Определение жизнеспособности семян
Под жизнеспособностью понимают содержание в семенном материале живых семян, выраженное в процентах (ГОСТ 12039 - 82). Жизнеспособность определяют при необходимости срочного установления качества семян, для выяснения причин низкой всхожести и для окончательной их оценки по этому показателю. Применяют методы, позволяющие быстро выявить живые семена. Наибольшее практическое значение получили биохимические методы - по реакции зародыша или его частей на обработку растворами красителей и других веществ.
Материалы и оборудование. Образцы семян (чистые семена основной культуры), лезвия, пинцеты, шпатели, фильтровальная бумага, 0,5%-ный раствор тетразола, 0,1 %- ный водный раствор кислого фуксина, 0,1%-ный водный раствор индигокармина, химические стаканчики на 50, 100 мл, бланки рабочих карточек.
Методические указания. Метод определения жизнеспособности семян окрашиванием их индигокармином и кислым фуксином. Основан на том, что живые клетки зародыша непроницаемы для раствора индигокармина и кислого фуксина, тогда как мертвая ткань легко пропускает их и окрашивается.
Жизнеспособность определяют по двум пробам из 100 семян в каждой, которые отбирают из чистых семян при разборе навесок на чистоту.
Семена замачивают в воде в течение 15...18ч (на ночь) при температуре 20 0С, свежеубранные семена - при температуре 10...150С (ГОСТ 12039-82). После этого набухшие семена разрезают лезвием вдоль зародыша. Каждую подготовленную сотню половинок промывают несколько раз водой, полностью погружают в 0,1%-ный раствор индигокармина или кислого фуксина. Другую сотню половинок семян отбрасывают. Стаканчики осторожно встряхивают, чтобы раствор проник к срезам.
Срок окрашивания для зерновых культур 10... 15 мин, для зерновых бобовых - 2...3 ч. Мертвые ткани зародышей от индигокармина окрашиваются в синий цвет, а от кислого фуксина - в красный.
После окрашивания раствор сливают, половинки семян несколько раз промывают водой, затем раскладывают их на фильтровальную бумагу и подсчитывают жизнеспособность семян в процентах.
К жизнеспособным относят семена с неокрашенным зародышем, а также со слабоокрашенным кончиком корешка зародыша и слабо-окрашенными пятнами на корешках и семядолях.
Тетразольно-топографический метод. Основан на способности живых клеток восстанавливать бесцветные соли тетразола в фармазан - вещество ярко-красного цвета. В результате живые зародыши приобретают красный (малиновый) цвет, а мертвые остаются неокрашенными. Для окрашивания зародышей используют 0,5%-ный раствор тетразола (5 г на 1000 мл дистиллированной или свежевскипяченной воды).
Половинки семян погружают в 0,5%-ный раствор тетразола и выдерживают в темноте: семена зерновых - в течение 1 ч 30 мин при температуре 20 °С или 40...50 мин при 30 °С, семена зерновых бобовых — 3...4 ч при температуре 30 °С. При слабом окрашивании обработку можно продлить на 30...60 мин. Другую сотню половинок семян отбрасывают. Обработанные половинки семян после промывания водой раскладывают на фильтровальной бумаге и просматривают. Семена с зародышем, окрашенным в красный цвет, относят к жизнеспособным, а с неокрашенным - к нежизнеспособным.
Жизнеспособность семян (семенная жизнеспособность - СЖ) вычисляют как среднеарифметическое значение результатов анализа двух проб. Допустимые отклонения (ДО) между показателями отдельных проб не должны превышать определенных значений (таб.8)
Среднее арифметическое значение жизнеспособности округляют до целого числа. При расхождении результатов анализа проб на величину, превышающую допустимую, анализ повторяют.
Жизнеспособность обычно выше всхожести. По показателю жизнеспособности, которая в этом случае приравнивается к всхожести, разрешается высевать свежеубранные семена только озимых культур.
Таблица 8
Допустимые отклонения между показателями проб при определении
Жизнеспособности
СЖ, % |
ДО, % |
СЖ, % |
ДО, % |
СЖ, % |
ДО, % |
99 |
2 |
93-94 |
7 |
79-83 |
11 |
98 |
4 |
90-92 |
8 |
74-78 |
12 |
97 |
5 |
88-89 |
9 |
65-73 |
13 |
95-96 |
6 |
84-87 |
10 |
36-64 |
14 |
Метод определения жизнеспособности семян по скорости набухания. Основан на разной скорости набухания живых и мертвых семян люцерны синей и клевера лугового, обусловленной неодинаковой проницаемостью семенных оболочек. Этот метод применяют для ориентировочной опенки жизнеспособности семян, хранящихся не более 2 лет.
Для анализа берут две пробы по 100 семян в каждой, помещают в чашки Петри на фильтровальную бумагу, смоченную до полной вла-гоемкости 0,5%-ным раствором щелочи (КОН или NaOH), накрывают крышками и оставляют на 45 мин при температуре 200С. Затем их просматривают и выделяют ненабухшие (жизнеспособные) и набухшие (нежизнеспособные) семена. Нежизнеспособные семена при нажиме пинцетом легко раздавливаются или их оболочка легко отделяется от зародыша. Записи удобно вести по форме 3.
Форма 3
Определение жизнеспособности семян
Метод Метод
1-я сотня ____%. 2-я сотня %. 1-я сотня___%. 2-я сотня____ %.
Средняя жизнеспособность %.
Средняя жизнеспособность %.
Задание. Определить жизнеспособность семян полевых культур с помощью кислого фуксина (трифенилметановый краситель красного цвета), индигокармина (краситель синего цвета) или тетразола.
