Лабораторная диагностика менингококка.

Материал для исследования:

- спинномозговая жидкость(ликвор) при подозрении на эпидемический церебро­спинальный менингит. Забор путем спинномозговой пункции.

Доставка в бак.лабораторию не позднее 2-х часов, предохраняя от охлаждения (в центрифужной пр-ке).

- отделяемое слизистой оболочки носоглотки при подозрении на назофарингит и при обследовании на носительство. Забор материала стерильным ватным тампо­ном , укреплённым на гибкой алюминевой проволке. Перед забором материала там­пон изгибают о край пробирки под тупым углом на расстоянии 3-4 см от того конца, на котором накручена вата.

- кровь, при подозрении на менингококкцемию( сепсис). Берyт стерильно из локтевой вены 5-10 мл.

Материал брать до начала лечения, натощак или не ранее 3-4 часов, после . последнего приёма пищи.

- Методы диагностики: микроскопический, микробиологический, серологический.

Ход исследования

Первый день: .

Ликвор центрифугируют, осадок микроскопируют, окрашивая препарат водным раствором фуксина или метиленовым синим. Обнаружив диплококки бобовидной формы, расположенные внутри- и внелейкоцитарно - выдаем предварительный ответ. Далее, каплю ликвора засеваем на СА штрихами. Ocтавшийся осадок в центрифужной пр-ке заливают полужидким СА. Посевы помещают в термостат при 37*С.

Слизь из носоглотки~ взятая стерил. ватным тампоном с загнутым концом вверх. Извлекая тампон не касаться языка, щек, зубов. Посев сразу на ч.Петри с СА+линкомицин. Данный антибиотик подавляет рост сопутствующих ГР «+» кокков в слизи, не дейcтвуя на менингококк. Засеянные чашки доставляют в лабораторию, охраняя от охлаждения и высыхания. Термостатирование при 37*С

Кровь, 5-10 мл помещают во флакон с сахарным бульоном в соотношении 1:10. Термостатирование при 37*С.

Второй день:

1.Изучение культуральных св-в культур, выросших на ч.пeтpи(ликвор, слизь). При наличии подозрительных колоний их выделяют на ч.петри с СА для получения Ч.К. Посев штрихом. Термостатировние при 37*С.

2.Изучение роста на сахарном бульоне(посев крови). При наличии его пересев на СА. При отcyтcтвии роста посевы в колбе вновь помещают в термостат, выдерживая их до 10 суток с контрольными; высевами на 3,5,7 сутки. Если после 10 суток рост не появился на сахарном бульоне и на СА при контрольных высевах, выдаем ответ отрицательный и исследование прекращаем. Для стимуляции выделения гемокультуры посевы помещают в эксикатор с водой и заженной свечой, что создает кон-цию углекислого газа в эксикаторе равной 70%.

Третий день:

1.Изучение роста Ч.К., проверка её чистоты - метил.синия окраска.

2Лостановка диф. тестов для отличия от непатогенных Нейссерий(катарального диплококка):

- высев на МПА, термостатирование при 37*С;

- высев на СА, термостатирование при 37*С;

- высев на СА, оставить при 22*С;

- высев на р.Гисса, куда добавить 0,25 % сыворотки - термостатирование при 37*С - постановка пробы на оксидазу: на колонии Ч.К. наносят каплю диметилпарафенилендиамина.Учет через 1-2 мин. При наличии фермента оксидазы у культуры колонии окрашиваются в розовый цвет.

- определение серогруппы менингококка: на предметное стекло наносят по одной капле неразведённых (концентрированных) антименингококковых сывороток группы А,В,С и др., каплю физ.р-ра(контроль) последовательно в каждую каплю на петле добавляют Ч.К. и эмульгируют. Перед вносов культуры в очередную каплю бак. петлю прожечь, чтобы антитела одной сыворотки не попали в каплю другой сыворотки. Учет с контроля - должен быть равномерно мутным.

Наличие агглютинатов в одной из рабочих капель определяет гр. менингококка.

Четвёртый день: