- •2. Работа с едкими веществами
- •3. Работа со спиртовкой
- •4. Первая медицинская помощь пострадавшим
- •4.1.При термических ожогах:
- •4.2. При химических ожогах:
- •4.3. При поражениях электрическим током:
- •Биуретовая реакция.
- •Ксантопротеиновая реакция.
- •Реакция миллона.
- •Реакц ия адамкевича.
- •Реакция фоля.
- •Отчет по лабораторной работе «Цветные реакции на белки и аминокислоты»
- •Субстратная специфичность ферментов
- •Количественное определение активности амилазы мочи
- •Кредит 2
- •Качественные реакции на лактат
- •Cхема протоколирования полученных результатов по определению пвк в моче
- •Глюкозотолерантный тест
- •Определение глюкозы в крови
- •Определение содержания - и пре- липопротеинов сыворотки крови ту рбидиметрическим методом.
- •Xод работы.
- •Обнаружение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива и диагностической полоски кетофан
- •Обнаружение кетоновых тел в моче с помощью сухого реактива
- •Обнаружение кетоновых тел с помощью диагностической полоски кетоФан
- •Клинико-диагностическое значение.
- •Качественные реакции на нормальные и патологические составные части желудочного сока.
- •Количественное определение кислотности желудочного сока
- •Клинико-диагностическое значение
- •Мочевая кислота набор реагентов для определения концентраций мочевой кислоты в биологических жидкостях знзиматическим колориметрическим методом без депротеинизаций
- •1.Физическое исследование мочи.
- •Количественное определение креатинина в моче
- •Протоколирования полученных результатов по определению креатинина в моче
- •Клинико-диагностическое значение
- •Протоколирования полученных результатов по определению гемоглобина в крови
- •Определенние активности аланинаминотрансферазы в сыворотке крови
- •Количественное определение общего билирубина в сыворотке крови
- •Клинико-диагностическое значение
- •Протоколирования полученных результатов по определению общего билирубина в сыворотке крови
1.Физическое исследование мочи.
Реактивы. Универсальная индикаторная бумага.
1.1.Количество. Количество выделяемой за сутки мочи (диурез) в норме у взрослых колеблется от 800 до 1500 мл. Дети, в зависимости от возраста, выделяют меньшее количество мочи.
Диурез увеличивается при приеме большого количества жидкости. В патологии полиурия (свыше 2000 мл) наблюдается при заболеваниях почек (пиелонефриты, в период уменьшения отеков у почечных больных), при сахарном диабете, алиментарной дистрофии. Ограничение приема жидкости, усиленное потоотделение, понос, рвота ведут к уменьшению диуреза. Олигоурия (ниже 800 мл) наблюдается при заболеваниях почек (острые диффузные нефриты), недостаточности кровообращения, задержке натрия в тканях. Анурия (полное прекращение выделения мочи) может быть следствием тяжелого поражения почечной паренхимы. В результате болевых раздражений может возникнуть рефлекторная анурия.
1.2. Цвет. Цвет мочи колеблется от светло-желтого до насыщенного желтого. Присутствие желчных пигментов приводит к изменению цвета мочи от зеленовато-желтого до коричневого. Примесь крови (гемоглобина) окрашивает мочу в красный цвет, бурый, красновато-желтый. При алкаптонурии моча окрашена в темно-бурый и черный цвет.Цвет мочи может меняться после приема медикаментов: красный или розовый обуславливает амидопирин, синеватый - метиловый синий.
1.3. Прозрачность.
Нормальная свежевышедшая моча прозрачна. Мутность может быть вызвана солями, клеточными элементами, бактериями, жиром (липурия).
1.4. Относительная плотность.
Относительная плотность нормальной мочи колеблется в пределах 1,012-1,020. Относительная плотность дает представление о концентрации растворенных в моче веществ.
Постоянно низкие цифры относительной плотности (1,005-1,012) - гипоизостенурия - указывает на нарушение концентрационной функции почек (хронический нефрит, сморщенная почка). Низкая относительная плотность как временное явление наблюдается при алиментарной дистрофии, после обильного питья, при уменьшении отеков и др. Высокая относительная масса, как правило, имеет место при олигурии (острый нефрит, образование в полости экссудата и др.). Высокая относительная плотность при полиурии характерна для сахарного диабета.
Ход работы. Мочу наливают в цилиндр, избегая образования пены, затем в нее осторожно погружают урометр. После прекращения его колебания отмечают относительную плотность по положению нижнего мениска на шкале урометра. Урометр не должен касаться стенок цилиндра. 1.5. рН-мочи. рН мочи в норме при смешанной пище составляет 5,3-6,5 (кислая или слабо кислая среда).
рН (реакция мочи) может меняться в зависимости от пищевого режима. Преобладание в пище животных белков дает сдвиг в сторону кислой, а преобладание растительной пищи - в сторону щелочной реакции.
При патологии резко кислая реакция наблюдается при лихорадочных состояниях, диабете (особенно при наличии кетоновых тел), голодании, недостаточности почек.
Щелочная реакция мочи отмечается при циститах, пиелитах, гематурии, после рвоты и поносов, при рассасывании экссудатов и транссудатов, приеме некоторых медикаментов (например, соды), при употреблении мин. вод.
Xод работы. В испытуемую мочу погружают универсальную индикаторную бумагу, затем цвет ее сравнивают со шкалой рН (значения даны в диапазоне от 1,0 до 10,0).
2. Химические исследования мочи.
2.1. Качественные реакции на нормальные составные части мочи.
Реактивы. 10% раствор едкого натрия; красная индикаторная полоска; насыщенный раствор пикриновой кислоты; реактив Эрлиха. 2.1.1. Мочевина - конечный продукт азотистого обмена.
