- •Часть II
- •Предисловие
- •Часть II пособия изложена на 120 страницах, состоит из введения, полутора модулей, вопросов к итоговому контролю по ним. Введение
- •Методические указания
- •1. Возбудитель чумы. Морфология - демонстрация готовых препаратов-мазков.
- •3. Приготовление, окраска и микроскопия препаратов-мазков из убитых культур бруцелл
- •4. Серологическая диагностика бруцеллеза. Реакция Райта. Регистрация результатов реакции Райта
- •Регистрация результатов реакции Райта
- •5. Ускоренный метод серологической диагностики бруцеллеза – реакция Хеддлъсона и др.
- •Регистрация результатов реакции Хеддльсона
- •6. Аллергическая диагностика бруцеллеза. Постановка пробы Бюрне (разбор).
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 1
- •А. Бактериологический
- •А. Бактериологический
- •Б. Биологический
- •В. Серологический
- •1. Для обнаружения антител
- •1. Изучение морфологии и культуральных свойств стафилококков
- •2. Бактериоскопическое исследование гноя
- •3. Изучение морфологии и культуральных свойств стрептококков
- •4. Знакомство с морфологическими свойствами пневмококка
- •Исследование флоры зева. Микроскопия и посев на кровяной агар и молочно-желточно-солевой агар.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 2
- •1. Коагулозоположительные стафилококки
- •2. Коагулазоотрицательные стафилококки
- •Методические указания
- •Демонстрация лечебно-профилактических и диагностических препаратов, применяемых при кокковых инфекциях
- •6. Микоплазмы. Микроскопия мазков из мокроты больного микоплазменной пневмонией.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 3
- •Методика фаготипирования
- •Учет и регистрация результатов
- •А. Бактериоскопический
- •Б. Бактериологический
- •В. Иммунологический метод диагностики менингококковых заболеваний
- •А. Бактериоскопический
- •Б. Бактериологический
- •А. Бактериоскопический
- •Б. Бактериологический
- •В. Серологический.
- •Занятие № 4
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Изучение морфологии и культуральных свойств дифтерийной палочки. Макро- и микроскопия культур бактерий
- •2. Типы дифтерийных бактерий. Разбор особенностей роста культур соответствующих типов на теллуритовых средах
- •3. Биохимические свойства коринебактерий. Дифференциация истинных дифтерийных бактерий от псевдодифтерийных и дифтероидов по биохимическим свойствам. Демонстрация и разбор
- •4. Правила взятия и пересылки материала от больного дифтерией для бактериологического исследования. Разбор
- •5. Бактериологическая диагностика дифтерии. Разбор схемы исследования дифтеритической пленки (или материала от бактерионосителя)
- •6. Определение токсигенности дифтерийных бактерий реакцией преципитации в агаре и биопробой на морской свинке. Разбор и демонстрация.
- •7.Изучение морфологии и культуральных свойств Listeria monocytogenes
- •8. Изучить морфологию возбудителя актиномикоза на демонстрационных препаратах. Познакомиться с культуральными особенностями возбудителя актиномикоза.
- •Контрольные вопросы
- •Занятие № 5
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Правила взятия и пересылки в лабораторию патологического материала от больного туберкулезом
- •2. Морфология туберкулезных бактерий - микроскопия готовых препаратов
- •3. Культуральные свойства туберкулезных бактерий. Рост туберкулезной палочки на жидких и твердых питательных средах (демонстрация)
- •4. Бактериоскопическая диагностика туберкулеза. Микроскопия материала с окраской по Цилю-Нильсену. Методы обогащения
- •5. Бактериологическая диагностика туберкулеза. Применение метода микрокультур (метод Прайса) для ускоренной диагностики туберкулеза (разбор и демонстрация)
- •6. Палочка проказы - микроскопия готовых препаратов
- •7. Ознакомление с составом и назначением следующих иммунопрепаратов: туберкулин Коха, очищенный туберкулин ррd-l, вакцина бцж.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 5
- •Занятие № 6
- •План занятия
- •Методические указания
- •Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл
- •Бактериологическое исследование испражнений брюшнотифозного больного: посев на среду обогащения и дифференциально-диагностические среды (разбор схемы)
- •Результаты реакции Видаля
- •Исследование пищевых продуктов на наличие энтеротоксигенного
- •Методы микробиологической диагностики пищевых отравлений, вызываемых стафилококками а. Бактериологический
- •7. Бактериологическое исследование испражнений больного при подозрении на кишечную инфекцию (начало). Посев испражнений на дифференциально-диагностические среды.
- •Контрольные вопросы
- •Б. Иммунологические
- •Занятие № 7
- •План занятия
- •Методические указания
- •Изучение морфологии, культуральных и биохимических свойств диареегенных кишечных палочек
- •Бактериологическая диагностика кишечной инфекции (продолжение). Регистрация результатов посева, сделанного на прошлом занятии. Посев на «пестрый ряд», мпа, среду Пешкова
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 7
- •Г. Классификация диареегенных Escherichia coli
- •Занятие № 8
- •План занятия
- •Методические указания
- •Изучение морфологии, культуральных и биохимических свойств
- •Контрольные вопросы
- •А. Метод колициногенотипирования
- •Типовые и индикаторные культуры набора Абботта и Шеннона для колициногенотипирования шигелл Зонне
- •Б. Методика колицинотипирования при помощи колициногенных штаммов
- •Занятие № 9
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Изучение морфологии, культуральных и биохимических свойств холерного и холероподобных вибрионов.
