Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
МБ. Ответы к итогу по практическим навыкам и умениям.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
81.15 Кб
Скачать
  1. Классификация микроорганизмов по отношению к окраске по Граму

Окраска по Граму позволяет дифференцировать микроорганизмы на грамотрицательные (Грам«-») и грамположительные (Грам«+»).

Отношение бактерий к данной окраске определяется способностью удерживать образовавшийся в процессе окраски комплекс генцианового фиолетового с йодом.

Грам«+»:

  • в клеточной стенке муреиновый слой, содержащий гликопептиды и тейхоевую кислоту;

  • на поверхности клетки комплекс протеин – рибонуклеат магния;

  • соотношение в цитоплазме РНК к ДНК 8:1;

  • изоэлектрическая точка цитоплазмы = 2,0-3,0;

  • проницаемость клеточной стенки ниже;

– создание оптимальных условий для прочной фиксации красителя и резистентности к обесцвечиванию спиртом.

Окрашивание в сине-фиолетовый цвет.

Грам«-»:

  • соотношение в цитоплазме РНК к ДНК 1:1;

  • изоэлектрическая точка цитоплазмы = 2,0-3,0;

  • проницаемость клеточной стенки выше;

Окрашивание в красный цвет.

  1. Перечислить виды микроорганизмов, окраску которых необходимо производить по способу Циля-Нильсена и почему?

См. Борисов Л.Б. – Руководство к лабораторным занятиям по МБ (стр. 26)

  1. Характеристика культуральных свойств микроорганизмов, выросших на среде Эндо, указать последовательность дальнейшего исследования

См. Борисов Л.Б. – Руководство к лабораторным занятиям по МБ (стр. 46)

  1. Характеристика культуральных свойств микроорганизмов, выросших на среде Плоскирева, и указать последовательность дальнейшего исследования

См. Борисов Л.Б. – Руководство к лабораторным занятиям по МБ (стр. 46)

  1. Характеристика культуральных свойств микроорганизмов, выросших на среде Левина и указать последовательность дальнейшего исследования

См. Борисов Л.Б. – Руководство к лабораторным занятиям по МБ (стр. 46)

  1. Характеристика культуральных свойств микроорганизмов, выросших на молочно­солевом агаре, принципы элективности среды и указать последовательность дальнейшего ис­следования

Среда используется для определения в молочных продуктах, богатых белком нормируется содержания коагулазоположительного S. aureus – возбудителя пищевой интоксикации. Колонии S. aureus растут в виде непрозрачных круглых колоний, окрашенных от белого до оранжевого цвета, диаметром 2-4 мм, слегка выпуклых.

Приготовление среды:

В 100 мл МПБ растворяют 6,5 г хлорида натрия, 20 г агар-агара. Устанавливают рН 7,4, стерилизуют при 121°С 20 мин. Перед использованием агар расплавляют, охлаждают до 45°С, добавляют 10% стерильного обезжиренного молока и разливают по чашкам Петри.

После посева чашки выдерживают в термостате при температуре 37°С в течение 24-48 ч.

16. Оценить результаты исследования ферментативной активности бактерий на среде Олькеницкого и указать последовательность дальнейшего исследования

Среда Олькеницкого готовится на основе не очень плотного МПА. Содержит лактозу (1%), сахарозу (1%), глюкозу (0,1%), мочевину, соль Мора (сульфат железа), гипосульфит натрия и индикатор.

Среду после стерилизации в расплавленном виде оставляют застывать в таком виде, что бы получился столбик и скошенная часть. Посев производят штрихом по скошенной части и уколом в столбик.

При сбраживании углеводов, которые содержатся в большом количестве (лактозы, сахарозы или обоих сахаров) изменяется цвет всей среды; при сбраживании глюкозы изменяется только цвет столбика, а скошенная часть остается без изменений. Образование газа определяется по наличию пузырьков газа в столбике агара.

Оценка результата:

Расщепление мочевины свойственно протеям и некоторым кишечным палочкам. Патогенные энтеробактерии не разлагают мочевину. Добавление соли Мора и гипосульфита позволяет также изучить способность бактерий расщеплять белки с образованием сероводорода, что определяется по почернению в столбике агара в результате превращения сульфата железа в сульфид чёрного цвета.

Дальнейшие действия:

Если произошло выделение H2S, произошел разрыв в толще агара, произошло почернение, то мы можем судить о наличии сальмонелл, и далее производим реакцию агглютинации.