Инструкция к практическому занятию №12

ТЕМА: «Лабораторная диагностика заболеваний, вызываемых эшерихиями и шигеллами»

Задачи:

• Изучить методы выявления эшерихий.

• Изучить методы выявления шигелл.

• Закрепить навык работы с микроскопом.

ЗАДАНИЕ № 1

1.1. Методы выявления эшерихий

Эшерихии являются постоянными обитателями толстого кишечника человека. По структуре соматического О-антигена они подразделяются на 160 серологических вариантов, по оболочечному термолабильному антигену К – более чем на 90. Три биогруппы эшерихий болезнетворны, особенно для детей: энтеропатогенные, энтеротоксигенные, энтероинвазионные. В частности вызывают колиэнтериты, дизентериеподобные заболевания, холероподобные гастроэнтериты, воспалительные процессы мочевыводящих путей. Патогенные штаммы кишечной палочки могут вызывать также нагноительные процессы и пищевые токсикоинфекции.

При заболеваниях, вызванных эшерихиями в лабораторию доставляется следующий материал: испражнения, рвотные массы, гной, отделяемое слизистой оболочки зева и носа, при сепсисе – кровь, промывные воды, смывы с рук обслуживающего персонала, воздух палат, при токсикоинфекции – остатки пищи.

Подготовительный этап:

1. Подготовить рабочее место согласно правил работы в бактериологической лаборатории.

2. Подготовить емкости с дез. растворами для обеззараживания предметов, используемых в процессе работы, согласно инструкции.

Основной этап:

1. Бактериологическое исследование.

Материалы (исключая кровь) высевают у постели больного на среду Эндо и помещают в термостат при 37⁰С. Инкубации в термостате в течение 18-24 часа.

Эшерихии растут на простых и дифференциально-диагностических средах. На пластинчатом питательном агаре эшерихии формируют круглые с ровными краями, выпуклые, влажные полупрозрачные колонии, на дифференциально-диагностических средах вследствие разложения лактозы – цветные (красные с металлическим блеском – среда Эндо). Они ферментируют с образованием кислоты и газа многие углеводы. Протеолитическая активность эшерихий умеренная.

2. Серологическое исследование.

Через 18-24 часа инкубации в термостате отбирают 10 интенсивно – красных лактозоположительных колоний кишечных палочек и агглютинируют на стекле в поливалентной сыворотке, содержащей антитела к деарейным сероварам. Агглютинирующиеся колонии пересевают на среду Олькеницкого (для изучения способности ферментировать мочевину и продуцировать сероводород). На заключительном этапе лабораторной диагностики ставят развернутую реакцию агглютинации в специфической сыворотке. При выявлении агглютининов в сыворотках больных используется реакция непрямой гемагглютинации, с помощью которой определяют О-антитела у больных колиэнтеритом.

3. Биологическое исследование. Для полной характеристики диарейных эшерихий определяют также их вирулентность: интраназальное заражение мышей и др.

ЗАДАНИЕ № 2

2.2. Методы выявления шигелл

Дизентерия - инфекционное заболевание, характеризующееся интоксикацией организма, поносами с болезненными спазмами промой кишки. Вызывается 4 видами шигелл (Зонне, Флекснера, Бойди, дизентерии).

Правила взятия материала и доставка его в лабораторию при заболеваниях

Изучите и отметьте в таблице в своих тетрадях, какой конкретно материал исследуют при эшерихиозах и шигеллезе.

При заболеваниях, вызванных шигеллами в лабораторию доставляется следующий материал: испражнения.