Серологический метод.
Реакция термопреципитации Асколи. В развитии лабораторной диагностики сибирской язвы всемирное признание получила реакция термопреципитации, которая была предложена в 1910 г. Ascoli для исследования органов и кожевенного сырья животных, погибших от сибирской язвы (Ascoli, 1911, 1922). Впоследствии применение реакции Асколи было значительно расширено, и она была использована при исследовании различных объектов внешней среды, а также для дифференциации выделенных культур [ ]
Для проведения реакции преципитации необходимы: преципитирующая сибиреязвенная сыворотка, антиген-экстракт из исследуемого материала и сибиреязвенный бактерийный антиген для контроля. Существует несколько способов получения антиген-экстракта (1-заливают физиологическим раствором;2- холодный способ, который считается более надежным и может быть использован для контроля реакции термопреципитации) [ ]
Реакцию Асколи используют как экспресс-метод для обнаружения специфических сибиреязвенных антигенов у исследуемых культур. Учет результатов реакции проводят в течение 3 мин.
Биологический метод
В день поступления материала одновременно с бактериоскопией и посевами на питательные среды с целью выделения возбудителя сибирской язвы в обязательном порядке проводят биологическую пробу на восприимчивых лабораторных животных.
Гибель зараженных животных наступает через 1 - 3 сут., иногда позже. При вскрытии трупов животных, павших от сибирской язвы, отмечают характерный для сибиреязвенной инфекции студенистый геморрагический отек подкожной клетчатки на месте введения материала, гиперемию внутренних органов, увеличение селезенки и несвернувшуюся кровь. Из тканей и органов павших животных делают мазки-отпечатки, а также посевы на МПА или агар Хоттингера и селективную среду. Идентификацию выросших колоний проводят вышеописанными методами.
Реакция непрямой гемагглютинации
Для постановки серологических реакций РНГА (макро- и микрометоды) и РТНГА используется эритроцитарный иммуноглобулиновый диагностикум для выявления сибиреязвенных спор в объектах внешней среды. Исследование материала проводится согласно инструкции по применению. [ ]
Собственные исследования
При выполнении научно-практической работы были использованы следующие материалы:
данные учебной и научно-исследовательской литературы, статьи научных журналов.
Результаты исследований выполненных в лабораториях ООИ Центров Гигиены и Эпидемиологии в субъектах Российской Федерации
Материалы экспертиз эпидемиологической опасности сибиреязвенных захоронений, проведенных ЦНИИЭ Роспотребнадзора
Информационные материалы о применяемых диагностических методах и средствах в лабораториях ООИ Центров Гигиены и Эпидемиологии в субъектах Российской Федерации
Нормативно-методические документы
Донесения о вспышках сибирской язвы.
Глубина поиска составляет 10 лет.
Методы исследования: описательно-оценочный, ретроспективный эпидемиологический анализ.
Были изучены эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по сибирской язве 8 субъектов Российской Федерации:
Алтайский край
Кировская область
Нижегородская область
Республика Татарстан
Свердловская область
Тверская область
Ульяновская область
Чувашская Республика
Полученные данные отображены в Приложении №1. Эпизоотолого-эпидемиологической ситуации по сибирской язве на изучаемых территориях.
Исследуемые территории с давних времен характеризовались развитым животноводством. Ранее в регионах ежегодно регистрировались эпизоотии сибирской язвы, в результате которых образовались многочисленные почвенные очаги и сибиреязвенные захоронения, часть сведений о которых утеряна. В настоящее время по показателям заболеваемости сельско-хозяйственных животных лидирует Алтайский край.
Исходя из этих данных было проведено эпидемиологическое расследование заболеваемости сибирской язвой в алтайском крае в 2012 г.
Алтайский край относится к территории с выраженным эпизоотолого-эпидемиологическим неблагополучием по сибирской язве, где учтены 18,9% стационарно-неблагополучных по сибирской язве пунктов (1261 СНП) сибирского региона (6688 СНП). При этом плотность СНП составляет 7,46 на 1 тыс. км, что в 7,5 раза больше чем в среднем по Сибири (0,99) и 3,9 раза чем в западносибирском регионе (1,9).
