- •Часть II
- •Предисловие
- •Часть II пособия изложена на 120 страницах, состоит из введения, полутора модулей, вопросов к итоговому контролю по ним. Введение
- •Методические указания
- •1. Возбудитель чумы. Морфология - демонстрация готовых препаратов-мазков.
- •3. Приготовление, окраска и микроскопия препаратов-мазков из убитых культур бруцелл
- •4. Серологическая диагностика бруцеллеза. Реакция Райта. Регистрация результатов реакции Райта
- •Регистрация результатов реакции Райта
- •5. Ускоренный метод серологической диагностики бруцеллеза – реакция Хеддлъсона и др.
- •Регистрация результатов реакции Хеддльсона
- •6. Аллергическая диагностика бруцеллеза. Постановка пробы Бюрне (разбор).
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 1
- •А. Бактериологический
- •А. Бактериологический
- •Б. Биологический
- •В. Серологический
- •1. Для обнаружения антител
- •1. Изучение морфологии и культуральных свойств стафилококков
- •2. Бактериоскопическое исследование гноя
- •3. Изучение морфологии и культуральных свойств стрептококков
- •4. Знакомство с морфологическими свойствами пневмококка
- •Исследование флоры зева. Микроскопия и посев на кровяной агар и молочно-желточно-солевой агар.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 2
- •1. Коагулозоположительные стафилококки
- •2. Коагулазоотрицательные стафилококки
- •Методические указания
- •Демонстрация лечебно-профилактических и диагностических препаратов, применяемых при кокковых инфекциях
- •6. Микоплазмы. Микроскопия мазков из мокроты больного микоплазменной пневмонией.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 3
- •Методика фаготипирования
- •Учет и регистрация результатов
- •А. Бактериоскопический
- •Б. Бактериологический
- •В. Иммунологический метод диагностики менингококковых заболеваний
- •А. Бактериоскопический
- •Б. Бактериологический
- •А. Бактериоскопический
- •Б. Бактериологический
- •В. Серологический.
- •Занятие № 4
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Изучение морфологии и культуральных свойств дифтерийной палочки. Макро- и микроскопия культур бактерий
- •2. Типы дифтерийных бактерий. Разбор особенностей роста культур соответствующих типов на теллуритовых средах
- •3. Биохимические свойства коринебактерий. Дифференциация истинных дифтерийных бактерий от псевдодифтерийных и дифтероидов по биохимическим свойствам. Демонстрация и разбор
- •4. Правила взятия и пересылки материала от больного дифтерией для бактериологического исследования. Разбор
- •5. Бактериологическая диагностика дифтерии. Разбор схемы исследования дифтеритической пленки (или материала от бактерионосителя)
- •6. Определение токсигенности дифтерийных бактерий реакцией преципитации в агаре и биопробой на морской свинке. Разбор и демонстрация.
- •7.Изучение морфологии и культуральных свойств Listeria monocytogenes
- •8. Изучить морфологию возбудителя актиномикоза на демонстрационных препаратах. Познакомиться с культуральными особенностями возбудителя актиномикоза.
- •Контрольные вопросы
- •Занятие № 5
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Правила взятия и пересылки в лабораторию патологического материала от больного туберкулезом
- •2. Морфология туберкулезных бактерий - микроскопия готовых препаратов
- •3. Культуральные свойства туберкулезных бактерий. Рост туберкулезной палочки на жидких и твердых питательных средах (демонстрация)
- •4. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза. Микроскопия материала с окраской по Цилю-Нильсену. Методы обогащения
- •5. Бактериологическая диагностика туберкулеза. Применение метода микрокультур (метод Прайса) для ускоренной диагностики туберкулеза (разбор и демонстрация)
- •6. Палочка проказы - микроскопия готовых препаратов
- •7. Ознакомление с составом и назначением следующих иммунопрепаратов: туберкулин Коха, очищенный туберкулин ррd-l, вакцина бцж.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 5
- •Занятие № 6
- •План занятия
- •Методические указания
- •Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл
- •Бактериологическое исследование испражнений брюшнотифозного больного: посев на среду обогащения и дифференциально-диагностические среды (разбор схемы)
- •Результаты реакции Видаля
- •Исследование пищевых продуктов на наличие энтеротоксигенного
- •Методы микробиологической диагностики пищевых отравлений, вызываемых стафилококками а. Бактериологический
- •7. Бактериологическое исследование испражнений больного при подозрении на кишечную инфекцию (начало). Посев испражнений на дифференциально-диагностические среды.
