- •Занятие № 1 тема: Микробиологическая диагностика чумы
- •1. Вопросы для самоподготовки:
- •2. Контрольные вопросы:
- •I. План лабораторной работы:
- •Разобрать схему бактериологического метода при микробиологической диагностике инфекционных заболеваний:
- •I этап.
- •II этап. Цель: накопление чистой культуры
- •I II этап. Цель: идентификация исследуемой культуры
- •IV этап.
- •Методы диагностики йерсиний чумы:
- •Бактериологический метод диагностики чумы:
- •1. Ориентировочная бактериоскопия
- •I I этап
- •III этап
- •Б иохимический ряд Гисса для y. Pestis
- •Определение чувствительности к бактериофагу
- •IV этап Учет результатов. Выдача ответ
1. Ориентировочная бактериоскопия
Приготовить мазок из исследуемого материала при подозрении на чуму, окрасить по Граму, микроскопировать
Морфологические свойства: ______________________________
______________________________ расположение ______________________________ Тинкториальные свойства: ________________________________
________________________________
2. Посев на элективные среды с целью получения изолированных колоний с последующей инкубацией при t= 28° C в течение 8-20 ч.
Произвести посев испражнений на МПА/ Бульон Хоттингера с добавками (гемолизированная кровь, сульфат натрия) с целью выделения чистой культуры йерсиний чумы.
Метод посева: ___________________________________
Цвет колоний йерсиний
на средах: МПА 8-12 ч.:
____________________________________ ________________________________________________ МПА 18-20ч.:
___________________________________ ________________________________________________ Бульон Хоттингера:
_____________________________ ________________________________________________ ________________________________________________
I I этап
1. Изучение культуральных свойств колоний йерсиний, выросших на МПА
Признаки |
Характеристика колоний |
1. Размер |
|
2. Цвет |
|
3. Форма |
|
4. Характер края |
|
5. Характер поверхности |
|
6. Консистенция |
|
7. Внутренняя структура |
|
8. Генетическая форма |
|
2. Приготовление мазка, окраска по Грамму, изучение морфологических и тинкториальных свойств: ______________________________________________________________________
__________________________________________________________________________________
3. Пересев на скошенный агар с целью накопления чистой культуры
Отсеять изолированную колонию, выросшую на простой питательной среде (МПА/МПБ) на среду накопления (среда Ресселя/Клиглера/МПА) с целью накопления чистой культуры и/или изучения кратких биохимических свойств (расщепления глюкозы/лактозы).
III этап
Идентификация выделенной чистой культуры по
морфологическим и тинкториальным свойствам: _________________________________
__________________________________________________________________________________
культуральным свойствам: на скошенной части среды Ресселя вырастает биомасса, цвет среды изменяется в зависимости от возбудителя.
биохимическим свойствам. Посев изолированных колоний на пестрый ряд Гисса (см.табл.)
Постановка: пересев биомассы со скошенной среды Ресселя на среду Гисса методом укола до дна и в МПБ путем растирания материала петлей о стенку пробирки. Инкубация и t= 28° C в течение 8-20 ч. в аэробных условиях
Б иохимический ряд Гисса для y. Pestis
глюкоза лактоза мальтоза маннит сахароза
Ресселя "____" "____" "____" "____" "____" МПБ
Учет реакции: расщепленияе углеводов (см. таблицу)
Серологическую идентификацию проводят с помощью реакции агглютинации на стекле с поливалентной/моновалентной О-сывороткой
РНГА _______________________________________________________________________
РНАт _______________________________________________________________________
РИФ ________________________________________________________________________
ИФА _______________________________________________________________________
РИА ________________________________________________________________________
