- •Федеральное агентство по рыболовству федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «мурманский государственный технический университет»
- •Практическая работа 1 предварительное исследование водоемов
- •Процедура отбора проб
- •Санитарно-микробиологические исследования отбор, хранение и транспортирование проб
- •Практическая работа 2.1 ценозы природных вод
- •Цепи питания (трофические связи)
- •Практическая работа 2.2 определение интенсивности микробиологических процессов
- •Практическая работа 3 Геохимическая деятельность водных микроорганизмов. Основные физиологические группы микроорганизмов, участвующие в превращениях веществ в водоемах
- •Теоретические сведения
- •Практическая работа 4 Методы оценки экологического состояния водоемов
- •1. Лимносапробная группа вод
- •2. Эусапробная группа вод
- •3. Транссапробные воды
- •Сапробность и биоиндикация качества воды
- •Критерии и шкала оценивания
- •Рекомендуемая литература
- •Рецензия на методические указания к практическим работам по дисциплине «Гидромикробиология» для направления 06.03.01 «Биология» для студентов очной формы обучения
Цепи питания (трофические связи)
К наиболее изученным и используемым в производственной практике биоценотическим связям следует отвести пищевые связи (трофические).
Цепи питания - это ряды видов животных, растений и микроорганизмов, связанные пищевыми отношениями, или - последовательности организмов, чtрез которые передается энергия из мест ее первичного накопления, в которых каждое звено является пищей.
Цепи питания начинаются продуцентами - организмами, способными производить органические вещества, К продуцентам относятся зеленые растения, синтезирующие органические вещества из углекислоты воздуха и почвенных растворов с помощью энергии солнечного света при участии зеленого пигмента - хлорофилла (фотосинтез) и серные, водородные и другие бактерии, использующие для синтеза органики окисление химических веществ.
Цепи питания представлены различными видами животных и растений и установлены в ходе длительного исторического развития органического мира. Они связывают различные виды, объединяя их в сообщества - биоценозы. Строение биоценоза, его длина, ярусность завися от числа и длины цепей питания.
Питание простейших осуществляется различными способами:
за счет органических веществ по типу фотосинтеза растительных организмов, в протоплазме которых содержатся особые окрашенное органические вещества;
сапрофитным - впитывая поверхностью тела растворенные органические вещества; это преимущественно формы, обитающие в водоемах, богатых гниющими остатками, а также паразиты;
галозойным - захватывают твердые частицы пищи (это некоторые корненожки и жгутиковые и большинство инфузорий); некоторые формы имеют ждя этого органеллы для захвата твердой пищи, ее переваривания и выбрасывания непереваренных остатков.
Практическая работа 2.2 определение интенсивности микробиологических процессов
Обнаружение в воде или грунтах представителей различных физиологических групп микроорганизмов, осуществляющих трансформацию определенных веществ, еще не является доказательством того, что эти процессы протекают в природных условиях, поскольку на элективных средах микроорганизмы могут развиваться из покоящихся, неактивных форм. Только прямое определение интенсивности процессов в условиях, максимально приближенных к естественным, позволяет подойти к правильной количественной оценке микробиологической деятельности в природных местообитаниях.
В настоящее время существуют различные методы измерения микробиологической активности в морской воде и донных отложениях. В основном они делятся на две большие группы: а) методы, прослеживающие судьбу отдельных субстратов и б) методы оценки изменений в пределах микробного сообщества. В данном разделе рассматриваются методы первой группы.
1. Измерение деструкции органического вещества. Основная роль бактерий в океане состоит в минерализации органического вещества и изучению этой стороны деятельности морских бактерий, или гетеротрофной активности, уделялось наибольшее внимание.
1.1. Кислородный метод. Один из первых, методов оценки деятельности, микроорганизмов в водоеме был предложен Винбергом (1934) для изучения интенсивности фотосинтеза и дыхания водорослей и бактерий. Метод состоит в том, что определяется изменение содержания кислорода в темных и светлых склянках, заполненных исследуемой водой и помещенных в водоем на сутки. Разница между содержанием кислорода в исходной пробе и его содержанием в темной склянку через сутки и соответствует количеству кислорода, пошедшего на окисление органического вещества. Чтобы перейти к количеству органического вещества, полученную величину умножают на коэффициент 0,93, а к количеству углерода - на 0,37 (массовые).