- •Контрольные вопросы
- •Б. Иммунологические
- •Занятие № 7
- •План занятия
- •Методические указания
- •Изучение морфологии, культуральных и биохимических свойств диареегенных кишечных палочек
- •Бактериологическая диагностика кишечной инфекции (продолжение). Регистрация результатов посева, сделанного на прошлом занятии. Посев на «пестрый ряд», мпа, среду Пешкова
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 7
- •Г. Классификация диареегенных Escherichia coli
- •Занятие № 8
- •План занятия
- •Методические указания
- •Изучение морфологии, культуральных и биохимических свойств
- •Контрольные вопросы
- •А. Метод колициногенотипирования
- •Типовые и индикаторные культуры набора Абботта и Шеннона для колициногенотипирования шигелл Зонне
- •Б. Методика колицинотипирования при помощи колициногенных штаммов
- •Занятие № 9
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Изучение морфологии, культуральных и биохимических свойств холерного и холероподобных вибрионов.
- •Реакция агглютинации выделенной культуры вибриона с холерной о-сывороткой
- •4. Исследование воды на наличие холерного вибриона (разбор методики).
- •Регистрация результатов посева исследуемой культуры на среды "пестрого ряда"
- •Реакция агглютинации выделенной культуры возбудителя кишечной инфекции
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 9 Методы микробиологической диагностики холеры Бактериологический
- •Методы ускоренной диагностики холеры
- •1. Иммунофлуоресцентный
- •2. Реакция пассивной гемагглютинации
- •В. Дифференциальные признаки биоваров холерных вибрионов (классического и Эль Тор)
- •Г. Дифференциальные признаки патогенных и непатогенных галофильных вибрионов
- •Д. Холерный вибрион представлен тремя сероварами:
- •Е. Биохимическая характеристика вибрионов по Хейбергу, Смиту и Гуднеру
- •Занятие № 10
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Морфология анаэробных бактерий. Микроскопия препаратов-мазков из культур патогенных анаэробов.
- •2. Изучение особенностей роста культур анаэробов на различных питательных средах.
- •5. Демонстрация препаратов, применяемых для профилактики и лечения анаэробных инфекций.
- •Контрольные вопросы
- •В. Ускоренные методы диагностики ботулизма
- •Занятие № 11
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Морфология анаэробных бактерий. Микроскопия препаратов-мазков из культур патогенных анаэробов.
- •2. Изучение особенностей роста культур анаэробов на различных питательных средах.
- •3. Микробиологический диагноз анаэробных инфекций. Разбор методов диагностики газовой гангрены.
- •4. Ускоренное обнаружение с. Реrfringens. Демонстрация роста на среде Вильсон-Блера, среде Китта-Тароцци и на молочной среде.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 11 Ускоренный метод диагностики возбудителей газовой гангрены по способу Комковой
- •Методы микробиологической диагностики газовой гангрены Бактериологический
- •Ускоренный метод обнаружения c. Perfringens
- •Неклостридиальная анаэробная инфекция
- •Занятие № 12
- •План занятия
- •Методические указания
- •Знакомство с классификацией возбудителей иппп
- •Микроскопия препарата-мазка окрашенного по Рамоновскому-Гимза, изучение морфологических и тинкториальных свойств возбудителя сифилиса
- •Испытуемая сыворотка крови в разведении 1:5
- •Гемолитическая система (эритроциты, барана, гемолитическая сыворотка)
- •Промикроскопировать мазки из гнойного отделяемого уретры больного гонореей окрашенных по Граму и метиленовой синькой
- •Изучение морфологии возбудителя трихомониаза.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 12
- •Бактериоскопическое исследования
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Вопросы к итоговому занятию по частной медицинской микробиологии для студентов 2 курса стоматологического факультета
- •Занятие № 13
- •План занятия
- •Методические указания
- •Разбор основных форм воспалительных заболеваний парадонта, их классификация.
