Занятие № 10. «Обмен углеводов (часть 1)»

Цель занятия: рассмотреть факторы, влияющие на переваривание углеводов; освоить метод количественного определения глюкозы в крови.

ВОПРОСЫ К КОНТРОЛЬНОЙ РАБОТЕ:

1. Углеводы: строение и классификация.

2. Углеводы: биологическая роль и функции углеводов в организме.

3. Переваривание угле­водов в желудочно-кишечном тракте у моногастричных животных. Ферменты, участвующие в переваривании углеводов. Нарушения переваривания углеводов.

4. Особенности переваривания углеводов у жвачных животных. Пути включения летучих жирных кислот (ЛЖК) в метаболизм.

5. Метаболизм глюкозо-6-фосфата. Регуляция содержания глюкозы в крови. Биологическая значимость данного явления.

6. Синтез гликогена: последовательность стадий и биологическое значение процесса.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________

Экспериментальная работа.

Опыт 1. Воздействие формальдегида на активность амилазы.

1. Возьмите две пробирки.

2. В опытную пробирку налейте по 1 мл растворов крахмала, амилазы и 5%-ного формальдегида.

3. В контрольную пробирку налейте по 1 мл раствора крахмала, амилазы и воды.

4. Поместите пробирки на 20 минут в водяную баню при 30°С.

5. В обе пробирки добавьте по 1 капле 1%-ного раствора йода.

Объясните полученные результаты. Где на практике животные могут столкнуться с формальдегидом?

Опыт 2. Определение концентрации глюкозы в биологических жидкостях ортотолуидиновым методом.

Для определения глюкозы в биологических жидкостях по данному методу в настоящее время различными фирмами выпускаются наборы реактивов. Поэтому суть работы сводится только к правильному использованию набора реактивов согласно инструкции по применению.

Определение без депротеинирования.

Без осаждения белков анализируют сыворотку и плазму крови, мочу. Мочу перед анализом разбавляют дистиллированной водой в соотношении от 1:10 до 1:500 и в после­дующем результат умножают на степень разведения.

1. Приготовьте опытную, калибровочную и контрольную пробы по схеме:

	Объем компонента (мл)
	опытная проба	калибровочная проба	контрольная проба
Рабочий раствор реактивов (ортотолуидиновый реактив)	2,7	2,7	2,7
Исследуемый образец	0,3		
Калибровочный раствор глюкозы		0,3	
Дистиллированная вода			0,3

2. Перемешайте. Закройте пробирки фольгой или крышкой.

3. Поместите пробирки в кипящую водяную баню точно на 8 минут.

4. Охладите пробирку под струей холодной воды.

5. Измерьте оптическую плотность опытной (D₁) и калибровочной (D₂) проб против холостой пробы при длине волны 620 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 5 мм.

6. Рассчитайте концентрацию глюкозы по формуле:

где Х  концентрация глюкозы в калибровочном растворе.

Сравните полученные величины с нормальными значениями. Сделайте вывод о состоянии животного. В случае отклонения полученных значений от нормальных величин, предложите возможные причины, объясняющие данный результат.

Назовите факторы, вызывающие гипогликемию и гипергликемию в крови животных.

Опыт 3. Полуколичественное определение глюкозы в моче.

1. В ступке разотрите в тонкий порошок 1 г сульфата меди и 10 г карбоната натрия.

2. На предметное стекло насыпьте немного порошка и нанесите несколько капель мочи.

3. Подогрейте до кипения. Синий цвет означает, что глюкозы нет, желтовато-зеленый означает, что глюкозы не более 0,5 %, зеленый – не более 1%, коричнево-красный – до 2%, интенсивно красный – свыше 2%.

Запишите Ваши результаты.

Дата выполнения ________ Балл ____ Подпись преподавателя ____________