Достоинства этого метода состоят, во-первых, в том, что он не требует применения сложной и дорогостоящей аппаратуры, и, во-вторых,- что очень существенно,- кислород является естественным и универсальным субстратом, потребляющимся при окислении органического вещества.
Метод получил широкое распространение при изучении продукции и деструкции органического вещества в пресноводных водоемах. Однако, низкая чувствительность метода (им улавливаются изменения концентрации не менее 0,01 мг О2/сутки) позволяет использовать его только в эвтрофных прибрежных водах, лагунах и эстуариях и делает его непригодным для работы в открытом океане, где преобладают олиготрофные условия.
При применении этого метода невозможно разделить количество кислорода, идущего на дыхание бактерий, микрофлагеллят или простейших. Попытки же размерного разделения этих групп приводят к тому, что нарушается сложившееся в естественных условиях равновесие.
1.2. Радиоизотопные методы. Методы обычного химического анализа оказываются недостаточно чувствительными при регистрации изменений концентрации различных соединений, потребляемых или образуемых микроорганизмами в природных условиях. Новые возможности открылись благодаря разработке высокочувствительных радиоизотопных методов.
Использование таких методов в водной микробиологии проводится по общей для различных изотопов схеме. Образец воды или ила инкубируется с меченым радиоактивным соединением (которое вводится непосредственно в образец) в течение непродолжительного времени в условиях, максимально приближенных к естественным. После этого проводится измерение радиоактивности микробной массы или продуктов ее жизнедеятельности, либо той и другой.
Один из таких методов, предложенный Романенко (1965) и примененный им при работе на пресноводных водоемах, позволяет определить интенсивность деструкции органического вещества по гетеротрофной ассимиляции С14О2.
В опытах как с чистыми культурами, так и с природной водой было установлено, что между потреблением кислорода и количеством ассимилированной углекислоты имеется постоянное соотношение: на 1 мг использованного на дыхание О2 ассимилируется 7 мкг С/СО2. Благодаря этому возможно определять потребление О2 на дыхание по гетеротрофной ассимиляции С14О2. Последнюю определяют, инкубируя пробы воды с меченым С14 карбонатом в темноте в течение суток.
Следует при этом иметь в виду, что значительные трудности возникают при попытке разделить количество СО2, ассимилированного хемосинтезирующими и гетеротрофными бактериями. Поэтому к использованию этого метода в тех условиях, где можно ожидать присутствия обеих групп бактерий, следует подходить с большой осторожностью. Для анаэробных условий этот метод непригоден.
Некоторые зарубежные авторы (Banse, Overbeck) считают, что этот метод дает завышенные величины и полученное в условиях пресноводных водоемов соотношение между 02 и С, при переходе на тропические морские водоемы нуждается в перепроверке.
За рубежом широкое признание получил метод определения гетеротрофной активности по потреблению низких концентраций органических субстратов (глюкозы, ацетата, гидролизата белка) меченых С14..
Метод был вначале введен Парсонсом и Стрикландом (.1962) и далее развит Хобби и Райтом (1966), которые показали, что низкомолекулярные органические соединения потребляются фитопланктоном и бактериями по-разному, при низких концентрациях субстрата бактерии получают преимущество благодаря особенностям транспортных систем. Потребление небольших количеств глюкозы и ацетата следует кинетическому уравнению Михаэлиса-Ментена. Максимальная скорость потребления субстрата (Vmax ) была названа Хобби и Райтом относительным гетеротрофным потенциалом.
Расчет быстроты потребления субстрата этим методом проводится графическим путем. При этом можно измерять природные концентрации субстрата, если они не поддаются измерению химическими методами. Время инкубации с субстратам должно быть кратким.
К числу недостатков этого метода относится прежде всего то, что нет субстратов, которые бы использовались всеми бактериями, и отмечается потеря части С14 в процессе обработки фильтра.