- •Знакомство с особенностями взятия материала
- •Проведите микроскопическое исследование соскоба со слизистой оболочки десны, полученного от больного с клиническим диагнозом: «катаральный гингивит» (окраска по Граму), зарисовать.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 13
- •Занятие № 14
- •План занятия
- •Методические указания
- •Разбор основных форм воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.
- •Микроскопическое исследование экссудата, полученного от больного с клиническим диагнозом: «остеомиелит нижней челюсти».
- •Знакомство с бактериологический метод исследования гнойного отделяемого при воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 14
- •Исследуемый материал
- •4.2. Этапы исследования материала в лаборатории
- •4.3. Прямое исследование материала
- •4.4. Способы и системы для создания анаэробных условий
- •4.5. Питательные среды и культивирование
- •Занятие № 15
- •План занятия
- •Методические указания
- •Микроскопия материала из чистых культур порфиромонад, псевдомонад, стрептококка, стафилококка, возбудителей одонтогенных заболеваний.
- •Микроскопия демонстрационных мазков из чистых культурт клостридий. Фузобактерий. Зарисовать результаты микроскопии.
- •Изучение каталазной активности у стафилококка и стрептококка, выделенных от больного воспалительным заболеванием чло, с целью их дифференциации.
- •Контрольные вопросы
- •Использованная и рекомендуемая литература
Приложение к занятию 2
БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАНОСТИКА СТАФИЛОКОККОВЫХ И СТРЕПТОКОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ
М атериал из зева, носа, отделяемое ран, кровь, гной
|
|
|||||
Ж елточно-молочно-солевой агар |
Кровяной МПА
|
Сахарный МПБ
|
|
|||
Стафилококк М ПА |
|
Стрептококк С ахарный, кровяной МПА, сахарный МПБ |
|
|||
Реакция плазмокоагуля-ции |
Гемолиз эритроцитов |
Отношение к типовым стафилококковым фагам |
Биохимические свойства Чувствительность к антибиотикам |
Реакция агглютинации и преципитации с групповыми и типовыми сыворотками |
|
|
СЕРОЛОГИЧЕСКИЙ МЕТОД (чаще всего – в диагностике ревматизма)
|
||||||
1. Определение анти-O-стрептолизина.
|
||||||
2. Определение антигиалуронидазы.
|
||||||
КРИТЕРИИ ПАТОГЕННОСТИ СТАФИЛОКОККОВ
Критерии |
Безусловно патогенные стафилококки |
Условно патoгeнные стафилококки |
Непатогенные стафилококки |
|
Резкий гемолиз на агаре с 5 % крови кролика или барана |
Незначительный гемолиз |
Гемолиза нет |
|
Некроз при внутрикожном введении кролику |
При внутрикожном введении воспаление (некроза нет) |
Внутрикожная проба отрицательная |
|
Свертывание плазмы через 1-2 часа |
Свертывание плазмы через 6 часов и позднее |
Свертывание плазмы не происходит |
|
Золотистый, палевый |
Белый |
Лимонно-желтый |
КЛАССИФИКАЦИЯ рода Staphylococcus
1. Коагулозоположительные стафилококки
1. S.aureusxxx
2. S.intermediusхх
3. S. hyicusa
2. Коагулазоотрицательные стафилококки
4. S. saprophyticusx |
12. S. sciuri |
20. S. caprae |
5. S. hominisx |
13. S. simulans |
2l. S. eqorum |
6. S. capitis |
14. S. arlettae |
22. S. lentus |
7. S. warneri |
15. S. auricularis |
23. S. saccharolyticus |
8. S. epidermidisxxx |
16. S. carnosus |
24. S. schleiferi |
9. S. haemolyticusx |
