Цитотерапия и генотерапия

В связи с тем, что цитокинотерапия злокачественных опухолей нередко сопровождается осложнениями, было разработано направление биотера­пии, основанное на использовании клеток иммунной системы, обработан­ных цитокинами вне организма.

Оно получило наименование адоптивной (от adoptive — приемный) иммуноцитотерапии.

Принцип дан­ного подхода состоит в том, чтобы вынести этап действия на иммуноциты токсичных цитоикнов за пределы организма и вводить в него уже акти­вированные аутологичные клетки.

Известно 3 варианта клеток, использу­емых в адоптивной цитотерапии — LAK-, CIK- и TIL-клетки.

LAK-клетки(лимфокин активированные клетки)-это NK-клетки, стимули­рованные in vitro IL-2 или другими цитокинами в течение 5—7 сут, в резуль­тате чего они приобретают способность лизировать более широкий спектр трансформированных клеток, чем обычные NK-клетки.

CIK-клетки(цитокин-индуцированные клетки) — это мононуклеары (или очищенные CD8 + Т-клетки), активирован­ные моноклональными антителами к CD3 с добавлением смеси IL-2, IL-1 и IFNy, что обеспечивает поликлональную пролиферацию толь­ко Т-лимфоцитов и их дифференцировку в цитотоксические Т-клетки.

TIL-клетки(опухоль инфильтрирующие Т-лимфоциты).

Реактивация цитокинами in vitro значительно повышает их способность лизировать опухоле­вые клетки.

Разрабатывают также методы сочетания цитотерапии с генотерапией.

Последняя состоит в переносе клеток, в которые предварительно трансфецированы гены, кодирующие вещества с противоопухолевой актив­ностью, чаще всего цитокины (IFNγ, TNFα, IL-2, IL-12 и др.).

Гены могут внедрять в сами опухолевые клетки, в клетки стромы опухоли или в TIL.

Трансфецированные клетки вводят в опухоль, в которой они секретируют цитокины, что обеспечивает их оптимальную доставку к мишеням — опухолевым клеткам или эффекторным клеткам иммунной системы.

Генотерапию используют (пока в очень ограниченном масштабе) для лечения первичных иммунодефицитов.

Наиболее успешным оказалось использование этого подхода для лечения варианта ТКИН(тяжелая комбинированная иммунная недостаточность) с дефицитом аденозин_дез-аминазы.

В аутологичные клетки костного мозга больного трансфецируют ген ADA и трансплантируют их в организм.

АDА необходима для метаболизма многих клеток организма, особенно Т-клеток.

Отсутствие этого фермента приводит к накоплению в лимфоцитах токсичных продуктов метаболизма, в результате чего эти клетки погибают.

При успешном встраивании перенесенных клеток в костный мозг генетический дефект устраняется.

Лечебные вакцины

Лечебные вакцины, предназначенные для терапии злокачественных опухолей, аутоиммунных заболеваний и аллергии, находятся в процессе разработки.

Основой для создания вакцин практически всегда служат дендритные клетки.

С их применением связан ряд проблем.

Одна из них состоит в получении дендритных клеток избранного типа в достаточных количествах.

Существует 2 подхода для выделения и размножения in virto дендритных клеток — их дифференцировка из стволовых клеток или из моноцитов.

Моноциты культивируют в присутствии GM-CSF и IL-4; для их созревания в систему обычно добавляяют TNFa.

Вторая проблема состоит в выборе разновидности клеток для создания вакцины, что определяется поставленными задачами: в случае онковакцин необходимо усилить противоопухолевый иммунитет, при аллергии и ауто­иммунных процессах — ослабить аллергическую гиперчувствительность или иммунный ответ на аутоантигены.

Основой онковакцин должны служить зрелые миелоидные дендритные клетки (DC1), желательно стимулированные IL-12 и/или IFNγ.