ВОпрос №5. Аутопсия: значение изучения трупного материала
Аутопсия – это забор трупного материала для гистологического исследования. Проводится с целью определения окончательного диагноза, а также аутопсия приводит к взаимному обогащению практического опыта клиницистов и патологоанатомов. Аутопсия помогает понять, насколько глубоко зашел патологический процесс.
Вопрос №6. Значение биопсии в патологической анатомии. Микроскопические методы исследования в патологической анатомии. Обычные и специальные методы окраски. Экспериментальная патоморфология
Биопсия – это прижизненное взятие материала с диагностическо целью. Значение биопсии велико. По некоторым данным, её делают каждому третьему пациенту. Особенно ценна биопсия для ранней диагностики заболеваний.
Вообще к микроскопическим методам относятся гистологический, цитологический, иммуно-гистохимический, метод молекулярной биологии.
Для обычной гистологической диагностики используют окраску гематоксилином и эозином. Также используют окраску по Ван-Гизону пикрофурсином, позволяющую выявить коллагеновые волокна (волокна окрашиваются в красный цвет).
Для цитологической диагностики применяют окраску азур-эозином или окраску по Папаниколау.
При гистологическом методе делают срез ткани, при цитологическим делают мазок, смыв или соскоб. При иммуно-гистохимии происходит связывания конъюгированного (соединенного) с ферментом или флюорохромом антитела с антигенами в ткани. При этом тот, кто делает иммуно-гитохимию уже знает какой антиген хочет обнаружить, поэтому и антитело комплементарно этому антигену. На рисунке можно видеть, как работают ПАП-метод (пероксидазно-антипероксидазный) и АВС –метод (анавидин-биотиновый метод), хромосомный метод, электронная микроскопия.
Смысл молекулярно-биологического метода заключается в (только вдумайтесь!) автоматизированном разделении клеток по массе их нуклеиновых кислот в разные пробирки. И еще он заключается в цитометрии (измерении размеров множества клеток).
Что касается экспериментальной патоморфологии, то это моделирование патологического процесса на лабораторных животных.
Вопрос №7. Патология клеточных мембран и клеточных стыков. Патология ядра
Под патологией клеточных мембран, здесь, по нашему мнению, понимается цитолемма, то есть та биологическая мембрана, которая отграничивает животную клетку от внешней среды. Вопросы, связанные с мембранами органелл будут рассмотрены в другом пункте.
Здесь будут рассмотрены патологии клеточной мембраны связанные с 1) нарушением рецепции 2) нарушением обменных (транспортных) функций.
Что касается нарушения клеточных рецепторов, то:
клетка способна к рецепции (восприятию внешних сигналов) благодаря рецептору. располагающемуся на мембране или рецептору, располагающемуся внутриклеточно. Рецептор, который расположен на мембране, состоит из трех частей: гликокаликса (углеводного комплекса, комплементарного веществу, которое следует «узнать»), липидного слоя (трансдуктора – фосфолипидов) и катализатора на внутренней поверхности (аденилатциклаза).
Соответственно, патологический процесс, связанный с нарушением клеточной рецепции, будет поражать одно из трех звеньев клеточного рецептора
Примеры болезней: отсутствие рецепторов к аполипопротеинам В и Е, как следствие не утилизация липопротеинов, как следствие повышение в крови холестерина, и еще как следствие, атеросклероз.
В основе невосприимчивости рецепторов, в некоторых случаях, лежит их блокирование аутоантителами. Например, СД II типа. В других это идиопатия, то есть, наследственно рецепторов просто нет или они неправильно функционируют
Что касается нарушений проницаемости цитоплазматической мембраны, то характерными признаками нарушения проницаемости мембран служит усиленное везикулообразование, инвагинация и утолщение плазмолеммы, образование микропор, «штопка» локально разрушенной плазмолеммы, образование миелиноподобных структур.
Усиленное везикулообразование. Повышение проницаемости мембраны. Дефицит площади – «минус мембрана»
Увеличение поверхности. Это происходит за счет встраивания пузырьков – «плюс мембрана».
Образование инвагинация. Свидетельствует о воздействии на клетку различных патогенных факторов.
Микроклазмацитоз. Это отрыв части плазмолеммы и её распадение в межклеточном веществе. Свидетельствует о гипоксии или об агрессии антител.
Утолщение мембраны. Свидетельствует об изменении ионного состава или о действии фосфолипаз.
Образование крупных микропор. Ведет к плазмолизу. Признак нарушения транспорта ионов.
Бреши в мембране. Ведут к набуханию и гибели
Образование миелиноподобных структур. Возникает при усиленном перекисном окислении липидов.
Изменение проницаемости лежит в основе механизмов дистрофии. При инфильтрационно клетка накапливает в себе различные вещества, потому что начинает пропускать их вследствие нарушения ионного транспорта. При декомпозиционном наоборот, эти вещества прорываются из клетки через обильные повреждения плазмолеммы. В ряде случаев вещества, проникающие в клетку при повреждении плазмолеммы, вызывают извращенный синтез (гиалиноз)
Что касается патологии клеточных стыков, то нарушение плотности или герметичности клеточных стыков может привести к двум последствиям: нарушению проницаемости естественных барьеров и разобщению межклеточных контактов. Последнее – фактор онкологических заболеваний. Нарушение межклеточных стыков способствует увеличение давления в органе или в сосуде (например при гипертензии, холестазе). А нарушение межклеточных контактов ведет к нарушению обмена информацией между соседними клетками.