- •Реакция агглютинации выделенной культуры вибриона с холерной о-сывороткой
- •4. Исследование воды на наличие холерного вибриона (разбор методики).
- •Регистрация результатов посева исследуемой культуры на среды "пестрого ряда"
- •Реакция агглютинации выделенной культуры возбудителя кишечной инфекции
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 9 Методы микробиологической диагностики холеры Бактериологический
- •Методы ускоренной диагностики холеры
- •1. Иммунофлуоресцентный
- •2. Реакция пассивной гемагглютинации
- •В. Дифференциальные признаки биоваров холерных вибрионов (классического и Эль Тор)
- •Г. Дифференциальные признаки патогенных и непатогенных галофильных вибрионов
- •Д. Холерный вибрион представлен тремя сероварами:
- •Е. Биохимическая характеристика вибрионов по Хейбергу, Смиту и Гуднеру
- •Занятие № 10
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Морфология анаэробных бактерий. Микроскопия препаратов-мазков из культур патогенных анаэробов.
- •2. Изучение особенностей роста культур анаэробов на различных питательных средах.
- •5. Демонстрация препаратов, применяемых для профилактики и лечения анаэробных инфекций.
- •Контрольные вопросы
- •В. Ускоренные методы диагностики ботулизма
- •Занятие № 11
- •План занятия
- •Методические указания
- •1. Морфология анаэробных бактерий. Микроскопия препаратов-мазков из культур патогенных анаэробов.
- •2. Изучение особенностей роста культур анаэробов на различных питательных средах.
- •3. Микробиологический диагноз анаэробных инфекций. Разбор методов диагностики газовой гангрены.
- •4. Ускоренное обнаружение с. Реrfringens. Демонстрация роста на среде Вильсон-Блера, среде Китта-Тароцци и на молочной среде.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 11 Ускоренный метод диагностики возбудителей газовой гангрены по способу Комковой
- •Методы микробиологической диагностики газовой гангрены Бактериологический
- •Ускоренный метод обнаружения c. Perfringens
- •Неклостридиальная анаэробная инфекция
- •Занятие № 12
- •План занятия
- •Методические указания
- •Знакомство с классификацией возбудителей иппп
- •Микроскопия препарата-мазка окрашенного по Рамоновскому-Гимза, изучение морфологических и тинкториальных свойств возбудителя сифилиса
- •Испытуемая сыворотка крови в разведении 1:5
- •Гемолитическая система (эритроциты, барана, гемолитическая сыворотка)
- •Промикроскопировать мазки из гнойного отделяемого уретры больного гонореей окрашенных по Граму и метиленовой синькой
- •Изучение морфологии возбудителя трихомониаза.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 12
- •Бактериоскопическое исследования
- •Серологическая диагностика сифилиса
- •Вопросы к итоговому занятию по частной медицинской микробиологии для студентов 2 курса стоматологического факультета
- •Занятие № 13
- •План занятия
- •Методические указания
- •Разбор основных форм воспалительных заболеваний парадонта, их классификация.
- •Знакомство с особенностями взятия материала
- •Проведите микроскопическое исследование соскоба со слизистой оболочки десны, полученного от больного с клиническим диагнозом: «катаральный гингивит» (окраска по Граму), зарисовать.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 13
- •Занятие № 14
- •План занятия
- •Методические указания
- •Разбор основных форм воспалительных заболеваний челюстно-лицевой области.
- •Микроскопическое исследование экссудата, полученного от больного с клиническим диагнозом: «остеомиелит нижней челюсти».
- •Знакомство с бактериологический метод исследования гнойного отделяемого при воспалительных заболеваниях челюстно-лицевой области.
- •Контрольные вопросы
- •Приложение к занятию 14
- •Исследуемый материал
- •4.2. Этапы исследования материала в лаборатории
- •4.3. Прямое исследование материала
- •4.4. Способы и системы для создания анаэробных условий
- •4.5. Питательные среды и культивирование
- •Занятие № 15
- •План занятия
- •Методические указания
- •Микроскопия материала из чистых культур порфиромонад, псевдомонад, стрептококка, стафилококка, возбудителей одонтогенных заболеваний.
- •Микроскопия демонстрационных мазков из чистых культурт клостридий. Фузобактерий. Зарисовать результаты микроскопии.
- •Изучение каталазной активности у стафилококка и стрептококка, выделенных от больного воспалительным заболеванием чло, с целью их дифференциации.
- •Контрольные вопросы
- •Использованная и рекомендуемая литература
Контрольные вопросы
Какие микроорганизмы вызывают ИППП? Назовите возбудителей ИППП, нозологические формы, группы ИППП.
