16.Серотипирование. Получение, титрование и применение агглютинирующих сывороток. Получение и применение моно рецепторных сывороток.

Серотипирование изучение антигенного состава микроорганизмов.

При постановке реакции агглютинации иногда наблюдается явление групповой агглютинации, когда сыворотка больного (а иногда и агглютипирующая диагностическая сыворотка) агглютинирует не один вид микро­ба, а несколько видов, родственных один другому. Так, например, сыво­ротка больного брюшным тифом может агглютинировать не только брюшнотифозных бактерий, но и паратифозных А и В; диагностическая дизентерийная сыворотка агглютинирует несколько видов дизентерийных бактерий. То же явление может встретиться и при определении вида иссле­дуемого микроба путем агглютинации, когда обнаруживается, что он агглютинируется не одной специфической сывороткой, но и другими сыворотками близких типов. В этих случаях, благодаря наличию идентичных компонентов в слож­ных бактериальных антигенах, в иммунной сыворотке могут оказаться не только антитела к специфическому микробу, но и групповые антитела к родственным видам микробов. Это явление, затрудняющее точную серо­диагностику и идентификацию микроба, может быть устранено методом адсорбции агглютининов, предложенным Кастеллани.

Метод основан на том, что при добавлении к иммунной сыворотке спе­цифического антигена он адсорбирует полностью все антитела — и специ­фические, и групповые, в то время как неспецифический антиген способен связать только побочные (групповые) антитела, оставляя свободными анти­тела к специфическому антигену. Так, в приведенном выше примере после прибавления брюшнотифозных бактерий к сыворотке больного брюшным тифом они адсорбируют все антитела, и в дальнейшем эта сыворотка больше не будет способной к агглютинации. Если же к другой порции этой сыворотки прибавить микробов паратифа, то в наступившей групповой реакции паратифозные бактерии свяжут только групповые антитела, но не специфические, после чего сыворотка окажется вполне способной агглюти­нировать специфических микробов — брюшнотифозные палочки.

Титрование агглютинирующей сыворотки:

Тип реакции: реакция агглютинации.

Исследуемый материал: сыворотка животного, гипериммунизированного бактериальной взвесью.

Диагоностический препарат: взвесь убитых бактерий, применявшихся для гипериммунизации.

Принцип метода: к серийным разведениям агглютинирующей сыворотки добавляют равные количества взвеси убитых бактерий, применявшихся для получения этой сыворотки.

Положительный результат реакции: образование хлопьев, просветление жидкости. Отрицательный результат: равномерная муть. Применение: для определения титра агглютинирующей сыворотки.

Титр агглютинирующей сыворотки -наибольшее разведение сыворотки, в которой еще наблюдается агглютинация. В данном случае титр агглютинирующей сыворотки равен

Серотипирование – изучение антигенного состава микроорганизмов

17. Филогенез и онтогенез иммунной системы. Особенности иммунологической реактивности детского возраста.

Иммунитет – это способ защиты организма от всех антигенно чужеродных веществ как экзогенной, так и эндогенной природы.Биологический смысл подобной защиты – обеспечение генетической целостности вида в течении индивидуальной жизни.

Беспозвоночные

1. Фагоцитоз и аллогенная ингибиция — первичные реакции на чужеродные субстанции, присущи всем многоклеточным организмам. Свойствене6н губкам( фагоциты-клетки мезоглеи(амебоциты)), кишечнополостные(содержат эти клетки в примитивной соединительной ткани, наблюдается отторжение ксеногенных трансплантатов).

2. Появление многих видов диффиренцированных лейкоцитоподобных клеток у кишечнополостных, кольчатых червей, моллюсков, членистоногих и иглокожих. Кольчатые черви, моллюски и иглокожие имеют зернистые и незернистые лейкоциты и лимфоподобные клетки. Начинается развиваться лимфотическая система. Появляется клеточный иммунитет, псевдоиммуноглобулена способные к агглютинации чужеродных электроцитов, гуморальные факторы с появлением циркуляции и поддержание гомеостаза.

3. Появление у круглоротых (миноги) примитивного тимуса, Т-лимфоциты, истинной иммунной памяти. Нет дифф-го тимуса, селезенки и костного мозга, но есть гемопоэтические очаги. В них фагоцитирующие и антигенреактивные клетки. Есть иммунная память. У рыб возникают лимфоидные органы – тимус, селезенка и плазматические клетки и антитела класса М. Усиленные реакции клеточного иммунитета, острое отторжение трансплантата.

4. Появление у амфибий лимфоузлов для генерации лимфоцитов переферических лимфоидных органах и генетических системах антигенной гистосовместимости. У хвостатых амфибий лимфоциты проявляют свойство как Т так и В лимфоцитов. У более организованных бесхвостых появляются лимфоидные образования, похожие на лимфотические узлы, лимфопоэтический костный мозг генетической системы антигенной гистосовместимости. Появляются антитела. У рептилий не возникают новые лимфоидные органы. Хорошо развит тимус, лимфотические узлы, лимфотическая ткань клеток и селезенки.

5. Кооперированный иммунитет Т и В клеток, появление сумки Фабрициуса и очагов размножения лимфоцитов (зародышевые центры) у птиц. Сумка Фабрициуса – центральный орган гуморального иммунитета. Антитела синтезируются быстро, аллергические реакции немедленного типа.

Млеки: возрастает гетерогенность Т и В лимфоцитов. Реакция клеточного иммунитета становиться разнообразнее, интенсивнее и быстрее. Появление IgD, IgE и атопическая реактивность у человека. Т и В лимфоциты полностью интегрируются, а кооперативные взаимодействия Т и В лимфоцитов усложняется.

В онтогенезе: оплодотворение в настоящее время тоже рассматривается как иммунная реакция: взаимодействие яйцеклетки со сперматозоидом весьма напоминает взаимодействие антитела с антигеном. Если поверхностные антигены гамет очень различны (когда самец и самка принадлежат к разным видам), оплодотворения чаще всего не наблюдается; если указанные антигены очень похожи (когда скрещивающиеся животные являются близкими родственниками), тоже чаще всего не удается зачать эмбрион; если же эти антигены различаются, но не слишком сильно, возникает зигота (когда родители принадлежат к одному виду животных, но не являются близкими родственниками). Если образовался эмбрион, иммунная система матери подавляется Т-супрессорами и специально синтезируемыми веществами, чтобы новый антиген (эмбрион) не был подвергнут сильной иммунной атаке. Поэтому организм беременных женщин (в силу этой и многих других причин) является крайне ослабленным, требует максимум внимания, заботы и осторожности. Более того, показано, что и плод через плаценту передает своей матери специальные белки, подавляющие ее иммунитет.