С 1985 г. сибирская язва регистрировалась у СХЖ в течение 18 лет в 29 СНП 19 районов края. Территория края относится к зоне высокого риска заражения возбудителем сибирской язвы в Сибири (индекс зпизоотичности по Таршису 0,0182). В настоящее время Алтайский край лидирует по показателям заболеваемости СХЖ (0,456 на тыс.гол.) среди сибирских регионов, что превышает в 5,2 раза среднесибирский уровень (0,087).
С 1985г. эпидемиологические осложнения по заболеванию сибирской язвы у жителей Алтайского края, с учетом последних событий в крае, возникали семикратно с заболеванием 16 человек. В 68,8% случаев регистрировалась вспышечная заболеваемость, в 93,8% случаев не связанных с профессиональной деятельностью. Болели в основном сельское население, мужского пола (93,8%), в возрасте 30-40 лет (62,5 %), не относящееся к группам профессионального риска, не привитые против сибирской язвы (100%). Заболевания в крае возникали в весенне-осенний период. При кожной форме болезни инкубационный период достигал 1-8 дней. Заболевшие обращались за медицинской помощью на 2-6 сутки. Инфицирование заболевших происходило при вынужденном забое KРC (93,8%), преобладал контактный путь передачи. Последний случай сибирской язвы отмечался в 2006г. в п. Mapaлиxa Краснощековского района, когда заболел мужчина, заразившись при вынужденном забое КРС.
В 2012г. сибирская язва зарегистрирована в двух районах Алтайского края: Целинном (село Дружба, село Марушка) и Быстроистокском (село Быстрый Исток) с количеством заболевших - 6 человек.
Вспышка сибирской язвы в Целинном районе началась со случая падежа 12.08.12г. на пастбище села Дружба частной коровы. Вскрытие павшего животного осуществляла ветврач П., при участии жителей села Г.Н. и О. На основании патологоанатомических данных причиной падежа было названо отравление пестицидами.
13.08.12г., пала корова на подворье Л.А. - жителя села Дружбы. Корова была разделана хозяином, а мясо роздано 3 соседям на корм собакам. Часть мяса падшей коровы, также для собак, вывезено в село Рупосово (в 5 км от села Дружба), где у Л.А. находилась пасека и, предположительно, в село Марушка, владельцу частного фермерского хозяйства Н.В.
18.08.12г. заболел Л.А. (38 лет). 25.08.12г., в связи с резким ухудшением состояния, он был госпитализирован в КГБУЗ «Центральная городская больница, г.Бийск». При поступлении - жалобы на боль в пояснице (в анамнезе – мочекаменная болезнь), лихорадку, слабость, головную боль. Объективно состояние пациента расценено как тяжелое: кожные покровы бледно-розовые с цианотическим оттенком, холодные на ощупь; на правой кисти вскрывшаяся язва с геморрагическим отделяемым и струпом черного цвета, увеличенный до 5 см. подмышечный лимфоузел справа, плотный на ощупь; на внутренней поверхности бедер кольцевидная сливная эритема; гепатомегалия. В экстренном порядке пациент из приемного покоя был доставлен в реанимационное отделение, где проводилась комплексная терапия. Не смотря на проводимые реанимационные мероприятия пациент скончался. Клинический диагноз: Сибирская язва, септическая форма, острое течение. Инфекционно-токсический шок, ДВС-синдром.
21.08.12г. заболел Г.Н. (48 лет), когда у него на среднем и безымянном пальцах правой руки и у основания большого пальца левой кисти образовались язвочки, сопровождающиеся отеком и лихорадкой. 24.08.12г. Г.Н. был госпитализирован в КГБУЗ «Центральная городская больница, г.Бийск» с диагнозом «Сибирская язва, кожная форма?».
