18. Лабораторная диагностика микоплазменной пневмонии.

Лабораторная диагностикаМатериал для исследования. При пневмониях и ОРЗ исследуютмокроту, при поражении урогенитального тракта – мочу, отделяемоеиз уретры, влагалища, цервикального канала. В более поздние срокиисследуют сыворотку на наличие антител.Серологический метод. Исследуют парные сыворотки в ИФА,РПГА, РСК с целью выявления увеличения титра антител в 3-4 раза.

Экспресс-диагностика. Для выявления антигена в качестве экс-пресс-метода можно использовать РИФ или ИФА, ВИЭФ.Бактериологический метод. Производят посев исследуемого ма-териала на вышеуказанные среды для культивирования микоплазм.

Индикацию проводят по выявлению колоний типа «яичницы-глазуньи», а идентификацию – по реакции ингибиции роста илиугнетения метаболизма со специфическими сыворотками на средах смочевиной, глюкозой или аргинином и индикатором, добавленным

непосредственно к среде. Если на средах рост отсутствует, то видмикроба соответствует сыворотке. При оценке реакции ингибицииметаболизма результаты оценивают по отсутствию изменений цветасреды. При этом необходимо учитывать, что аргинин разлагаютМ.hominis, глюкозу – M.hominis и M.geпitalium, маннозу –M.pneumoniae, мочевину – U.urealyticum (субстраты разлагаются до

кислоты).Молекулярно-биологический метод – ставят ПЦР со специфиче-скими праймерами.Метод молекулярной гибрдизации (ДНК-зондов) позволяет уста-новить не только наличие микоплазм в исследуемом материале, но иопределить их видовую принадлежность.

Профилактика неспецифическая.Лечение: назначают антибиотики (кроме группы пенициллина ицефалоспоринов, т.к. микроб не имеет клеточной стенки). Лучше использовать макролиды последнего поколения (рокситромицин, азит-ромицин), а также тетрациклины (доксициклин).

19. Легионеллы: таксономия, свойства, роль в патологии человека, лабораторная диагностика.

Таксономия. Legionella pneumophiia относится к семействуLegionellaceae, роду Legionella. Морфологические свойства. Легионеллы – это мелкие, поли-морфные грамотрицательные палочки с заостренными концами, ино-гда встречаются нитевидные формы. Спор и капсул не образуют,имеют жгутики, которые располагаются полярно (амфитрихи), в ци-топлазме обнаруживают липидные включения.

Культуральные свойства. Аэробы, хорошо растут в присутствии5% СО2 на специальных средах (угольно-дрожжевой агар, среды с ци-

стином, кровью, железом), оптимум температуры роста 35-370 С. На3-5 день появляются колонии с коричневым пигментом, диффунди-

рующим в агар.Легионеллы – факультативные внутриклеточные паразиты, хо-рошо размножаются в желточном мешке куриного эмбриона и куль-туре клеток. Некоторые легионеллы обладают аутофлюоресценцией(облучение УФ-лучами вызывает бело-голубое свечение).Биохимические свойства: разжижают желатин, разлагают крах-мал, не ферментируют углеводы и мочевину, не редуцируют нитраты,выделяют каталазу, оксидазу, протеазы.__Патогенез: возбудитель проникает в легкие, в процесс вовлека-ются зоны интенсивного газообмена. Заболевание начинается с ниж-них отделов дыхательных путей, терминальных бронхиол, альвеол,что сопровождается легочной инфильтрацией. Макрофаги поглощаютвозбудителя, выделяют цитокины, которые стимулируют воспали-тельные реакции. В очаге накапливаются нейтрофилы, альвеолярныемакрофаги. Взаимодействие легионелл с фагоцитирующей клеткойпроисходит в несколько этапов: контакт возбудителя с рецепторамиее поверхности; проникновение в фагоцит и включение механизмов,ингибирующих бактерицидное действие фагосомы; образование «ре-пликативной вакуоли», внутриклеточное размножение возбудителя,приводящее к гибели фагоцита. При фагоцитозе легионеллы вызыва-ют ингибицию «кислородного взрыва», изменение рН среды фагосо-

мы.В паренхиме органов формируются абсцессы, они могут вскры-ваться, образуя каверны. Возможна диссеминация возбудителя с кро-вью в различные органы и ткани, что приводит к многообразным про-явлениям заболевания: болезнь легионеров (тяжелая пневмония), пон-тиакская лихорадка (интоксикация без признаков пневмонии) и т.д.Лабораторная диагностикаМатериал для исследования: забирают плевральную жидкость,мокроту, кровь, кусочки легочной ткани (трупный материал).Экспресс-диагностика. Применяют РИФ, ВИЭФ для выявленияантигена в исследуемом материале, ПЦР или метод ДНК-зондов,ИФА с моноклональными антителами.

Бактериологический метод. Делают посев материала на угольно-дрожжевой агар, выросшие коричневые колонии подвергают микро-

скопии, ставят реакцию агглютинации, определяют биохимическиесвойства. Можно выращивать возбудителя в культуре ткани, курином

эмбрионе и заражать морских свинок.Серологический метод проводится с использованием парных сы-вороток. Ставят РПГА, непрямую РИФ. Диагностическим считаетсянарастание титра АТ в 4 раза или высокие титры антител 1:128 (ивыше) при однократном исследовании на поздних стадиях болезни.