97.Методы исследования системы комплемента.

Наиболее широко используемым методом оценки функциональной активности системы комплемента является метод 50% гемолиза. Его суть сводится к тому, что исследуемый образец сыворотки крови в разных разведениях смешивают с гемолитической системой, играющей индикаторную роль. При этом, гемолитические системы, используемые для тестирования классического и альтернативного путей активации комплемента, различаются. Гемолитическая система для тестирования классического пути активации комплемента представляет собой суспензию эритроцитов барана, сенсибилизированных (обработанных) антителами к ним же. Иными словами, гемолитическая система - это суспензия комплексов антиген (эритроцит барана) - антитело (антитела к эритроцитам барана) в желатин-вероналовом буфере с ионами кальция. В случае определения активности альтернативного пути используют гемолитическую систему, представленную суспензией эритроцитов кролика в фосфатном солевом буферном растворе. Цитопазматическая мембрана кроличьих эритроцитов содержит полисахариды - значимые активаторы альтернативного пути, что и определяет возможность ее использования для тестирования активности альтернативного пути активации системы комплемента. При высоком содержании в тестируемом образце сыворотки крови комплемента уровень его активации на индикаторных эритроцитах будет высок, а следовательно степень гемолиза эритроцитов будет значительна. Сравнивая пробирки со стандартами - 50 % гемолизом, определить количество условных единиц 50% гемолиза классического пути - СН50 или альтернативного пути – АР50. Стандарты готовят путем лизиса 50 % эритроцитов с помощью дистиллированной воды.

98. Методы количественной оценки иммуноглобулинов.

реакция простой радиальнойиммунодиффузии по Манчини. Эта реакция основана на образовании крупного белкового конгломерата, состоящего из комплексов антиген-антитело, и видимого невооруженным глазом. Антигеном в данном случае являются собственно иммуноглобулины каждого класса.иммунизируя иммуноглобулинами человека животных можно получить антитела к иммуноглобулинам определенных классов человека (антисыворотка). диагностический компонент вносят в агаровый или агарозный гель, распределяют эту смесь на стеклянных пластинах.После застывания в агаровом геле с помощью специального пробойника делают лунки диаметром 1,5 – 2 мм, в которые вносят исследуемый материал. Исследуемый материал всасывается в агаровый слой. При наличии в исследуемом образце иммуноглобулинов соответствующего класса происходит реакция взаимодействия с образованием преципитатов. Площадь преципитата соответствует количеству определяемыхIg. Концентрация Ig в сыворотке крови (физиологические уровни) IgM: 0,4 - 2,2 г/л IgA: 0,7-4,0 г/л IgG: 6,0-16,0 г/л IgE: 0,00025 г/л

99. Понятие «иммунокоррекция». Меры иммунокоррекции. Классификация иммунокоррекции в зависимости от направленности.

Иммунокоррекция - комплекс мероприятий, направленных на восстановление или изменение функции ис. Меры иммунокоррекции бывают специализированными (прямыми), т.е. направленными непосредственно на иммунную систему, либо неспециализированными( нормализация образа жизни, отказ от вредных привычек, стабилизацию психоэмоционального стояния, процедуры закаливания, позволяющие усилить неспецифическую резистентность организма к разного вида воздействиям, включая стресс). В зависимости от используемых средств, иммунокоррекция: лекарственной, физиотерапевтической, климатической, физической (физические нагрузки увеличивают продукцию интерферонов). Максимальной эффективностью обладает лекарственнаяиммунокоррекция, тогда как другие виды её имеют преимущественно вспомогательное значение. Лекарственнаяиммунокоррекция проводится с помощью иммунотропных лекарственных препаратов. Эти препараты имеют разное происхождение – растительное, бактериальное, животное, синтетическое. Кроме этого ряд препаратов изготавливают с применением генноинженерных методов и гибридомной технологии. В зависимости от направленности выделяют следующие виды иммунокоррекции: заместительную, иммуносупрессирующую (иммунодепрессантную), иммуностимулирующую.

