1.3 Лабораторная работа 3. Реакция на первичную аминогруппу

Эта реакция основана на способности аминокислот образовывать с азотистой кислотой неустойчивое диазосоединение, разлагающееся с образованием свободного азота:

1 Цель работы – провести реакцию на первичную аминогруппу аминокислот

2 Приборы и материалы

Аминокислота 1 %

Нитрит натрия 3 %

Уксусная кислота 10 %

3 Описание работы

В пробирку наливают 2 мл 1 % раствора аминокисло­ты, прибавляют 2 мл 3 % раствора нитрита натрия, 0,5 мл 10 % раствора уксусной кислоты и перемешивают. Выделяются пузырьки газообразного азота.

4 Контрольные вопросы

На чем основана реакция на первичную аминогруппу?

1.4 Лабораторная работа 4. Реакция на тирозин (Миллона)

Реактив Миллона (смесь азотнокислых и азотистокислых солей оксида ргути (I) в концентрированной азотной кисло­те) открывает в белке циклическую аминокислоту тирозин, имеющую фенольную группу, которая при взаимодействии с реактивом Миллона дает ртутную соль, окрашенную в розо­во-красный цвет.

Реакцию Миллона дают все белки, за исключением тех, молекулы которых не содержат тирозина (желатина, клупеин и др.):

Свободный тирозин реагирует с реактивом Миллона ана­логично, но при этом не образуется осадка, а раствор при­обретает красный цвет.

1 Цель работы – провести качественную реакцию на тирозин

2 Приборы и материалы

Водяная баня

Электроплитка

Тирозин 1 %

Белок 1 %

Гидролизат белка

Реактив Миллона

3 Описание работы

Берут три пробирки. В 1-ю отмеряют 2 мл 1 % раство­ра тирозина, во 2-ю пять капель 1 % раствора белка, в 3-ю – пять капель гидролизата белка. Во все пробирки до­бавляют по три капли реактива Миллона. Пробирки осто­рожно нагревают. Происходит красное окрашивание.

4 Контрольные вопросы

1. Какую аминокислоту выявляет реакция Миллона?

2. Что представляет собой реактив Миллона?

1.5 Лабораторная работа 5. Ксантопротеиновая реакция

Ксантопротеиновая реакция открывает наличие в белках циклических аминокислот — фенилаланина, тирозина, трипто­фана, содержащих в своем составе бензольное кольцо.

Большинство белков при нагревании с концентрирован­ной азотной кислотой дает желтое окрашивание, переходя­щее в оранжевое при подщелачивании. Например:

Примечание. В зависимости от количества прибавленной азотной кислоты может образовываться и смесь динитро- и нитротирозина.

Реакция обусловле­на нитрованием бензольного кольца этих аминокислот с об­разованием нитросоединений желтого цвета.

Далее продукты нитрования реагируют с едким натром или гидроксидом аммония с образованием натриевой со­ли или аммонийной соли, имеющей желто-оранжевую окраску.

Ксантопротеиновую реакцию, кроме белков, пептидов и циклических аминокислот, дают также многие простые аро­матические соединения (бензол).

1 Цель работы – провести качественную реакцию на циклические аминокислоты

2 Приборы и материалы

Водяная баня

Электроплитка

Белок 1 %

Гидролизат белка

Триптофан

Фенол

Азотная кислота (конц.)

Едкий натр 10 %

3 Порядок проведения работы

В 1-ю пробирку наливают пять капель 1 % раствора белка. В следующие три пробирки соответственно по пять капель гидролизата белка, пять капель фенола и две капли раствора триптофана. Во все пробирки добавляют по три капли концентрированной азотной кислоты. Все пробирки нагревают на водяной бане, появляется желтое окрашива­ние. После охлаждения в 1-ю, 2-ю и 4-ю пробирки прили­вают по каплям 10 % раствор едкого натра (10 капель) до появления оранжевого окрашивания.