Лекция 10. Физико-химические методы анализа. Основы количественного анализа. Погрешности и ошибки в количественном анализе.
План.
Внутрилабораторный контроль качества лабораторных исследований:
Порядок осуществления ВЛКК;
Методы внутрилабораторного контроля;
Контроль работы приборов и оборудования;
Принципы оценки качества измерительных приборов;
Контроль качества посуды.
Правила проведения внутрилабораторного контроля качества - ВЛКК:
Основные положения;
ВЛКК лабораторных исследований с использованием контрольных материалов.
Д.З. по уч. Пустоваловой стр.
По определению экспертов Международного Союза чистой и прикладной химии (1993) и Всемирной Организации здравоохранения (1981)
внутрилабораторный контроль качества лабораторных исследований – это система осуществляемых персоналом лаборатории мероприятий, которые направлены как на оценку того, достаточна ли надежность получаемых результатов для выдачи их лабораторией, так и на устранение причин неудовлетворительных характеристик этих результатов. При этом результаты выдаются лабораторией как для того, чтобы способствовать принятию клинического решения, так и для эпидемиологических либо исследовательских целей.
В более общем смысле, внутрилабораторный контроль качества применим к любым этапам процесса получения аналитических результатов, начиная с определения потребностей клиницистов через этапы получения биоматериала и измерения количества анализируемых веществ и до этапа выдачи заключения.
Цель - обеспечение того, чтобы аналитический процесс удовлетворял предварительно установленным требованиям к точности анализа и величинам отклонения.
Проведение внутрилабораторного контроля качества охватывает три принципиальных области:
контроль качества преаналитической стадии;
контроль качества аналитической стадии (статистический контроль качества);
оценку результатов внутрилабораторного контроля качества.
На преаналитической стадии предусмотрен контроль:
соответствия лабораторных приборов и оборудования планируемым видам исследований;
оптимизации приготовления реактивов и процедур выполнения анализа;
соответствия применяемых аналитических процедур рекомендованным;
уровня подготовленности персонала.
На аналитической стадии контролируют:
идентичность свойств контрольных образцов и исследуемых проб;
стабильность условий, в которых оцениваются базовые характеристики;
идентичность обработки контрольных образцов и исследуемых проб на всех этапах;
простоту и ясность представления результатов внутрилабораторного контроля качества;
наличие четких критериев браковки результатов анализа (контрольных правил).
Оценка результатов внутрилабораторного контроля качества предусматривает:
тщательный анализ ошибок каждого цикла внутрилабораторного контроля качества и принятие корригирующих мер;
регулярный анализ результатов внутрилабораторного контроля качества в динамике.
Метод референтный — метод, показывающий максимальную аналитическую специфичность и точность результатов измерения. Результаты, полученные с его помощью, позволяют дать оценку результатам анализа, полученным другими методами.
Случайные ошибки— отклонения в повторном определении каких-либо параметров в одной и той же пробе, изменяющиеся непредсказуемым образом.
Систематические ошибки— погрешности, одинаковые по знаку, происходящие от определенных причин, влияющих на результат либо в сторону увеличения, либо в сторону уменьшения. Систематические ошибки можно предусмотреть и устранить или ввести соответствующие поправки. Величина её характеризует точность результатов исследования.
Контрольный материал — материал, предназначенный для осуществления контроля качества лабораторных исследований и приближающийся по наиболее существенным свойствам к исследуемому и анализируемому материалу.
Контроль качества внутренний (внутрилабораторный) — система мер, предназначенных для оценки качества результатов анализа, полученных в лаборатории.
Внешняя оценка качества — контроль сравнимости результатов, полученных в нескольких лабораториях на одном и том же контрольном материале одними и теми же методами или методами, дающими статистически достоверно совпадающие результаты.
Сходимость измерений (precision, Konvergenz) — качество измерений, отражающее близость друг к другу результатов измерений, выполняемых в одинаковых условиях (воспроизводимость в серии).