Xод работы. В пробирку наливают около 2 мл мочи, прибавляют 5 капель 10% раствора едкого натрия и осторожно нагревают. У края пробирки укрепляют смоченную водой полоску красной лакмусовой бумаги. По прошествию некоторому времени бумага синеет.
2.1.2. Креатинин – один из конечных продуктов азотистого обмена в живом организме.
Ход работы. В пробирку наливают около 2 мл мочи, прибавляют 5 капель 10% раствора едкого натрия и 3-4 капли насыщенного раствора пикриновой кислоты. Появляется стойкая ярко-оранжевая окраска.
2.1.3. Уробилиноген - продукт распада гемоглобина. В моче здорового человека обнаруживается в незначительных количествах. Увеличение его содержания отмечается при понижении функции печени (циррозе, отравлении алкоголем, хлороформом, при индукционных заболеваниях).
Ход работы. К нескольким мл свежей мочи прибавляют 1-2 капли реактива Эрлиха. При окрашивании жидкости в розово-красный цвет в первые З0 сек. проба положительная и означает увеличение количества уробилино- гена; окрашивание спустя 30 секунд свидетельствует о нормальном количестве уробилиногена.
2.2. Качественные реакции на патологические составные части мочи.
Реактивы. 20% раствор сульфосалициловой кислоты; реактив Гайнеса; ацетоновый порошок; 1% спиртовой раствор йода; 50% раствор уксусной кислоты; перед употреблением немного бензидина (на кончике ножа) растворяют в 5 мл уксусной кислоты; 3% раствор перекиси водорода.
2.2.1. Белок.
В нормальной моче содержится незначительное количество белка, которое не обнаруживается качественными пробами, поэтому принято считать, что нормальная моча белка не содержит. Появление белка в моче (протеинурия) может быть следствием усиленного распада белка тканей, выраженного гемолиза, патологий почек, патологий мочевыводящих путей.
Принцип. Метод основан на том, что белок при взаимодействии с сульфосалициловой кислотой дает помутнение.
Ход работы. К 1 -2 мл мочи прибавляют 3-4 капли 20% раствора сульфосалициловой кислоты. При положительной пробе появляется помутнение. Проба с сульфосалициловой кислотой считается одной из самых чувствительных.
2.2.2. Глюкоза. Нормальная моча содержит глюкозу в виде следов, что обычными качественными пробами не выявляется. Появление глюкозы в моче (глюкозурия) может быть физиологическим и патологическим. Как в том, так и в другом случае глюкозурия сопровождает гипергликемию. Физиологическая глюкозурия наблюдается при поступлении с пищей большого количества углеводов (алиментарная глюкозурия), после эмоционального напряжения (эмоциональная глюкозурия), после приема некоторых лекарств (кофеин, адреналин, кортикостероиды). Патологическая глюкозурия может быть обусловлена нарушением реабсорбции глюкозы в канальцах с появлением ее в моче при нормальном уровне глюкозы в крови (почечная, или ренальная глюкозурия). Чаще патологическая глюкозурия является следствием гипергликемии (повышенного содержания глюкозы в крови) при сахарном диабете, гиперкортицизме (синдром Ищенко-Кушинга).
Принцип. Реакция основана на восстановлении в присутствии глюкозы (при нагревании металлов меди) из окисной формы (синий цвет) в закисную (желтый, красный цвет).
Ход определения. К 1-2 мл реактива Гайнеса прибавляют 4-6 капель мочи, кипятят или ставят в кипящую водяную баню. В присутствии глюкозы появляются желтая или красная окраска жидкости и осадок.
2.2.3. Кетоновые (ацетоновые тела). В нормальной моче содержится минимальное количество кетоновых тел, которое не обнаруживается обычными качественными пробами. Появление кетоновых тел является следствием повышенного их уровня в крови. Положительные реакции на кетоновые тела появляются чаще всего при тяжелом сахарном диабете, алкоголизме. Присутствие их наблюдается при голодании, безуглеводной диете, лихорадке, у детей при рвоте и поносе.
Принцип. Качественные реакции на кетоновые тела основаны на их взаимодействии с нитропруссидом натрия в щелочной среде и появлении цветной реакции.
Ход работы. На предметное стекло наносят немного ацетонового порошка. На порошок нанести несколько капель испытуемой мочи. При наличии кетоновых тел получается окрашивание от розового до темно-фиолетового (появление окраски может наступить в течение 2-3 минут).
2.2.4. Желчные пигменты. В нормальной моче содержится минимальное количество желчных пигментов. При механической желтухе оно постоянно повышено, часто отмечается увеличение их и при паренхиматозной желтухе. При гемолитической желтухе количество желчных пигментов не увеличено.
Принцип. Метод основан на окислении билирубина мочи в биливердин под действием йода.
Ход работы. На 4-5 мл мочи наслаивают 1 % спиртовой раствор йода. В положительном случае на границе между жидкостями появляется зеленое кольцо.
2.2.5. Кровь. При нарушении целостности кровеносных сосудов мочевых путей кровь появляется в моче (гематурия). При тяжелых инфекционных заболеваниях, отравлениях и ожогах происходит разрушение эритроцитов, переход гемоглобина в плазму, а затем появление его в моче (гемоглобинурия).
Принцип. Бензидиновая проба основана на окислении бензидина атомарным кислородом, который образуется при разложении перекиси водорода кровяным пигментом - гемоглобином, оказывающим пероксидное действие.
Ход работы. К 1 мл мочи прибавляют по 2-3 капли бензидина и перекиси водорода и перемешивают. Положительная реакция на кровь дает зеленое и сине-зеленое окрашивание.
Бензидиновая проба считается наиболее чувствительной.