100. Заместительная иммунокоррекция. Препараты и механизмы их действия. заместитительная (ЗИ). введение готовых субстанций, выполняющих естественную функцию отсутствующего в организме компонента. ЗИ проводится для замещения отсутствующих факторов ИС (при тяжёлых иммунодефицитных состояниях, тяжёлых генерализованных инфекциях, а и др. пат проц). Для заместительной терапии используется препараты, получ из крови и клеток человека, а также рекомбинантным (генноинженерным) путём. К препаратам ЗИ относят:а) препараты иммуноглобулинов, получаемых из донорской крови, для поддержания резистентности организма пациентов с нарушениями продукции ат. Благодаря медленному катаболизму IgG достаточно 1 инъекции в месяц;

б) препараты цитокинов. Препараты интерферонов, получают либо из культуральной жидкости при культивировании в условиях invitro лейкоцитов или фибробластов человека, либо рекомбинантным путём. Рекомбинантные интерлейкины используют для лечения септических, тяжёлых гнойно-воспалительных заболеваний, лимфопролиферативных, миеломных и онкологических процессов.ЗИ может проводиться путём трансплантации костного мозга, тимуса, либо путём введения предварительно активированных цитокинами клеток иммунной системы. Как заместительная терапия будущего разрабатывается генотерапия, предполагающая введение в организм различных генов в составе вирусных, плазмидных или химических векторов.Среди побочных эффектов ЗИ следует отметить возможность аллергии и отмену выработки аналога вводимых молекул собственной испациента. При терапии препаратами цитокинов возможно развитие системных, токсических эффектов и синдрома перенапряжения иммунной системы.

101. Иммунодепрессантная терапия. Препараты и механизмы их действия. иммуносуцпрессирующая (ист) направлена на подавление функции иммунной системы. Этот эффект всегда сопровождается созданием иммунодефицита. Поэтому иммунодепрессантная терапия имеет жёсткие рамки показаний, когда основная задача – сохранение жизни. Таким абсолютным показанием является лишь одна ситуация - предотвращение отторжения трансплантата. ИСт нужна для коррекции других состояний - аутоиммунных заболеваний, лимфопролиферативных процессов, системных и генерализованных аллергических реакций. в настоящее время осуществляется с помощью лекарственных препаратов, ранее применялось и ионизирующее излучение. 1) лекарственные препараты, обладающие общей супрессирующей активностью(иммуносупрессирующий эффект - побочный). К этой группе относятся глюкокортикоидные гормоны (гидрокортизон, преднизолон, дексаметазон и др.) и цитостатики.

2) специализированные иммунодепрессанты, активность которых направлена преимущественно на иммунную систему. К этой группе иммунодепрессантов принадлежат лекарственные вещества-антибиотики, продуцируемые некоторыми стрептомицетами и морскими грибами. Создание таких препаратов основано на методах генной инженерии и гибридомной технологии: вариабельный фрагмент моноклональныхат (ответственный за связь с аг клетки) имеет животное происхождение, а константный – является человеческим, поэтому такие моноклональные антитела называют гуманизированными.

102. Иммуномодулирующая терапия. Препараты и механизмы их действия. предназначена для стимуляции функций ИС при вторичных иммунодефицитах, а также при различных заболеваниях, в патогенез которых вовлечена иммунная система. Как правило, иммуностимулирующая/иммуномодулирующая терапия не проводится при декомпенсированных иммунодефицитах. - препараты растительного происхождения, оптимизирующие взаимодействие гомеостатических систем организма (настойки элеутерококаа, солодки, лимонника и др.), препараты микробного происхождения (мини-вакцины, вакцины, препараты-прибиотики (нормализуют аутомикрофлору кишечника),препараты клеточной стенки бактерии (При введении в организм стимулируют фагоцитарную и цитокинпродуцирующую активность макрофагов, активируют воспаление, что используется для лечение латентно протекающих инфекций), препараты синтетического происхождения);-препараты тимусасод его гормоны, необходимые для дифф-ки собственного тимуса; прим таких препаратов помогает в дифф-ке собственных лимфоцитов, препараты стимулирую антителогенез. –препараты селезёнки сод в-ва, неидентифицированные до сих пор полностью, но применение их способствует усилению фагоцитарной активности, особенно в рамках утилизации иммунных комплексов. –препарататы из крови телят (солкосерил, актовегин, плазмол) основной эффект связан с усилением репаративных процессов. - препарат костного мозга (миелопид) усиливает функцию В-лимфоцитов,- синтетические препараты, обладающие эффектами стимуляции иммунной системы (полиоксидоний, диуцифон, декарис и т.д.).Определённой иммуномодулирующей активностью обладают витамины, препараты с антиоксидантными и прооксидантными свойствами, которые также широко применяют при комплексной терапии инфекционных, воспалительных и аутоиммунных заболеваний