17. S. caseolyticus |
25. S. lugdunensis |
10. S. cohnii |
18. S. gallinarum |
26. S. chromogenes |
11. S. xylosis |
19. S. kloosii |
|
Примечание: х – патогенные только для человека
хх – патогенные только для животных
ххх – виды, патогенные для человека и животных
а – не все штаммы имеют плазмокоагулазу
ЭКЗОТОКСИНЫ, ПРОДУЦИРУЕМЫЕ ТОКСИГЕННЫМИ
СТАФИЛОКОККАМИ
Тип токсина |
Действие токсина |
1. Мембраноповреждающие α, β, γ, δ |
Разрушают различные клетки (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты, макрофаги, лаброциты, клетки культур тканей, протопласты и др.) |
2. Лейкоцидин P-V (истинный лейкоцидин Пентона-Валентайна) |
Разрушает лейкоциты |
3. Энтеротоксины А,В,С1,С2,СЗ,D,Е |
Вызывают пищевые интоксикации |
4. Эксфолиативные А и В |
Вызывают отслоение эпидермиса (пузырчатка новорожденных) |
5. Экзотоксин токсического шока (ЭТШ) |
Вызывает синдром токсического шока |
ОСНОВНЫЕ МЕЖВИДОВЫЕ РАЗЛИЧИЯ У БАКТЕРИЙ
рода Staphylococcus
Признак |
Вид |
||
S. aureus |
S. epidermidis |
S. saprophyticus |
|
Наличие: плазмокоагулазы |
+ |
– |
– |
фосфатазы |
+ |
+ |
– |
аргининдигидролазы |
+ |
+ |
– |
нитратредуктазы |
+ |
+ |
– |
Окисление и ферментация: маннита |
+ |
– |
+ |
трегалозы |
+ |
– |
+ |
галактозы |
+ |
+ |
– |
маннозы |
+ |
+ |
– |
рибозы |
+ |
– |
– |
Устойчивость к: новобиоцину |
– |
– |
+ |
лизостафину |
– |
+ |
+ |
полимиксину В |
+ |
+ |
– |
ОСНОВНЫЕ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЕ ПРИЗНАКИ СТРЕПТОКОККОВ ГРУППЫ А И ПРИЗНАКИ СТРЕПТОКОККОВ ГРУППЫ D
(ЭНТЕРОКОККИ)
Признаки |
Стрептококки |
|
группа А |
группа D (энтерококки) |
|
|
круглая |
чаще овальная |
|
цепочки |
парами, короткие цепочки |
|
25-38 °С |
10-45 °С |
|
– |
+ |
|
– |
+ |
|
– |
+ |
|
– |
+ |
|
+ |
– |
|
– |
+ |
МЕТОДЫ МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
ПНЕВМОКОККОВОЙ ИНФЕКЦИИ
А. Бактериологический
Материал: мокрота, кровь, гной, экссудат, отделяемое носоглотки, спинномозговая жидкость.
Б. Биологический
М атериал, сильно загрязненный, вводят внутрибрюшинно белым мышам |
|
Препарат-оттиск из органов (селезенка и др.) Окраска по Граму и на капсулу |
Посев крови, идентификация выделенной культуры |
ЗАНЯТИЕ № 3
Дата________________
Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ДИАГНОЗ КОККОВЫХ ИНФЕКЦИЙ (стафилококки и нейссерии). МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ ДИАГНОЗ ИНФЕКЦИЙ, ВЫЗВАННЫХ МИКОПЛАЗМАМИ
План занятия
1. Исследование микрофлоры зева. Макро- и микроскопия колоний, выросших на молочно-желточно-солевом и кровяном МПА.
2. Определение патогенности стафилококка. Обнаружение плазмокоагулазы, гемотоксина (демонстрация). Фаготипирование стафилококков (демонстрация). Определение чувствительности культуры к антибиотикам методом дисков и Е-тестом.
3. Менингококк. Микроскопия готовых препаратов-мазков из ликвора.
4. Микроскопический метод диагностики острой гонореи: микроскопия мазка гнойного отделяемого уретры больного острой гонореей.
5. Демонстрация лечебно-профилактических и диагностических препаратов, применяемых при кокковых инфекциях (вакцины, анатоксины, антибиотики, фаги).
6. Микоплазмы. Микроскопия мазков из мокроты больного микоплазменной пневмонией.

Окраска
по Граму