55. Биосинтез пуриновых нуклеотидов

У человека и других млекопитающих пуриновые нуклеотиды синтезируются главным образом для обеспечения потребностей организма в мономерных предшественниках нуклеиновых кислот, а также в, соединениях, выполняющих ряд другие функций (начало лекции). У некоторых позвоночных (птицы, земноводные, рептилии) синтез пуриновых нуклеотидов несет дополнительную функцию – является частью механизма, с помощью которого выводятся излишки азота в виде мочевой кислоты; такие организмы называют урикотелическими. Организмы, у которых конечным продуктом азотистого обмена является мочевина (как у человека), называют уреотелическими. Поскольку урикотелические организмы удаляют «излишки» азота в виде мочевой кислоты, синтез пуриновых нуклеотидов у них идет более интенсивно, чем у уреотелических.

На рисунке изображена формула пурина и показано происхождение каждого из атомов. Данная информация получена в процессе радиоизотопных исследований, проведенных на птицах, крысах и человеке.

Здесь глицин дает атомы С-4, С-5 и N-7; атом N-1 происходит из аспартата. Атомы N-3 и N-9 происходят из амидогруппы боковой цепи глутамина. Активированные производные тетрагидрофолата поставляют С-2 и С-8, тогда как СО₂ служит источником С-6.

Первая стадия – образование 5-фосфорибозил-1-пирофосфата (ФРПФ). Эта реакция не уникальна для биосинтеза пуриновых нуклеотидов. ФРПФ служит также предшественником в синтезе пиримидиновых нуклеотидов, аминокислот гистидина и триптофана, а так же необходим для синтеза коферментов NAD и NADP. ФРПФ синтезируется из АТР и рибозо-5’-фосфата, который в свою очередь образуется в реакциях пентозофосфатного пути.

Вторая стадия – является важнейшим этапом синтеза пуриновых нуклеотидов de novo – под действием фермента ФРПФ-глутамил-амидотрансферазы амидогруппа боковой цепи глутамина замещает пирофосфатную группу, присоединенную к С-1 ФРПФ. В результате образуются глутамат и 5-фосфорибозиламин. (при этом -конфигурация С-1 переходит в  и формируется N-9 пурина)

Третья стадия – 5-фосфорибозиламин вступает в реакцию с глицином – аминогруппа реагирует с карбокси-группой аминокислоты с образованием амидной связи. Таким образом, мы получаем атомы пурина С-4, С-5 и N-7.

Четвертая стадия – атом азота N-7 формилируется (присоединяется альдегидная группа) под действием N⁵,N¹⁰-метенилтетрагидрофолата. В результате этой реакции поступающий одно-

углеродный фрагмент занимает положение С-8 в формирующемся пуриновом основании.

Тетрагидрофолат

Тетрагидрофолат (тетрагидроптероилглутамат) – многоцелевой переносчик одно-углеродных фрагментов. Он состоит из трех структурных единиц: замещенного птеридина, n-аминобензоата и глутамата. Млекопитающие не способны синтезировать кольца птеридина. Они получают птеридин с пищей или от микроорганизмов кишечной флоры.

Одноуглеродный фрагмент, переносимый тетрагидрофолатом, связывается с атомом азота N⁵ или N¹⁰ илис обоими. Этот момент может иметь три степени окисления. Наиболее восстановленная форма – метильная группа, промежуточная – метиленновая. Наиболее окисленные формы – метенильная, формильная или формимино-группа. (фрагмент СО₂, то есть с максимальной степенью окисления, переносится биотином)

Пятая стадия – в ней снова участвует глутамин, как донор амидной группы. Данная группа замещает кето-группу у атома С-4 и присоединенный атом азота займет в молекуле пурина положение N-3.

Шестая стадия - замыкании имидазольного кольца. Полученный промежуточный продукт содержит полное пятичленное кольцо пуринового остова.

Теперь начинается образование второго – то есть шестичленного кольца.

Седьмая стадия – карбоксилирование атома С-5, то есть присоединение к нему карбокси-группы, источником которой служит СО₂, образующийся в процессе дыхания. Мы получаем атом пурина С-6.

Восьмая и девятая стадии – образование атома азота в положении 1. Он происходит из -аминогруппы аспартата. Сначала карбокси-группа, полученная в прошлой реакции, реагирует с -аминогруппой аспартата. В этой реакции затрачивается энергия АТР. Мы получаем амидную группу с присоединенным к ней органическим фрагментом – сукцинильной группировкой. В следующей реакции данная сукцинильная группа удаляется в виде фумарата. Остается свободным атом пурина N-1.

Десятая стадия – здесь атом N-3, образовавшийся в стадии 5, формилируется (присоединяется альдегидная группа) под действием N¹⁰-формилтетрагидрофолата (донора атома углерода). В результате образуется атом С-2.

Одиннадцатая стадия – замыкание шестичленного кольца. В результате образуется первый пуриновый нуклеотид – инозинмонофосфат (инозиновая кмслота, IМР).

Образование АМР и GМР из IMP

АМР из IMP образуется вследствие реакции замещения кето-группы в 6-ом положении пурина на амино-группу с использованием амино-группы аспартата. Промежуточной стадией является образование аденилосукцината. Данная реакция протекает с участием GТР. Сукцинильная группировка затем удаляется в виде фумарата. Образуется АМР.

GМР из IMP также образуется в две реакции. В 1-ой - при участии NAD и Н2О происходит окисление IMP с образованием ХМР (ксантинмонофосфата). Затем ХМР аминируется амидо-группой глутамина. Данная реакция протекает с участием GТР (перекрестная регуляция!).