Изучение осмотической резистентности эритроцитов

Под осмотической резистентностъю подразумевают способность эритроцита противостоять понижающемуся осмотическому давлению. При различных заболеваниях крови резис-тентность эритроцитов может меняться, поэтому определение ее границ имеет диагностическое значение в клинике.

Для работы необходимы: штатив с 18 пробирками, растворы NaCl убывающей концентрации (0,9%, 0,85, 0,8 и т. д. до 0,1%), пробирка с цитратной кровью любого животного, взятой не более чем за 3 ч до опыта, две пипетки.

Проведение работы. Пробирки последовательно нумеруют и ставят в штатив. Пипеткой наливают в каждую пробирку по 3 мл раствора NaCl в таком порядке: в первую пробирку – 0,9% раствор, во вторую – 0,85% и т. д. до 0,1% раствора. Затем пипеткой в каждую из пробирок добавляют по две капли цитратной крови. Через 5 мин смотрят результаты – наличие или отсутствие гемолиза.

Результаты работы и их оформление. Запишите, в какой из пробирок и при какой концентрации раствора NaCl отмечаются первые признаки гемолиза. Отметьте, при какой концентрации NaCl кровь полностью гемолизирована (стала «лаковой»). Определите верхнюю и нижнюю границы резистентности эритроцитов и сравните данные с нормой.

Р а б о т а 9

Определение скорости оседания эритроцитов (соэ)

Оседание эритроцитов – свойство стабилизированной цитратом натрия крови при отстаивании разделяться на верхний светлый слой плазмы и нижний красный слой форменных элементов, среди которых преобладают эритроциты. Скорость оседания прямо зависит от массы оседающих частиц, т. е. от размеров образующихся монетных столбиков и агглютинированных эритроцитов. Основным фактором, влияющим на образование монетных столбиков из эритроцитов, является белковый состав плазмы крови. Белковые молекулы снижают отрицательный заряд мембраны эритроцитов, который способствует их отталкиванию. На отрицательный потенциал влияют и другие факторы: рН плазмы (ацидоз снижает, алкалоз повышает СОЭ), содержание желчных кислот и пигментов (увеличение их количества ведет к уменьшению СОЭ), липиды крови (при увеличении содержания холестерина СОЭ увеличивается), увеличение вязкости крови замедляет СОЭ, наличие антиэритроцитарных антител ускоряет оседание. СОЭ также зависит от числа, формы и размеров эритроцитов.

С

Рис. 21. Прибор Панченкова

Для определения соэ:

А – общий вид; Б – капилляр; В – часовое стекло (остальные пояснения см. в тексте)

ОЭ в норме меняется в зависимости от пола и возраста: у мужчин составляет 6–12 мм/ч, у женщин – 8–15 мм/ч, у новорожденных – 1–2 мм/ч, у пожилых людей обоего пола – 15–20 мм/ч.

Для работы необходимы: прибор Панченкова, стерильный скарификатор, часовое стекло, 5%-ный раствор цитрата Na, вата, спирт, йод.

Объект исследования – человек.

Проведение работы. Капилляром из прибора Панченкова (рис. 21) набирают раствор цитрата Na до метки 50 (Р) и выпускают раствор на часовое стекло. Прокалывают палец (прокол должен быть достаточно глубоким). Погружают в каплю крови кончик капилляра и, наклоняя капилляр, набирают в него (без пузырьков) кровь до метки О (К). Затем содержимое также выпускают в раствор цитрата Na на часовое стекло. Тотчас второй раз набирают из пальца кровь до метки О (К) и эту порцию тоже выпускают на часовое стекло. Быстро перемешивают кровь с цитратом натрия на часовом стекле. Наклоняя капилляр, набирают в него смесь до метки О (К) и закрывают пальцем верхний конец капилляра, чтобы раствор крови не вытек.

Упирают нижний конец капилляра в нижнее резиновое кольцо прибора Панченкова, затем вставляют верхний конец в резиновое кольцо сверху. Записывают время и ровно через 1 ч смотрят, какова высота столбика прозрачной плазмы, т. е. на сколько миллиметров за 1 ч осели эритроциты.

Результаты работы и их оформление. Напишите, чему равна СОЭ за 1 ч. Сравните полученные результаты с нормой.

Р а б о т а 10