27.08.12г. к участковому врачу в селе Марушка, с жалобами на язву на правой руке и лихорадку обратился житель этого села В.С. (32 года) - скотник фермерского хозяйства ИП М.В. С диагнозом «Сибирская язва, кожная форма?» В.С. в этот же день был госпитализирован в КГБУЗ «Центральная городская больница, г.Бийск».
При проведении эпидрасследования в указанном фермерском хозяйстве выявлено еще 2 больных. Один из них - сам владелец фермерского хозяйства - Н.В. (32 года), второй – рабочий В.М. (33 года).
Было установлено, что В.М. (33 года) заболел еще 13.08.12г., когда на 4-й день после разделывания туши свиньи, на указательном пальце правой кисти появилась язва, на следующий день повысилась температуры тела до 400С, 15.08.12г. появилась язва на лице в области глаза с выраженным отеком. И 16.08.12г. пациент В.М. с диагнозом «Рожистое воспаление лица» был госпитализирован в гнойное хирургическое отделение КГБУЗ «Центральная городская больница, г. Бийск», где в тот же день у него появились язвы на щеке и в подбородочной области (27.08.12.г.-переведен в инфекционное отделение). Контакт с зараженным мясом и/или участие в вынужденном забое с/х животных – В.М. отрицал.
Пациент Н.В. (32 года), владелец фермерского хозяйства, заболел 23.08.12г. когда появилась язва на правом предплечье, повышение температуры тела. Выявлен активно, при опросе эпидемиологом, сам за медицинской помощью не обращался. 27.08.12г. направлен в инфекционное отделение. При, проводимом эпидемиологами, опросе пациент категорически отрицал факт падежа или заболевания животных в своем хозяйстве, а также возможный контакт с зараженным сибирской язвой мясом других с/х животных.
С целью лабораторного подтверждения клинико-эпидемиологического диагноза у указанных пациентов нами использовались следующие методы: бактериоскопический, бактериологический, РНГА, реакция преципитации, ПЦР, биологический. Материалом для лабораторного исследования от больных были - содержимое везикул, отделяемое карбункула или язвы, струпья, мокрота, кровь, моча, испражнения.
В результате, диагноз «Сибирская язва» у всех больных был подтвержден методом ПЦР и РНГА с антительным диагностикумом, а у двух пациентов (Г.Н. и С.В.) дополнительно выявлены специфические антитела в парных сыворотках в титре от 1:80 до 1:320 в РНГА. Таким образом, диагноз «Сибирская язва, кожная форма» установлен у четырех пациентов, у одного пациента диагноз «Сибирская язва, септическая форма».
При оценке состояния животных в селе Дружба установлено, что из 8 собак, которых кормили мясом павшей коровы, три заболели, две из них в дальнейшем пали. 24.08.12г. заболела, а 25.08.12г. пала корова ещё у одного жителя села Дружба, В. Из уха павшего животного в краевой ветеринарной лаборатории была изолирована культура сибиреязвенного микроба. Еще через день, 26.08.12г., заболела корова на подворье Д. Результат исследования крови на сибирскую язву дал отрицательный результат. Не смотря на это, ветработниками было проведено комплексное лечение против сибирской язвы, в последующем животное выздоровело.
При опросах жителей села установлено, что в последних числах июля имел место падеж коровы на подворье Б., которая без вскрытия была вывезена на скотомогильник. Весь заболевший и павший скот не был привит против сибирской язвы, выпасался в одном стаде, на одном пастбище.
По данным управления ветеринарии Алтайского края, на территории Целинного района с 1932 по 1986 год было зарегистрировано 79 случаев возникновения заболевания с/х животных сибирской язвой, в том числе 11 регистрировались рядом с возникшим очагом заболевания с 1934 по 1965 годы. Следует отметить, что село Дружба в Кадастре стационарно неблагополучных по сибирской язве пунктов РФ не числится.
Село Марушка является стационарно неблагополучным пунктом. Случаи заболеваний и падежа с/х животных регистрировались в данном населенном пункте в 1934, 1935, 1937, 1938, 1939, 1940, 1963, 1965 гг.
