Приложение к занятию 5

А. Микобактерии, потенциально патогенные для человека:

M. africanum M. intracellulare M. paratuberculosis

M. asiaticum M. kansasii M. scrofulaceum

M. avium M. leprae M. senegalense

M. bovis M. lepraemurium M. szulgai

M. chelonei M. malmoense M. tuberculosis

M. farcinogenes M. marinum M. ulcerans

M. fortuitum M. microti M. xenopi

M. haemophilium M.porcinum M. vaccae

Б. Схема идентификации микобактерий

Скорость роста субкультур

Медленно растущие Быстро растущие

(свыше 7 дней) (менее 7 дней)

Пигментообразование

Нехромогенные Хромогенные

Образование ниацина

Ниацинпозитивные Ниациннегативные

Фотоактивация пигментообразования

Нет эффекта Фотохромогены Скотохромогены

Mycobacterium tuberculorsis относится к медленно растущим нефотохромогенным ниацинпозитивным микобактериям.

Mycobacterium bovis относится к медленно растущим нефотохромогенным ниациннегативным микобактериям.

Для идентификаций других патогенных для человека микобактерий используются дополнительные тесты.

В. Методы дифференцирования истинных туберкулезных бактерий

от потенциально патогенных и сапрофитных микобактерий

	Микобактерии
	туберкулезные	потенциально патогенные	сапрофитные
Корд-фактор (трегалозодимиколат)	+	–	–
Каталазная проба	– (±)	++	++
Отношение к красителям	адсорбируют	не адсорбируют	не адсорбируют
Вирулентность для морских свинок и кроликов	+	–	–
Ниациновая проба	+	–	–

Занятие № 6

Дата________________

Тема: МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА БРЮШНОГО ТИФА И САЛЬМОНЕЛЛЕЗОВ

План занятия

1. Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл.

2. Бактериологическое исследование крови брюшнотифозного больного. Посев крови на среду с желчью (разбор с демонстрацией).

3. Бактериологическое исследование испражнений брюшнотифозного больного: посев на среду обогащения и дифференциально-диагностические среды (разбор схемы).

4. Реакция Видаля. Постановка реакции агглютинации с O- и Н-диагностикумами. Регистрация результатов реакции Видаля (разбор с демонстрацией).

5. Исследование пищевых продуктов на наличие возбудителей пищевых токсикоинфекций (разбор схемы).

6. Исследование пищевых продуктов на наличие энтеротоксигенного стафилококка и обнаружение стафилококкового энтеротоксина. Разбор методов.

7. Разобрать особенности антигенного строения и принципы современной серологической классификации сальмонелл (демонстрация схемы).

Методические указания

1. Изучение морфологических, культуральных и биохимических свойств сальмонелл

Промикроскопировать препараты-мазки из культур бактерий - возбудителей брюшного тифа, паратифа А, S. enteritidis и кишечной палочки, окрашенных по Граму. Сравнить морфологию бактерий во всех препаратах и отметить морфологическое сходство их друг с другом. Препараты зарисовать.

Исследовать характер роста возбудителей брюшного тифа, паратифа А, S. enteritidis и кишечной палочки на МПА, МПБ, Эндо.

Изучить и записать в тетрадь биохимические свойства бактерий тифо-паратифозной группы по готовым демонстрационным наборам посевов на среды "пестрого ряда".

2. Бактериологическое исследование крови брюшнотифозного

больного. Посев крови на среду с желчью (разбор с демонстрацией).

Взятая из вены больного кровь в количестве 8-10 мл для выделения гемокультуры засевается в среду с желчью (МПБ + 10 процентов желчи + 1 процент глюкозы + индикатор Андреде).

Посев крови производят непосредственно у постели больного в десятикратный (по отношению к количеству крови) объем питательной среды. Посев помещают в термостат при 37°C, а на следующие сутки производят высев на скошенный агар и на дифференциально-диагностические среды (Левина, Плоскирева, висмут-сульфит-агар, Эндо).

Отметить изменения, наступившие в среде Рапопорт в результате роста возбудителей брюшного тифа (покраснение среды) и паратифов или других возбудителей сальмонеллёзов (покраснение среды и наличие газа). Пересев культуры бактерий со среды Рапопорт на скошенный МПА и среды Плоскирева, Эндо, Левина (демонстрация).

Окончательная идентификация проводится по биохимическим свойствам и антигенным свойствам – агглютинация на стекле с монорецепторными Vi-, О- и Н-сыворотками.

Рис. 1. Возбудитель брюшного тифа Salmonella typhi	Рис. 2. Возбудитель паратифа А S. paratyphi А
Рис. 3. Возбудитель паратифа В S. enteritidis	Рис. 4. Кишечная палочка Escherichia coli