-язвенных дефектов на коже и слизистых оболочках (особенно в области мочеполовых органов и ануса). Положительный результат может дать исследование пунктата лимфоузла. Под микроскопом видна живая трепонема, сохранившая не только свои морфологические особенности, но и способы движения, что позволяет хорошо отдифференцировать её от других сходных спирохет. Однако, бледная трепонема далеко не всегда обнаруживается при первом исследовании, особенно, в тех случаях, когда пациенты применяли антибиотики, а наружно - те или иные антисептические препараты.

Серологические методы исследования

Главной особенностью серологических исследований является комплексность. Это диктуется прежде всего тем, что ни одна серореакция не является и не может быть абсолютно чувствительной и абсолютно специфичной. В то же время любая реакция (не исключая самых современных) может дать ложноположительный результат. Комплекс реакций, даже в принципе однотипных, коррегирует недостатки каждой отдельной реакции.

В сыворотке больных сифилисом имеется несколько видов антител и каждый вид улавливается различными реакциями и в различные сроки заболевания. В основе серодиагностики сифилиса лежит иммунобиотический феномен взаимодействия антигена с антителом. При этом взаимодействии образуется специфический комплекс антиген-антитело (защитная реакция организма).

Серологические методы представлены 2-мя классами:

Нетрепонемные тесты

Нетрепонемные тесты определяющие антитела к липоидным антигенам (например МРП, РСК).

Наиболее широко используемыми в отечественной венерологии тестами являются микрореакция преципитации (МРП) с плазмой и инактивированной сывороткой (VDRL) и реакция связывания комплемента - РСК (рекция Вассермана) с кардиолипиновым антигеном, При постановке же РСК с трепонемным антигеном эта реакция, по сути, еще относится к трепонемным тестам, МРП используется как отборочная реакция для больных соматических стационаров, декретированного контингента и при массовом обследовании населения на сифилис (кроме доноров и беременных). Положительный результат МРП подтверждается РСК или другими тестами. Вообще же следует подчеркнуть, что хотя РСК чаще как среди медицинских работников, так и в народе называется реакцией Вассермана, это не совсем правильно. Конечно, А.Вассерман, использовавший в 1906 году впервые РСК для диагностики сифилиса, сделал революцию в этом деле. Однако в качестве антигена он использовал не кардиолипиновый или трепонемный субстрат (это было предложено гораздо позже), а экстракт из печени умершего от сифилиса плода. В принципе, обобщение названия «реакция Вассермана» - это дань уважения замечательному ученому и врачу. МРП в количественном варианте может применяться для контроля за лечением. RPR - быстрый тест реагинов плазмы, а APT - его автоматизированная модификация. Тест RPR был разработан для полевых условий, однако, сейчас это наиболее распространенная реакция, особенно во Франции. Он проводится на планшетах с впечатанными лунками, при этом сыворотка смешивается с антигеном, содержащим частицы угля или красителя, происходит флокуляция комплекса антиген-антитело, заметная даже невооруженным глазом. Предложенная реакция рекомендуется как замена РСК, благодаря простоте и скорости учета реакции (5-8мин), а также ввиду отсутствия необходимости специальной аппаратуры и вивария.