Подсчет количества эритроцитов

Подсчет форменных элементов крови (эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов) производят в определенном объеме крови (1 мм³) с пересчетом их содержания в 1 л при помощи специальных счетных камер или с помощью фотометрических и электронных приборов.

В практической работе для подсчета форменных элементов чаще всего используют камеру Горяева, представляющую собой толстое предметное стекло, в средней части которого находится четыре желоба. Между этими желобами имеется три узкие площадки, средняя из которых ниже боковых на 0,1 мм и разделена пополам поперечным желобком. По обе стороны от этого желобка расположены сетки, нанесенные на стекло. Сетка Горяева состоит из 225 больших квадратов. В их число входят 25 квадратов, разделенных дополнительно на 16 маленьких квадратиков. Единицей отсчета является маленький квадрат. Его сторона равна 1/20 мм, площадь 1/20×1/20=1/400 мм². Объем крови, помещающейся над маленьким квадратом, равен 1/400 мм²×1/10 мм=1/4000 мм³ (1/10 мм – высота слоя крови).

ДЛЯ РАБОТЫ НЕОБХОДИМО: кролик, 0,9% NaCl, микроскопы, счетные камеры Горяева, покровные стекла, игла, спирт, вата, 5 мл пипетки, центрифужные пробирки с резиновыми пробками.

Камера Горяева представляет собой толстое стекло, разделенное 4 желобками на 3 опорные пластинки. Средняя пластинка ниже боковых на 0,1 мм. Поперечной канавкой она разделена на 2 половины, на каждой нанесены сетки для подсчета кровяных телец.

В сетке камеры Горяева имеется 25 больших квадратов, каждый из которых состоит из 16 маленьких. Сторона одного малого квадрата равна 1/20 мм, площадь равна 1/400 мм² , объем равен 1/4000 мм³ .

ХОД РАБОТЫ И ТЕХНИКА ПОДСЧЕТА.

Диаметр эритроцитов – 5-7 мкм. В норме у разных видов животных в 1 мм³ количество эритроцитов постоянно.

К камере Горяева притирают покровное стекло до появления радужных колец и под микроскопом знакомятся с сеткой. Пипеткой отмеряют в пробирку 4,0 мл 0,9% NaCl. В капилляр от гемометра Сали набирают кровь до отметки 0,02 мл, обтерев кончик капилляра ваткой от приставшей к нему крови, и пропустив его в 0,9% NaCl, медленно выдувают кровь. Капилляр дважды промывают этим же раствором. Пробирку закрывают резиновой пробкой и содержимое тщательно перемешивают. В капилляр набирают содержимое пробирки и заряжают камеру. Для чего каплю содержимого выпускают на среднюю пластинку под притертое к камере покровное стекло, не допуская попадания пузырьков воздуха. Подсчет эритроцитов производится при увеличении в 280 раз (7×40) в 5 больших квадратах. Принято подсчитывать эритроциты, расположенные внутри каждого маленького квадрата и на левой и верхней его сторонах. Подсчитав таким образом количество эритроцитов в 5 больших или 80 маленьких квадратах, рассчитываем содержание эритроцитов в 1 мл крови. Для этого используют формулу:

или

где: Х – содержание эритроцитов в 1 мм³ крови.

А – количество эритроцитов, подсчитанных в 5 больших квадратах.

1/4000 мм – объем одного маленького квадрата.

200 или 100 – разбавление крови.

80 – количество маленьких квадратов.

Количество эритроцитов в системе СИ= Х^.10¹²/л