Занятие № 12

Дата________________

Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ИППП (серологический, молекулярно-биологический методы)

План занятия

1. Знакомство с классификацией возбудителей ИППП.

2. Микроскопия препарата-мазка окрашенного по Рамоновскому-Гимза, изучение морфологических и тинкториальных свойств возбудителя сифилиса.

3. Знакомство с особенностями серологической и бактериологической диагностики сифилиса.

4. Промикроскопировать мазки из гнойного отделяемого уретры больного гонореей окрашенных по Граму и метиленовой синькой.

5. Изучение морфологии возбудителя трихомониаза.

Методические указания

1. Знакомство с классификацией возбудителей иппп

Группа ИППП	Нозологическая форма	Вид возбудителя
Венгерические инфекции	Сифилис	Treponema pallidum
	Гонорея	Neisseria gonorrhoeaе
	Шанкроид (мягкий шанкр)	Haemophilus ducreyi
	Лимфогранулемотоз венерический болезнь Дюрана - Николя - Фавра	Chlamydia trachomatis
	Гранулема венерическая	Calymmatobacterium granulomatis
Болезни передающиеся в том числе и половым путем, с поражением половых органов «малые венерические инфекции»	Урогенитальный хламидиоз	Chlamydia trachomatis.
	Мочеполовой трихомониаз	Trichomonas vaginalis
	Урогенитальный кандидоз	Candida albicans
	Мочеполовой микоплазмоз	Mycoplasma hominis
	Генитальный герпес	Herpes simplex virus
	Папилломовирусная инфекция	Papillomavirus hominis
	Урогенгитальный шигеллез	Shigella species
	Контагиозный моллюск генеталий	Pox virus (Molluscovirus hominis)
	Бактериальный вагиноз	Gardnerella vaginalis, Bacteroides, Prevotella, Porphyromonas,Peptostreptococcus, Mobiluncus, Mycoplasma hominis
	Чесотка	Sarcoptes scabiei
	ВИЧ-инфекция / СПИД	Retro-virus VIH 1 VIH 2
Болезни передаваемые половым путем с преимущественным поражением других органов	Вирусный гепатит В	Hepatitis B virus
	Цитомегаловирусная инфекция	Cytomegalovirus hominis
	Амебиаз	Entamoeba histolytica
	Лямблиоз	Lamblia (Giardia) intestinalis

2. Микроскопия препарата-мазка окрашенного по Рамоновскому-Гимза, изучение морфологических и тинкториальных свойств возбудителя сифилиса

Промикроскопировать готовый препарат-мазок из пунктата регионального лимфоузла, полученного от больного с локализацией твердого шанкра в полости рта, окрашенного по Романовскому-Гимзе. Препараты зарисовать.

3. Знакомство с особенностями серологической и бактериологической диагностики сифилиса.

Бактериологическая и серологическая диагностика сифилиса имеет ряд особенностей. Отсутствие доступных методов культивирования обусловило отказ от выделения возбудителя и реализации бактериологического метода в лабораториях практического здравоохранения. Для серологической диагностики сифилиса используют две группы тестов: неспецифические (без участия антигенов трепонем) и специфические.

Серологическая диагностика
Неспецифические тесты:	Специфические тесты
РСК (реакция Вассермана) с кардиолипиновыми антигенами	ИФА
Микроприцепитации кардиолипиновых антигенов с плазмой и сывороткой больного	Реакция непрямой гемагглютинации
	Реакцию иммобилизации бледных трепонем (РИБТ)
	РИФ

Неспецифические тесты отличаются низкой чувствительностью в начале и на поздних стадиях заболевания. В настоящее время реакция Вассермана практически не используется. «Золотым стандартом» диагностики сифилиса является иммунофлюоресцентная микроскопия (РИФ-200 и РИФ-абс.) РИФ-200 предполагает разведение сыворотки крови больного в 200 раз и последующее проведение реакции. В РИФ-абс. Сыворотку предварительно истощают агглютинируя антитела к апотогенным трепонемам, затем проводят РИФ.

В качественной реакции связывания комплемента (РСК) на сифилис участвуют следующие ингредиенты:

1. испытуемая инактивированная сыворотка крови, разведенная 1:5;

2. антиген – кардиолипиновый антиген – холестеризированный спиртовой экстракт из сердечной мышцы быка;

3. комплемент, разведенный по рабочей дозе,

4. гемолитическая система.

Одновременно с исследованием испытуемой сыворотки ставят для контроля реакции с заведомо положительными (4+ и 2+) и отрицательной сыворотками крови.