В ходе проведения эпидемиологического расследования выявлено, что в с. Дружба Целинного района 250 дворов, проживает 738 человек, в с. Марушка проживает 1031 человек. При проведении подворных обходов выявлен 41 человек, контактный с больными животными: в селе Дружба – 39, в селе Марушка – 2.
Пастбище села Дружба представляет собой участок степи длинной около 3 км, Начавшись от села Дружба оно оканчивается у полевого пруда. В отдельных местах пастбища имеются многочисленные норы кротов и сусликов с выбросами земли.
При проведении эпидрасследования были определены два участка пастбища возможно являющихся почвенными очагами. Первый, наиболее вероятный, старая свалка, прилегающая к пастбищу, куда длительное время вывозился навоз с ферм, бытовой мусор и, не исключено, трупы павших с/х животных. В 2011 г., с целью освобождения площадей под посевы пшеницы, одним из местных фермеров свалка бульдозерами была перемещена непосредственно на пастбище.
Второй возможный почвенный очаг – полевой пруд. В июне 2012 г. здесь проводились земляные работы, связанные со строительством небольшой дамбы.
С целью поиска источника заражения в лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Алтайском крае» исследовано 46 проб объектов окружающей среды (почва с пастбища и ферм, трава с пастбища, вода из полевого пруда и пруда расположенного в селе, водопроводная вода, корма). Получен 1 положительный результат в РНГА с антительным диагностикумом (производство ФГУ «48 ЦНИИ МО РФ» г. Киров) от образца почвы забранного в окрестностях полевого пруда, в дальнейшем, однако, не подтвержденный методом ПЦР.
Специалистами ФКУЗ «Алтайская противочумная станция» Роспотребнадзора (г.Горно-Алтайск) исследовано 176 проб почвы, в том числе: 126 - с различных участков пастбища, свалки и из окрестностей полевого пруда; 20 - села Рупосово (места содержания 5 собак); 10 –подворье в селе Дружба; 20 – на территории фермерского хозяйства ИП М.В. в селе Марушка. Антиген сибиреязвенного микроба был выявлен в 2 пробах почвы взятых со свалки в РНГА (диагностикум производства Казахского НЦКиЗИ). Однако дальнейшее исследование положительных проб биологическим методом и в ПЦР дало отрицательный результат. Еще 2 положительных результата в РНГА, подтвержденных методом ПЦР, получены из проб почвы забранных с места содержания павшей коровы подворья В. Результат исследования 3 проб воды из сельского пруда и скважины, расположенной на частном подворье В - отрицательный.
Следует признать, что достоверно источник заражения в селе Марушка не установлен. Все трое заболевших работника частного фермерского хозяйства ИП Н.В. указывая на имевшие место укусы слепней, категорически отрицают контакт с мясом, и/или больными животными.
Сухая и жаркая погода июля и августа 2012г. действительно характеризовались обилием кровососущих двукрылых.
«Кровососущие насекомые – очень существенный фактор распространения кожной формы сибирской язвы животных, - указывают Л.В. Громашевский и Г.М. Вайндрах. Они, несомненно, играют аналогичную, но менее массовую роль в распространении той же формы сибирской язвы среди людей. Значение этого фактора в эпидемиологии сибирской язвы людей изучено недостаточно» (1).
Б.Л. Черкасский пишет: «Что же касается возможной эпидемиологической значимости кровососущих членистоногих, то её необходимо иметь в виду лишь в тех случаях, когда в ходе эпидемиологического расследования сибиреязвенного очага не удается установить наличие другого механизма передачи возбудителя инфекции» (2).
Вместе с тем, нельзя исключить вероятность сокрытия факта поступления мяса от павшей коровы с подворья Л.А. из села Дружба, как и возможного случая заболевания и падежа скота непосредственно в частном фермерском хозяйстве ИП Н.В.
