«УТВЕРЖДАЮ»

Зав. кафедрой биологии

Д.м.н. М.В. Черников

“1” февраля 2012 г.

Методические рекомендации

К практическому занятию по разделу «Протозоология» для студентов 1 курса

Специальности «Лечебное дело»

Тема. Организация и биология Простейших. Споровики и Инфузории паразиты -человека.

ЦЕЛЬ. Знать особенности строения и жизненного цикла малярийного плазмодия, токсоплазмы и балантидия - возбудителей широко распространенных заболеваний человека. На основании знаний морфологии и жизненных циклов уметь обосновать методы лабораторной диагностики и профилактики.

ПЕРЕЧЕНЬ ЗНАНИЙ И ПРАКТИЧЕСКИХ НАВЫКОВ

1. Уметь выявлять на примере малярийного плазмодия и токсоплазмы признаки характерные для класса Споровики.

2. Уметь использовать особенности строения и жизнедеятельности малярийных плазмодиев для диагностики и профилактики заболеваний.

3. Уметь дифференцировать виды малярийных плазмодиев.

4. Уметь использовать особенности строения и жизнедеятельности Toxoplasma gondii для диагностики и профилактики токсоплазмоза.

5. Уметь выявлять на примере Balantidium coli признаки характерные для класса Ресничные инфузории.

6. Уметь использовать особенности строения и жизнедеятельности Balantidium coli для диагностики и профилактики балантидиаза.

ОСНОВНЫЕ ВОПРОСЫ ТЕМЫ

1. Общая характеристика Споровиков.

2. Жизненный цикл Plasmodium vivax.

3. Малярийный плазмодий. Морфология, пути заражения, методы лабораторной диагностики и меры профилактики малярии.

4. Морфологическая характеристика, цикл развития, патогенное действие токсоплазмы. Методы лабораторной диагностики и меры профилактики токсоплазмоза.

5. Балантидий. Морфология, цикл развития, обоснование лабораторной диагностики, профилактика балантидиаза.

Краткое содержание темы

К классу Споровиков относится около 1350 видов, ведущих паразитический образ жизни. Питание споровиков осуществляется за счет поглощения пищи всей поверхностью тела. Они претерпели наиболее глубокую дегенерацию, органеллы движения у них отсутствуют. Споровики являются внутриклеточными паразитами. Различают два варианта циклов развития споровиков. Первый вариант включает стадии бесполого размножения и полового процесса в виде копуляции и спорогонии. Бесполое размножение осуществляется путем шизогонии - множественного деления ядра, затем образуются мужские и женские гаметы. После слияния гамет образуется зигота, под оболочкой которой происходит спорогония - множественное деление с образованием спорозоитов. Спорозоиты являются инвазионной стадией для человека. Второй путь встречается у споровиков, обитающих в полостных органах (токсоплазма), и включает стадии цисты и трофозоита. Патогенное действие споровиков вызывает тяжелые нарушения функции печени, селезенки, иммунокомпетентной системы, сопровождающиеся сильной интоксикацией организма. При отсутствии лечения некоторые заболевания заканчиваются летальным исходом.

Малярийные плазмодии вызывает малярию – антропозонозную протозойную болезнь, сопровождающуюся приступами лихорадки, анемией, увеличением печени и селезёнки. Источник инфекции – человек (больной или паразитоноситель). Переносчик – комары рода Anopheles. Возбудителями малярии у человека являются:

Plasmodium vivax – возбудитель трехдневной малярии;

Plasmodium malariae – возбудитель четырехдневной малярии;

Plasmodium falciparum – возбудитель тропической малярии;

Plasmodium ovale – возбудитель малярии-овале трехдневного типа.

