3 Описание работы

В две пробирки наливают по пять капель концентриро­ванной азотной и серной кислот. Затем, наклонив пробирки под углом 45°, осторожно по стенке пробирки (чтобы жидко­сти не смешивались) наливают такой же объем раствора белка. На границе двух слоев жидкости появляется осадок белка в виде тонкого белого кольца. Осторожно встряхи­вают пробирки, обнаруживают растворение осадка белка при осаждении серной кислотой, в пробирке с азотной кислотой белок не растворяется.

4 Контрольные вопросы

За счет чего происходит осаждение белков неорганическими кислотами?

2.5 Лабораторная работа 16. Осаждение белков органическими кислотами

Белки из растворов могут осаждаться органическими кис­лотами. Трихлоруксусная и сульфосалициловая кислоты яв­ляются очень чувствительными и специфическими реактива­ми на белок.

Под действием органических кислот происходит дегидра­тация белковой молекулы и снятие заряда.

Трихлоруксусная кислота осаждает только белки и не осаждает продукты распада белка и аминокислоты, поэтому ею пользуются часто для полного удаления белков из биоло­гических жидкостей. В этих условиях продукты распада бел­ков остаются в растворе.

1 Цель работы – провести осаждение белков органическими кислотами

2 Приборы и материалы

Белок 1 %

Сульфосалициловая кислота 10 %

Трихлоруксусная кислота 10 % (ТХУ)

3 Описание работы

В две пробирки наливают по 5 капель 1 % раствора белка, в одну пробирку добавляют 1 – 2 капли 10 % рас­твора сульфосалициловой кислоты, в другую – 1 – 2 капли 10 % раствора трихлоруксусной кислоты. В пробирках об­разуется осадок белка.

4 Контрольные вопросы

За счет чего происходит осаждение белков органическими растворителями?

5 Оформление результатов работы

Результаты лабораторных работ 11-16 заносят в таблицу 4.

.

Таблица 4 – Реакции осаждения белков

Название групп осадителей	Употребляемые реактивы	Результат реакции	Чем обусловлена реакция
Соли щелочных и щелочноземельных металлов
Органические растворители
Соли тяжелых металлов
Концентрированные минеральные кислоты
Органические кислоты

2.6 Лабораторная работа 17. Осаждение белков при нагревании

Почти все белки денатурируют при нагревании (50 - 55 °С и выше), при этом белок теряет свои нативные свой­ства, уменьшается его растворимость (уменьшение гидро­фильных свойств ведет к нарушению гидратной оболочки). Важную роль в выпадении в осадок денатурированного при нагревании белка играет концентрация водородных ионов и присутствие солей. Наиболее полное и быстрое осаждение происходит в изоэлектрической точке белка. В сильнокислых и щелочных растворах белок не выпадает в осадок при ки­пячении; так как он приобретает соответственно сильно по­ложительный или отрицательный заряд:

NH₃⁺ NH₃⁺

R + H⁺Cl^- R Cl^-

COO^- COOH

амфион катион

NH₃⁺ NH₂

R + Na⁺OH^- R Na⁺

COO^- COO^-

амфион анион

1 Цель работы – провести тепловое осаждение белка

2 Приборы и материалы

Водяная баня

Электроплитка

Белок 1 %

3 Описание работы

В пробирку наливают пять капель 1 % раствора белка. Пробирку с раствором белка нагревают до кипения. Жидкость мутнеет (наблюдается опалесценция).

4 Оформление результатов работы

Используя ответы на контрольные вопросы, сформулируйте выводы по проделанной работе.

5 Контрольные вопросы

1. Сопровождается ли осаждение белков при нагревании денатурацией?

2. Что такое денатурация белка?