В ходе реализации плана противоэпидемических мероприятий в связи с заболеванием людей сибирской на территории сел Дружба и Марушка было выполнено:
- введены карантинные и ограничительные мероприятия с установлением дез. барьеров при въезде и выезде из села Дружба;
- организована работа КГБУЗ «Целинная ЦРБ» по раннему выявлению больных людей;
- за лицами, подвергшимся риску заражения, осуществлялось медицинское наблюдение в течение 8 дней, включающее ежедневный осмотр кожных покровов и ежедневное двукратное измерение температуры тела. Всего осмотрено 738 человек в селе Дружба и 1031 человек в селе Марушка;
- всем лицам, подвергшимся риску заражения, проведена экстренная профилактика (превентивное лечение) антибактериальными препаратами;
- проведены дезинфекционные и дератизационные мероприятия в очагах;
- проведены подворные обходы животных. Организована вакцинация скота частного сектора и животноводческих хозяйств;
- проведена вакцинация людей из группы угрожаемого контингента вакциной из моб.резерва РФ (вакцинировано 309 человек).
Еще один случай заболевания сибирской язвой зарегистрирован в селе Быстрый Исток Быстроистокского района Алтайского края.
В ходе эпидемиологического расследования установлено, что 16.10.12г. житель села Быстрый Исток И.М. (55 лет) произвел забой теленка на собственном подворье в связи с травмой позвоночника у теленка. 17.10.2012г. утром, до обеда, И.М. разделал тушу теленка. Часть мяса была отправлена в г. Бийск дочери, а также продана одному из соседей. При разделке туши теленка (разрубание бедренной кости) произошло ранение острым отломком кости указательного пальца правой кисти с образованием раны размером до 8 мм.
25.10.12г. пациент отметил покраснение и отека правой кисти и предплечья, а 26.10.12г. на правой кисти и предплечье появились багрово синюшные пятна, усилился отек с последующим образованием пузырей с кровянистым содержимым, появились недомогание, озноб и лихорадка. 29.10.12г. И.М. обратился за медицинской помощью в поликлинику КГБУЗ «Быстороистокская ЦРБ», где был осмотрен хирургом поликлиники и в последующем госпитализирован в хирургическое отделение с диагнозом «Рожистое воспаление правой кисти и предплечья». 30.10.12.г И.М. переведен в инфекционное отделение КГБУЗ «Центральная городская больница, г.Бийск» с диагнозом «Сибирская язва, кожная форма?», подтвержденный в дальнейшем методами ПЦР и МФА (кровь, мокрота и мазок из раны).
Из пробы мяса забитого теленка в лаборатории ФКУЗ «Алтайская противочумная станция» Роспотребнадзора (г.Горно-Алтайск) выделена культура В. anthracis, типичная по основным идентификационным тестам (бактериоскопическим методом в мазках окрашенных по Граму выделены Г+ палочки с типичной морфологией для возбудителя сибирской язвы; в мазках окрашенных на капсулу, обнаружены капсулы; результат исследования данного образца методом ПЦР - выделена ДНК B. аnthracis рХО4; положительная биологическая проба – на 3-4 сутки пали белые мыши, зараженные суспензией мяса образца, патологоанатомическая картина у мышей соответствует сибиреязвенному сепсису; выделенная культура вирулентная - ЛД50 B. аnthracis составила 100 спор).
Несколько проб грунта с подворья И.М. исследовались в лаборатории ФБУЗ «Центр гигиены и эпидемиологии в Алтайском крае». Из пробы грунта, забранной с места прирезки теленка изолирована культура возбудителя сибирской язвы.
Как вероятный вариант заражения животного, рассматривается следующий - теленок выпасался на привязи на участке, рядом с которым, перед этим, с противопожарной целью, было проведено опахивание. Возможно, что при опахивании, было вскрыто залегающее не глубоко, старое сибиреязвенное захоронение. Известно, что село Быстрый Исток является стационарно-неблагополучным по сибирской язве пунктом. Случаи заболеваний и падежа с/х животных здесь регистрировались в 1933 и 1943 гг.