Цикл развития у всех четырех видов одинаков и протекает со сменой полового и бесполого поколений. Полового - в организме комара Анофелес (спорогония) и бесполого в организме человека (шизогония). При укусе самка малярийного комара впускает со слюной спорозоиты, которые с кровью проникают в печень, в ее клетках проходят тканевую, или внеэритроцитарную стадию развития с образованием шизонтов. Последний поглощает содержимое печеночной клетки, растет; его ядро многократно делится, вокруг каждого ядра обособляется участок протоплазмы – так формируются мерозоиты. Некоторое время они находятся в «дремлющем» состоянии, затем выходят из разрушенных клеток в кровь и внедряются в эритроциты, с этого момента на­чинается эритроцитарная стадия развития – шизогония. Шизонт растет и развивается, поглощая гемоглобин эритроцита, который вскоре разрушается. Множество шизонтов, вышедших в кровь, внедряются в новые клетки эритроцитов, их поколения теперь называются мерозоитами. Массовый выход в кровь мерозоитов, поступление продуктов распада и осколков эритроцитов характеризует приступ малярии. Морфологические признаки шизонтов, рассматриваемых в мазке или толстой капле крови, позволяют проводить дифференциальный диагноз всех четырех видов малярии. Один цикл эритроцитарной шизогонии у Р. vivax, Р. ovale и Р. falciparum длится по 48 часов, у Р. malaria – 72 ч.

Наряду с бесполым поколением шизонтов в эритроцитах больного развиваются незрелые половые формы – гаметоциты (гамонты). Они при укусах больного человека самкой малярийного комара в ее желудке продолжают развитие, превращаясь в половозрелые гаметы. После слияния мужской и женской гамет оокинета активно продвигается под наружную стенку желудка комара, где путем деления из нее образуется множество спорозоитов. Они накапливаются в протоках слюнных желез комара, и с этого времени насекомое становится заразным для здоровых людей. Заражение возможно также при переливании донорской крови, содержащей плазмодии, от больной матери плоду (чаще во время родов, реже – через плаценту). Таким образом, в организме человека плазмодий размножается бесполым путем – шизогонией, человек является промежуточным хозяином. В организме комара проходят две стадии цикла развития паразита: половой процесс – гаметогония и образование спорозоитов путем деления под оболочкой ооцияты – спорогония. Поэтому малярийный комар является окончательным хозяином.

Тропическая малярия при отсутствии специфического лечения и ведет к смерти в связи с резким нарушением микроциркуляции крови в головном мозге, печени, почках и других органах, остальные три вида малярии почти никогда не приводят к смерти.

Диагностика. Возбудители малярии обнаруживаются в периферической крови больного. Для успешного обнаружения плазмодиев малярии имеют значение: время взятия крови у больного и качество приготовления препаратов. Большое число паразитов может быть получено от больных, находящихся в периоде острых проявлений малярии, желательно до назначения противомалярийного лечения. Кровь рекомендуется брать во время приступа малярии либо сразу после него. Готовят препараты двух видов: толстую каплю и тонкий мазок с окраской по Романовскому-Гимзе. Толстая капля крови предварительно фиксируется.

В мазках паразиты хорошо различимы по форме в различные стадии своего развития. Однако в толстой капле объем крови намного больше (в 30-50 раз), чем в тонком мазке, поэтому вероятность обнаружения паразитов в этом случае много выше.

Профилактика малярии. Раннее выявление и лечение больных, профилактическое лечение в зонах широкого распространения малярии. Как и при любых трансмиссивных заболеваниях, необходима прицельная борьба с малярийными комарами.

Токсоплазма (Toxoplazma gondii) – возбудитель токсоплазмоза. Локализация: клетки головного мозга, печени, почек, лёгких, сердца, мышц и других органов млекопитающих. У человека проникновение в организм токсоплазм редко ведет к острому заболеванию, сопровождающемуся повышением температуры, появлением сыпи, увеличением лимфатических уз-лов. Однако в отдельных случаях наблюдается обострение токсоплазмоза с воспалительными процессами, поражением нервной ткани, глаз, сердечной мышцы и т.д. Особую опасность представляет заражение токсоплазмозом женщин во время беременности. Паразиты могут проникнуть трансплацентарно в организм плода и вызвать различные уродства (гидроцефалию, микроцефалию и др.) или гибель плода. Врожденный токсоплазмоз может обусловить отставание в умственном развитии.