Воспроизводимость измерений (reproducibility, Reproduzierbarkeit) — качество измерений, отражающее близость друг к другу результатов измерений, выполняемых в различных условиях (в различное время, в различных местах, разными людьми).
Точность измерений (accuracy, Genauigkeit) — качество измерений, отражающее близость их результатов к истинному (референтному) значению измеряемой величины.
Порядок осуществления внутрилабораторного контроля качества
Внутрилабораторный контроль качества включает контроль воспроизводимости и точности (правильности) и может осуществляться с помощью методов, использующих специальные контрольные материалы или средства ряда методов, не требующих контрольных материалов.
Внутрилабораторный контроль качества предусматривает оценку деятельности всего медперсонала, участвующего в доаналитическом, аналитическом и постаналитическом этапах работы, так как на любом из них возможны ошибки, связанные с подготовкой больного к исследованию, забором пробы, ее подготовкой к исследованию, хранением образцов и т. д. В конечном счете, возможны неточности при выписке и регистрации готовых анализов, а также в их трактовке.
Наиболее частые ошибки, не зависящие от работы лаборатории, но искажающие конечный результат:
Положение тела, прием пищи перед забором крови, чрезмерно тугой жгут, наложенный на плечо, физическое или эмоциональное напряжение больного могут повлиять на результаты исследований обменов БЖУ, гормонов, факторов свертывания крови.
Влияние характера питания, качественный состав пищи.
Биологические ритмы. Время взятия крови влияет на показатели исследования.
Сыворотка с признаками гемолиза.
Влияние некоторых лекарств.
Нельзя проводить гематологические исследования после физиотерапевтических процедур и рентгеновского облучения; реакцию Вассерма-на — у лихорадящих больных, после приема алкоголя, наркоза, травм и хирургических вмешательств, приема наркотических препаратов и препаратов наперстянки. Нельзя исследовать активность кислой фосфатазы после массажа предстательной железы.
Методы внутрилабораторного контроля.
Методы, использующие контрольный материал и данные пациента.
А) Методы, использующие контрольный материал: Метод контрольных карт
Ежедневно работник лаборатории (лаборант, врач-лаборант) при проведении всех видов анализа, наряду с опытными пробами, исследует контрольный материал. Контроль должен охватывать практически каждое лабораторное исследование, результат которого имеет количественный или качественный характер. Определение содержания компонентов в контрольном материале проводят одновременно с исследованием опытных проб, при этом вместо сыворотки или плазмы крови берут контрольный материал в таком же количестве.
Определение каждого компонента в контрольном материале проводят методом, применяемым в данной лаборатории. Результаты ежедневно регистрируются.
В конце месяца (или другого срока, который предварительно или внезапно установлен начальником лаборатории или контрольным органом) проводится статистический анализ исследований контрольного материала с построением контрольной карты, расчетом среднеквадратического отклонения, ошибки средней величины, коэффициента вариации и сопоставление его с допустимым пределом ошибки.
Контроль работы приборов и оборудования.
Применяемая в настоящее время широкая номенклатура лабораторных исследований требует использования самых разнообразных технических средств, и их перечень составляет десятки наименований.
Вся лабораторная техника может быть подразделена на общую, необходимую для большинства исследований, и специальную, зависящую от вида выполняемых исследований.
В общую лабораторную технику входит аппаратура для:
дистилляции воды,
взвешивания,
центрифугирования,
нагревания и термостатирования,
перемешивания и встряхивания.
Специальная аппаратура составляет широкий перечень фотометров, анализаторов и др. приборов, выпускаемых различными фирмами.
Для биохимических исследований применяются анализаторы открытого и закрытого типа.
В гематологии в настоящее время получили широкое применение автоматические счетчики, позволяющие осуществить подсчет форменных элементов крови — эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, клеток костного мозга, а также средний объем эритроцитов, величину гематокрита, среднее содержание гемоглобина в одном эритроците, осуществить запись эритроцитометрической кривой. Наибольшее распространение получили приборы, основанные на кондуктометрическом принципе измерения