При проведении профилактических и противоэпидемических мероприятий выявлено 10 человек, подвергшихся риску заражения, в том числе в селе Быстрый Исток – 6, в городе Бийске – 4 человека. Всем указанным лицам, проведена экстренная профилактика (превентивное лечение) антибактериальными препаратами;
Таким образом, эпизоотическая ситуация по сибирской язве в Алтайском крае продолжается оставаться напряженной. В 2012 г. на территории Алтайского края зарегистрировано 2 очага сибирской язвы с количеством заболевших - 6 человек. Среди причин, способствовавших возникновению случаев заболевания среди людей ведущими являются:
- утилизация павших животных с частных подворий в неустановленных местах и в неустановленном порядке;
- отсутствие должного учёта поголовья скота в частных подворьях, в связи с чем, профилактическая иммунизация против сибирской язвы проведена не всему подлежащему поголовью;
- отсутствие иммунизации против сибирской язвы профессионально-угрожаемых контингентов (отсутствие доступной вакцины в РФ).
С целью предупреждения угрозы возникновения и распространения сибирской язвы среди населения и животных в Алтайском крае в 2012 году Администрацией Алтайского края был утвержден «Комплексный план мероприятий по профилактике и предупреждению возникновения случаев сибирской язвы среди людей и животных на 2012-2017 годы» предполагающий: регистрацию и строгий учет СНП по сибирской язве; проведение плановой профилактической иммунизации животных; обеспечение индивидуальными средствами защиты с/х работников; обеспечение проведения дезинфекции, дератизации; обеспечение проведения экстренной профилактики и др.
Дополнительно к этому утверждена ведомственная целевая программа «Организация мероприятий по утилизации и уничтожению биологических отходов животного происхождения на территории Алтайского края на 2013-2015 гг.». В рамках данной программы предполагается реконструировать ряд объектов утилизации и уничтожения биологических отходов, реализовать мероприятия по приведению в соответствие с ветеринарно-санитарными требованиями существующих сибиреязвенных захоронений.
В нынешней экономической ситуации, развития сельского хозяйства, градостроительства и т.д., возникают вопросы о сокращении санитарно-защитные зоны сибиреязвенных скотомогильников. Тем самым инициируя проведение лабораторно-диагностических исследований на наличие возбудителя сибирской язвы в окружающей среде сибиреязвенного захоронения.
На базе ФБУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора, мною был проанализирован и систематизирован архивный материал лабораторных исследований 19 скотомогильников Российской Федерации. Была составлена таблица (Табл.№1), в которой отображается:
Федеральные округа/области, в которых проводились исследования
Лаборатория выполнявшая данные исследования
Периоды отбора проб и выполнения лабораторных исследований
Количество проб окружающей среды
Методы проведения лабораторных исследований
Нормативные документы, которыми руководствовались при проведении лабораторных исследований
Место расположения и характеристика сибиреязвенного скотомогильника (в каком году было сделано захоронение, его содержимое, площадь)
Заказчик лабораторных исследований
Таблица составлена на основе данных официальных запросов, актов отбора проб, протоколов лабораторных исследований, гидрогеологических заключений, эпизоотических журналах, ветеринарно-санитарных карточек скотомогильников
Проанализируемые мероприятия проводились в Центральном, Уральском и Приволжском федеральных округах. Были охвачены Тверская, Свердловская, Нижегородская, кировская области, Чувашская Республика и Республика Татарстан. На данных территориях практически ежегодно регистрируются случаи заболевания СХЖ и людей, несмотря на то, что на протяжении ряда лет в Российской Федерации сибирская язва имеет тенденцию к снижению. На территории России учтено более 35 тыс. стационарно-неблагополучных пунктов, где существуют почвенные очаги, обусловливающие эпидемический потенциал инфекции [Онищенко Г. Г. с соавт., 1999; Черкасский Б. JI., 2002].) Содержимое сибиреязвенного скотомогильника – трупы больных животных и зольный остаток после сжигания животных. Некоторые захоронения не имеют определенной даты или вовсе сведения о захоронении и его содержимом утеряны.