Каковы морфологические и тинкториальные свойства Treponema pallidum?
Каковы биохимические, антигенные и эпидемиологические свойства возбудителя сифилиса?
Какие особенности патогенеза сифилиса Вам известны?
Каковы особенности взятия материала от больного сифилисом для микробиологической диагностики?
Какие микробиологические методы применяют для диагностики сифилиса?
Какой метод при первичном и врожденном сифилисе считается основным?
Как проводиться микроскопический метод диагностики сифилиса?
Какие методы диагностики применяются при вторичном и третичном сифилисе?
Каковы особенности серологического метода диагностики сифилиса?
В чем особенности реагиновых тестов: реакции Вассермана, осадочной реакции?
Как ставиться трепонимальные реакции: иммунофлюоресцентный тест, микрогемагглютинационный?
Какой материал берут от больного для микробиологической диагностики гонореи?
Какие микробиологические методы применяют для диагностики гонореи?
Как проводиться микроскопический метод диагностики гонореи?
Каковы морфологические и тинкториальные свойства Neisseria gonorrhoeaе?
Какие микробиологические методы применяют для диагностики трихомониаза?
Как проводиться микроскопический метод диагностики трихомониаза?
Каковы морфологические и тинкториальные свойства Trichomonas vaginalis?
Приложение к занятию 12
МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА СИФИЛИСА
Методы микробиологической диагностики сифилиса обусловлены патогенезом заболевания. В первичной стадии болезни (реже при вторичном и третичном сифилисе) и при врожденном сифилисе проводиться бактериоскопическое исследование, во вторичном и третичном периодах применяют серологический метод.
Бактериоскопическое исследования
Перед взятием патологического материала сначала сифилитическую язву протирают ватным тампоном, для удаления сального налета и контаминуючои микрофлоры. Затем дно твердого шанкра раздражают скальпелем или металлической лопаточкой или энергично сжимают язву с боков пальцами в резиновой перчатке к выделению раневого экссудата. При небольшом количества прозрачной жидкости ее можно внести в каплю 0,85% раствора хлорида натрия. При невозможности взять материал со дна шанкра (фимоз, рубцевание язвы и др.) проводят пункцию регионарных лимфатических узлов. Каплю жидкости из язвы или пунктата наносят на тонкое предметное стекло (1,1-1,2 мм), накрывают покровным стеклом и исследуют в темном поле зрения (краще!), или с помощью фазово-контрастного или аноптрального микроскопа. Бледная трепонема в темном поле зрения имеет вид слегка блестящей тонкой нежной спирали с крутыми равномерными округлыми первичными завитками (8-12 завитков). Движения плавные, тем она изгибается под углом. Но особенно характерные для нее Маятникообразные колебания. Возбудитель сифилиса необходимо отличать от Treponema refringens (что колонизирует наружные половые органы), которая толще, грубее, с неравномерными крупными завитками и имеет активные беспорядочные движения, но не сгибается. Трепонемы фузосп-ирохетозного симбиоза отличаются тонким рисунком, пологими завитками и беспорядочным движением. При диагностике ротового сифилиса бледную трепонему следует дифференцировать и от зубных трепонем, особенно Т. dentium, а также от Т. buccalis. Первую из них вообще трудно отличить от сифилитического. Она, правда, короче, имеет 4-8 острых завитков, маятникообразное движение отсутствует. Т. buccalis толще, имеет грубые первоначальные завитки и беспорядочное движение. При любых сомнениях нужно учитывать, что все сапрофитные трепонемы, в отличие от бледной, хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Они не проникают в лимфатические узлы, поэтому исследования пунктатов имеет большую диагностическую ценность. Выявление в пунктате лимфатических узлов типовых трепонем беспрекословно подтверждает диагноз сифилиса. Итак, темнопольная исследования надавленные капли является наилучшим методом выявления возбудителя сифилиса. Его преимущества заключаются в том, что материал исследуют быстро, а морфология трепонем в живом состоянии наиболее характерна. В случае невозможности провести исследование в темном поле зрения можно использовать различные методы окрашивания. Бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые красители. Из многих предложенных способов окраски лучшие результаты получают при использовании окраски по Романовскому-Гимзе. Мазок подсушивают 2-3 ч. Изготовленные мазки фиксируют метиловым спиртом или в смеси Никифорова. Четкость результаты получают, когда краску Романовского-Гимзы наливают в препарат. Для этого в чашку Петри помещают обломки спичек, на них помещают предметное стекло мазком вниз и наливают краситель до тех пор, пока он смочите мазок. Время окраски при этом удваивают, 2-4 ч. При микроскопии бледные трепонемы имеют нежно-розовый цвет, а другие виды трепонем окрашиваются в синий или сине-фиолетовый цвет. Можно использовать и метод серебрения Морозовым. Трепонемы полностью сохраняют свои морфологические особенности и выглядят под микроскопом коричневыми или почти черными. Если начато лечение сифилиса химиопрепаратами, выявить возбудитель в патологических материалах даже с помощью темного поля зрения практически не удается. При получении отрицательного анализа его необходимо повторить.
