- •1. Эволюция клетки, одноклеточные и многоклеточные организмы, прокариоты и эукариоты уровни организации живой материи.
- •2. Структура нуклеиновых кислот.
- •3. Синтез днк: вилка репликации, «ведущая» и «отстающая» нити при репликации. Фрагменты Оказаки.
- •4. Комплекс белков в репликационной вилке.
- •7 Вопрос. Опыт Месельсон – Сталь, доказывающий полуконсервативный метод репликации днк.
- •8 Вопрос. Опыты Гриффиса и Авери, доказывающие, что днк – наследуемая структура.
- •9. Выделение плазмидной днк
- •15.Гибридизация нуклеиновых кислот. Саузерн- и нозерн-блоттинг.
- •16. Разделение и анализ фрагментов днк в агарозном геле. Параметры определяющие скорость прохождения фрагментов днк в агарозном геле. Маркеры молекулярного веса днк.
- •17. Клонирование днк in vivo. Методы трансформации плазмидами. Получение геномной библиотеки с помощью плазмидных векторов. Рекомбинантная днк
- •20.Суть метода пцр
- •Подготовки исследуемой пробы материала, которая в большинстве случаев сводится к выделению днк или рнк;
- •Собственно полимеразной цепной реакции;
- •Детекции продукта пцр (амплифицированной нуклеиновой кислоты).
- •21. Методы секвенирования: секвенирование днк по Сэнгеру, современные методы секвенирования.
- •1. Джеймс Уотсон
- •2. Френсис Крик
- •3. Морис Уилкинс
- •4. Розалинд Франклин
- •5. Эрвин Чаргафф
- •6. Хар Корана
- •7. Роберт Холлей, Холлей разделил Нобелевскую премию по физиологии и медицине 1968 г. С Харом Гобиндом Картой и Маршаллом Ниренбергом «за расшифровку генетического кода и его роли в синтезе белка
- •8. Маршал Ниренберг
- •9. Кэри Мюллис
- •10. Майкл Смит
- •15. Элизабет Блэкберн
- •16.Кэрол Грейдер
- •17. Джек Шостак.
5. Эрвин Чаргафф
Главным направлением научной деятельности было изучение химического состава и структуры нуклеиновых кислот. Эрвин Чаргафф определил количественное отношение азотистых оснований, входящих в их состав. В 1950 — 1953 годах им было показано, что общее количество адениновых остатков в каждой молекуле ДНК равно количеству тиминовых остатков, а количество гуаниновых остатков — количеству цитозиновых. Правила Чаргаффа использовали Френсис Крик и Джеймс Уотсон при определении структуры ДНК в виде двойной спирали. Также Чаргафф доказал, что ДНК обладает видовой специфичностью, и отверг гипотезы о существовании многих разновидностей ДНК. Эрвин Чаргафф был первым, кто начал исследовать денатурацию ДНК. Кроме того, он занимался исследованием свертывания крови, изучал липиды и липопротеины и метаболизм аминокислот.
6. Хар Корана
Лауреат Нобелевской премии по физиологии и медицине в 1968 году (совместно с Робертом Холлеем и Маршаллом Ниренбергом) «за расшифровку генетического кода и его роли в синтезе белков». В 1954 году Корана опубликовал работу, в которой описывал синтез АДФ и АТФ с помощью карбодиимидной реакции. Он хотел синтезировать ген. И ему это удалось: впервыe ген был xимически синтезирован им в 1970 году, затем Корана синтезировал ген, родственный первому, и в 1979 году продемонстрировал, что они функционируют в бактерии. на счету которого много примечательных достижений, в том числе первый практический синтез нуклеотидов и коферментов в середине 1950-х. Он был одним из первых учёных, начавших работать на стыке нескольких наук (таких как физика, химия и биология), и первым ввёл термин «химическая биология». В 1972 году Гобинд описал полный химический синтез функциональных генов тРНК, что стало беспрецедентным и до сих пор непревзойдённым достижением в области химической биологии. Также Корана был первым учёным, синтезировавшим олигонуклеотиды[12].
7. Роберт Холлей, Холлей разделил Нобелевскую премию по физиологии и медицине 1968 г. С Харом Гобиндом Картой и Маршаллом Ниренбергом «за расшифровку генетического кода и его роли в синтезе белка
8. Маршал Ниренберг
Лауреат Нобелевской премии по физиологии и медицине в 1968 году (совместно с Робертом Холли и Харом Гобиндом Кораной) «за расшифровку генетического кода и его роли в синтезе белков»
В 1960 году к Ниренбергу совместно с Дж. Генрих Маттеи начал изучение нуклеотидов. Ниренберг и Маттеи вне бактерии создали синтетическую молекулу РНК и экспрессировали её в E.coli
9. Кэри Мюллис
Работая в компании Cetus, Муллис разработал метод полимеразной цепной реакции, который революционизировал молекулярную биологию и медицину. В 1993 году он получил за это Нобелевскую премию по химии.
Метод включает четыре компонента: сегмент двойной спирали ДНК, называемый темплатной ДНК, который следует копировать, два олигонуклеотидных праймера (короткие отрезкив односпиральной ДНК, каждый из которых комплементарен одной из коротких последовательностей темплатной ДНК), нуклеотиды – химические строительные блоки, из которых строится молекула ДНК, и фермент полимераза, который копирует темплатную ДНК, присоединяя к ней свободные нуклеотиды в правильной последовательности.
Эти ингредиенты нагревают, что вызывает разъединение двойной спирали темплатной ДНК на отдельные спирали. Смесь охлаждают, чтобы праймеры связались с комплементарными концами отрезков темплатных цепей. Затем полимераза начинает копировать темплатные отрезки присоединением нуклеотидов на один из концов праймеров и в итоге производя двойную спираль ДНК.
Повторение цикла увеличивает количество ДНК по экспоненте: каждые 30 циклов, что занимает всего несколько минут, дают более миллиарда копий исходной последовательности ДНК.