Лабораторные исследования проводились в период с 17 июля 2007 года по 31 октября 2013 года. Диагностика сибирской язвы не стояла на месте, в это время в практику активно внедрялся метод ПЦР-диагностики. Естественно темпы налаживания процесса, оснащения региональных лабораторий и обучение персонала оставляли желать лучшего.
Всего было отобрано 2260 проб окружающей среды ( из них 2185 проб почвы, 19 проб воды, 36 проб ила) в период с 17 июня 2008 года по 17 октября 2013 года.
Были проведены:
1850 исследований ПЦР, руководствуясь МУК 4.2.2413-08, МУ 4.2.2941-11;
2084 бактериологических исследований, руководствуясь МУК 4.2.2413-08;
Ни в одном из проведенных исследованиях возбудитель сибирской язвы не выявлен.
Также были проведены:
100 санитарно-химических исследований, руководствуясь ПДК №2546-82, ГОСТ 26488-85, ПДК №3210-85, РД 52.18.191-89, МУ 31-11/05, ГОСТ 26426-85, ГОСТ 26425-85, ПНДФ 16.1.2.23-2000, ПНДФ 16.1.2.21-98, ПНДФ 16.1.2.3.3.44-05, Руководство по санитарно-химическим исследованиям почвы. -М., ГК СЭН РФ,1993 МВИ "Аквилон" ПНДФ 16.1.2.2.2.3.39-03 ГОСТ 26483-85; 83 санитарно-микробиологических исследований, руководствуясь МР№ФЦ/4022 от 24.12.2004, МУК 4.2.1018-01, МУК 4.2.2413-08;
83 санитарно-микробиологических, руководствуясь МР№ФЦ/4022 от 24.12.2004, МУК 4.2.1018-01, МУК 4.2.2413-08;
95 санитарно-паразитологических исследований, руководствуясь МУК 4.2.796-99, МУК 4.2.2661-10.
С целью оценки лабораторной диагностики сибирской язвы в объектах окружающей среды были разосланы официальные запросы по 9 субъектам Российской Федерации (Алтайский край, Кировская область, Нижегородская область, Республика Татарстан, Свердловская область, Ставропольский край, Тверская область, Ульяновская область, Чувашская Республика). В запросе просили указать:
Информацию по кадровому составу (количество работников, укомплектован или нет штат сотрудников, состав штата, образование и стаж работы сотрудников)
Информацию по используемым тест-системам ПЦР, питательным средам, диагностическим препаратам (производителя, срок годности, и имеются ли в запасе данные тест-системы)
Информацию по техническому оснащению лаборатории (какие аппараты имеются/используются, наличие испытательных и измерительных аппаратов, когда был получен аттестат аккредитации лаборатории)
Были сделаны следующие выводы:
Во многих лабораториях штат сотрудников не укомплектован (Алтайский край, Кировская область, Свердловская область)
Для ПЦР-диагностики используют тест-системы "АмплиСенс Bacillus anthracis-FRT" Набор реагентов для выявления ДНК Bacillus anthracis в биологическом материале и объектах окружающей среды методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени". Производства ФГУН ЦНИИ Эпидемиологии Роспотребнадзора
Используют следующие питательные среды: ГРМ-бульон, ГРМ-агар, Питательная среда для выделения возбудителя сибирской язвы сухая, Питательная среда для выделения возбудителя сибирской язвы сухая с селективной добавкой, Бульон Хоттингера, Агар Хоттингера, МПА, МПБ, Питательные среды для постановки биохимического ряда.
Диагностические препараты: Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие сибиреязвенные споровые адсорбированные сухие,. Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие сибиреязвенные вегетативные адсорбированные сухие, Бактериофаг Fah-ВНИИВВиМ сибиреязвенный диагностический
В лабораториях имеются в запасе тест-системы, наборы реагентов, питательные среды, диагностические препараты с хорошим сроком годности на случай подозрения сибирской язвы.
Лаборатории имеют действующий аттестат аккредитации.
Для ПЦР-диагностики используют: прибор для проведения ПЦР в режиме реального времени Rotor-Gene Q, прибор для проведения ПЦР в режиме реального времени Rotor-Gene 6000