Токсоплазмы распространены на всех материках, где обитают промежуточные и окончательные хозяева паразита. Заражение происходит при употреблении в пищу, термически слабо обработанных продуктов (мясо, молоко, яйца), содержащих в псевдоцистах – эндозоиты и в цистах – цистозоиты паразита. Животные и человек могут инфицироваться ооцистами паразита, которые выделяют только кошки и представители семейства кошачьих - окончательные хозяева токсоплазм. Наиболее опасен врождённый токсоплазмоз. Из каждой тысячи беременных три поражаются токсоплазмозом с летальностью плода, перинатальной смертностью плода или хронической инфекцией.

Диагностика. Существует прижизненное и посмертное выявление возбудителей заболевания. В том и другом случае исследуют кровь, спинно-мозговую жидкость, пунктат лимфатических узлов, миндалин, остатки плодных оболочек, плаценту. Готовят мазки, отпечатки, гистологические срезы. Цисты токсоплазм находят в мозгу, тканях глаза, легких, сердца, матки и др. Препараты окрашивают по Романовскому-Гимзе.

Хорошие результаты дает метод биопробы: материал, взятый при жизни или посмертно, в виде взвеси вводят шприцем внутрибрюшно, в нос или внутрикожно белым мышам (у них встречается спонтанный токсоплазмоз), очень часто у этих животных развивается генерализованная инфекция. При постановке диагноза токсоплазмоза учитывают результаты комплексного клинического, рентгенологического (снимки черепа), лабораторно-паразитологического и иммунологического методов обследования.

Профилактика. Термическая обработка животных продуктов питания, санитарный контроль на бойнях и мясокомбинатах, предотвращение тесных контактов беременных женщин и детей с кошками.

Балантидий (Balantidium coli) вызывает балантидиаз – болезнь, характеризующуюся общей интоксикацией и язвенным поражением толстой кишки. Заражение человека происходит при попадании цист паразита в кишечник с загрязнённой водой и пищей. Большинство случаев инфицирования протекает бессимптомно. Паразит – обитатель кишечника свиней, имеет вегетативную и цистную стадии развития. Вегетативная клетка (трофозоит) паразита овальная, крупная (30-100 × 30-150 мкм), с ресничками. Содержит макро- и микронуклеус. На конце клетки имеется щелевидное отверстие – перистом с ротовым отверстием – цитостомом. Задний конец имеет анальную пору. Вегетативная клетка делиться бинарно – надвое. Она может заглатывать микробы и другие клетки, в т.ч. форменные элементы крови. Внедряясь в слизистую оболочку толстой кишки, вызывает язвенные поражения. Цисты – округлые с толстой оболочкой; попадают в окружающую среду с фекалиями и длительно в ней сохраняются.

Диагностика. Обнаружение балантидия в нативном мазке фекалий, разбавленном 1-2 каплями физиологического раствора, не представляет особых затруднений в связи с их крупными размерами и активной подвижностью, что заметно при малом увеличении микроскопа (8×10) при этом на поверхности тела инфузории можно заметить мерцание ресничек, которые в области цитостома имеют более крупные размеры. Заметно разделение цитоплазмы на два слоя: более тонкий светлый – эктоплазму, и зернистый внутренний, занимающий весь остальной объем тела инфузории – эндоплазму.

Установлено, что выделение балантидий с фекалиями происходит с некоторой периодичностью, когда инфузории не обнаруживаются на протяжении 1-3 дней. Поэтому необходимо снова повторить взятие материала и просмотр мазков фекалий каждые 3-4 дня. Если у свиней в фекалиях обнаруживаются и вегетативные формы балантидий, и его цисты, то у человека цисты этой инфузории встречаются крайне редко.

В случае приготовления фиксированных, постоянных препаратов балантидной инфузории окраску проводят железным гематоксилином по Гейденгайну.

Профилактика. Общественная - обследование и выявление больных и носителей среди

рабочих свиноферм и работников колбасного производства.

Личная - соблюдение правил личной гигиены (мытье рук, овощей, фруктов, кипячение воды)