Вообще следует подчеркнуть, что межклеточные контакты выполняют три функции: межклеточную адгезию, герметизацию слоя эпителиальных клеток и межклеточные взаимодействия.
Что касается патологии клеточного ядра, то она проявляется изменением формы, размера, количества ядер и ядрышек, в появлении разнообразных включений и с патологией митоза.
Размеры ядра: полиплоидия, анеуплоидия (некратное увеличение числа хромосом). Размер ядра ведь напрямую зависит от количества хромосом! Кроме того размеры ядра могут меняться в зависимости от различных функциональных состояний клетки (например, S – период). Размеры ядра также зависят от соотношения эу- и гетерохроматина. Это важно в плане патологии. Например, гетерохроматизация ядра – предвестник смерти. Ядро также может просто распухнуть под действием патологических факторов.
Форма ядер и их число: Многоядерность – патологический признак. Наличие кариомеров – патология. Безъядерность – признак в некоторых случаях нормальны (эритроциты), а в некоторых нет. Безъядерность может свидетельствовать о гибели клетки и кариорексисе (распадение ядра на глыбки), кариопикнозе (ядро сморщивается, хроматин уплотняется)и кариолизисе (растворение ядра).
Структура и размер ядрышек: чем больше ядрышек, тем больше синтетически активна клетка. Гипергранулированные ядрышки – признак неоднозначный, а светлые – однозначно патологический. Дезорганизация ядрышек означает – энергетический дефицит.
Ядрышковые включения. Появление ядерных цитоплазматических включений (все что есть в цитоплазме) связано с нарушением митоза. Ядерные истинные включения (гликоген липиды, белки) – тоже плохо. Вирусообусловленные включения свидетельствуют о (!) вирусе.
Ядерная мембрана. Выполняет не только отграничивающую функцию, но и поддерживает хромосомы и участвует в митозе.
Нарушения митоза. Многообразны. Классифицированы в три большие группы: 1) нарушение хромосом, 2) нарушения синтетического аппарата и 3) нарушение цитотомии.
Также к ядерной патологии относят хромосомные абберации (к ним относятся: транслокация, делеция, дупликация, фрагментация, инверсия) и хромосомные болезни.
Вопрос №8. Охарактеризуйте морфофункциональные признаки патологии цитоплазмы и цитоплазматических органелл
дополнить из тетради
вопрос №9. Обратимые и необратимые повреждения. Смерть клетки: определение, классификация. Морфологические проявления повреждения и смерти клеток
Повреждение – это изменение структуры клеток, межклеточного вещества, тканей или органов, которые приводят к нарушению их жизнедеятельности.
До определенного момента клетки адаптируются без изменения функции.
Смерть – это выражение необратимого прекращения жизнедеятельности организма (клетки, ткани и.т.д). Это следствие повреждения.
Смерть бывает естественной и насильственной, биологической или клинической. Может осуществляться путем некроза и дистрофии или апоптоза. Это её морфологические выражения.
Среди механизмов, взывающих повреждения тканей и клеток наиболее важны четыре:
Нарушение проницаемости мембраны
Нарушение кальция, и связанная с этим активация ряда ферментов, к которым относятся протеазы, фосфатазы и.т.д.
Гипоксия и последующее СПОЛ
Повреждение митохондрий и снижение синтеза АТФ
Что касается морфологических проявлений, то светооптически различают только набухание и жировые изменения.
Вопрос №10. Причины повреждения клеток. Механизмы повреждения клеток. Виды (ишемическое и гипоксическое, повреждение свободными радикалами кислорода, токсическое повреждение) и патогенез повреждения клеток
Причины повреждения клеток:
Гипоксия
Ишемия
Физические агенты
Химические агенты
Инфекционные агенты
Иммунологические реакции
Генетические повреждения
Дисбаланс питания
Механизмы повреждения клеток:
Отсутствие кислорода
Нарушение гомеостаза кальция
Истощение синтез АТФ и разрушение митохондрий
Потеря избирательной проницаемости плазматической мембраны
Виды повреждения клеток:
Ишемическое (гипоксическое)
Повреждение, вызванное свободными радикалами
Токсическое повреждение
Патогенез повреждения клеток при ишемическом повреждении:
Сначала происходит замедление и прекращение окислительного фосфорилирования. Затем происходит активация процессов гликолиза. Затем происходит отек (вследствие недостатка «топлива» для Na, K – АТФазы). Также происходит накопление осмотический активного лактата и это провоцирует еще больший отек. Образуются выпячивания, микроворсинки слущиваются, появляются миелиновые фигуры. Митохондрии и ЭПС набухают. Как ни странно, все выше перечисленные изменения обратимы. Весь этот процесс становиться необратимым, когда митохондрии теряют кристы. Затем происходит выделение в цитоплазмы ферментов лизосом.
Патогенез при свободнорадикальном окислении
Вызывается лучевой энергией. Окислению могут подвергаться липиды, белки, нуклеиновые кислоты. Окислители: супероксид-радикал, гидроксид-анион, перекись водорода. При окислении липидов происходит образование перекиси, которая тоже является окислителем. Соответственно повреждения функций можно рассказать, исходя из повреждений липидов, белков и нуклеиновых кислот в клетке.
Патогенез при токсическом повреждении
Здесь надо понимать, что вещества могут быть сразу токсичными для клеток (цианид), а могут посредством превращений в печени превратиться в токсичные соединения.