Часть I. Форменные элементы крови, кроветворные органы, кроветворение.

Объект исследования – мыши беспородные.

• Изучение клеточного состава крови

  • приготовление и окраска мазков крови и костного мозга;

  • идентификация клеток на мазках крови; подсчет форменных элементов крови (формула крови);

  • идентификация клеток крови на мазках костного мозга; выявление эритроидного и гранулоцитарных ростков кроветворения (зарисовка).

• Изучение морфологии кроветворных и лимфоидных органов на готовых препаратах (костный мозг, селезенка, лимфоузлы, тимус):

  • микроскопирование, зарисовка (фотографирование).

• Знакомство с методом селезеночных колоний :

микроскопирование препаратов мышиных селезенок с гемопоэтическими

колониями, идентификация типов колоний, зарисовка (фотографирование).

• Знакомство с методом гемопоэтических колоний в агаровой и метилцеллюлозной культуре (определение числа КОЕк) :

  • выделение клеток красного костного мозга мыши, приготовление питательных сред на основе агара и метилцеллюлозы, получение культур гемопоэтических колоний;

  • микроскопический анализ и подсчет различных типов колоний;

  • микрофотосъемка колоний.

• Метод поточной цитофлуориметрии в гематологии –

  • лекция об основах метода и практикум по применению CD-маркеров гемопоэтических клеток для их идентификации в суспензии.

Часть II. Соединительная ткань, воспаление, гистогенез соединительной

ткани. Объект исследования – мыши беспородные.

• Получение и исследование пленок рыхлой соединительной ткани.

○ фиксация, окраска, микроскопирование, зарисовка.

• Исследование процесса асептического воспаления у мышей - проведение операции по экспериментальному воспалению, забор материала, фиксация, окраска, микроскопирование, зарисовка (фотографирование) полученных препаратов.

• Знакомство с методом получения и анализа стромальных колоний в агаровой и метилцеллюлозной культуре (определение числа КОЕф):

  1. выделение клеток красного костного мозга мыши, приготовление питательных сред, получение культур стромальных клеток;

  2. микроскопический анализ и подсчет колоний;

  3. микрофотосъемка колоний.

-----------------------------------------------------------------------------------------------------------------

3. Промежуточная аттестация.

Регулярные отчеты студентов о результатах, полученных при выполнении задач практикума, доклады с презентациями.

4. Итоговая аттестация.

Зачет по спецкурсу «Биология кроветворной ткани» и экзамен по спецкурсу «Ткани внутренней среды».

Вопросы для самостоятельной подготовки студентов:

1. Общая характеристика тканей внутренней среды. Разновидности (классификация), особенности строения, функции и происхождение.

2. Ткани внутренней среды. Постнатальный онтогистогенез. Структура дифферонов.

3. Ткани внутренней среды как обновляющаяся система – модель для изучения проблем клеточной дифференцировки.

4. Кровь; форменные элементы крови млекопитающих и человека. Строение, функции. Формула крови.

5. Гематологические показатели как тестовая система оценки физиологического состояния организма.

6. Кроветворение. История изучения и современные представления о гемопоэзе.

7. Красный костный мозг. Строение, функции. Происхождение в онтогенезе.

8. Кроветворное микроокружение (ниша). Остеобластическая и васкулярная ниши. Клетки и факторы кроветворных ниш.Роль в поддержании гемопоэза.

9. Эритропоэз. Факторы дифференцировки.

10. Гранулоцитарная дифференцировка. Факторы дифференцировки.

11. Моноцитарно-макрофагальная дифференцировка. Факторы дифференцировки.

12. Система мононуклеарных фагоцитов.

13. Методы клеточной маркировки и клонирование in vivo и in vitro в исследованиях гемопоэза.

14. Метод изучения кроветворения с использованием радиационных костномозговых химерных животных. Понятие о КОЕс.

15. Радиационные костномозговые химеры и их использование в сочетании с методами клеточной маркировки в современной биологии и экспериментальной медицине.

16. Эмбриональное кроветворение млекопитающих. Смена мест локализации гемопоэза. Свойства стволовых кроветворных клеток в эмбриогенезе.

17. Кроветворение в стенке желточного мешка и аорто-гонадо-мезонефральной области (АГМ). Эмбриональные генерации эритроцитов.

18. Лимфоидная ткань. Центральные и периферические лимфоидные органы, особенности строения.

19. Строение и функции центральных лимфоидных органов (красный костный мозг, тимус).

20. Строение и функции периферических лимфоидных органов (неинкапсулированные лимфоидные фолликулы, лимфатические узлы, селезенка).

21. Соединительные ткани. Разновидности. Онтогистогенез.

22. Кроветворная и мезенхимная стволовые клетки.

23. Основные клеточные элементы соединительной ткани (фибробласты, макрофаги, тучные клетки, перициты, адипоциты, адвентициальные). Происхождение, строение, функции.

24. Тучные клетки. Происхождение, функции. Роль в воспалении и гистогенезе соединительной ткани.

25. Происхождение фибробластов, их роль в гистогенезе соединительных тканей. Гистогенетические взаимоотношения: мезенхимная стволовая клетка (МСК) – мультипотентные мезенхимные стромальные клетки (ММСК) – фибробласты.

26. Воспалительный процесс и новообразование соединительной ткани. Хронология клеточных реакций при воспалении.

27. Гистогенез соединительной ткани на примерах экспериментального асептического воспаления и заживления кожной раны.

28. Современные представления о мезенхимной стволовой клетке (МСК) и мультипотентных мезенхимных стромальных клетках (ММСК). Дифферон МСК.

29. Индукция дифференцировок ММСК (адипогенная, остеогенная, хондрогенная). Факторы дифференцировок.

30. Строение хряща и кости. Эмбриональный гистогенез. Физиологическая и репаративная регенерация хрящевой и костной ткани в постнатальном онтогенезе. Возможности получения хрящевой и костной ткани in vitro.