7.4.2. Метод мембранной фильтрации

При определении стерильности МИБП, обладающих выраженным антимикробным действием, и МИБП, разлитых в емкости более 100 мл, используют метод мембранной фильтрации.

Аппаратура

В работе используют любую, подходящую для этих целей фильтрационную систему, состоящую из закрытого резервуара и приемника, между которыми помещают закрепленную надлежащим образом мембрану, а также насоса, обеспечивающего фильтрацию жидкости.

Фильтрационные системы делятся на два типа: в одних мембрану после завершения процедуры фильтрации асептически извлекают, делят пополам и погружают в две емкости со 100 мл тиогликолевой среды для последующей инкубации при температурах от 30 до 35 °С и от 20 до 25 °С (тип I); в других - мембраны закреплены в двух резервуарах, куда после фильтрации помещают по 100 мл тиогликолевой среды, для последующей инкубации в этих же емкостях при соответствующих температурах (тип II). Установки второго типа могут быть многоразового использования (их стерилизуют в собранном виде, вместе с мембраной, насыщенным паром при избыточном давлении (0,11 +/- 0,02) МПа/(1,1 +/- 0,2) кгс/кв. см и температуре (121 +/- 1) °С в течение 18 - 20 мин.) или одноразовые стерильные системы (например, стеритесты фирмы Millipore для Steritest Compact System). Используют мембраны с размером пор 0,47 мкм, диаметром 47 мм, скорость прохождения потока 55 - 75 мл/мин. при давлении 93,3 кПа (70 см рт. ст.).

Примечание. При содержании в МИБП масел фильтр стерилизуют отдельно, тщательно просушивают и с соблюдением асептики помещают в фильтродержатель или используют одноразовые стеритесты.

Методика испытания

Используют то количество емкостей или то количество готового препарата в полуфабрикате, которые требуются для проведения испытания стерильности (п. 7.1.1 и п. 7.1.3). Если содержимое емкости более 2 мл, но менее 500 мл, - фильтруется весь объем препарата. Для емкостей более 500 мл фильтруют только 500 мл из всего объема.X

Фильтрование отобранных образцов проводят в асептических условиях. Фильтрационную систему целесообразно устанавливать в настольных ламинальных боксах. Обработку препаратов перед внесением в бокс проводят в соответствии с п. 7.3.X

Испытуемый препарат растворяют, если это необходимо, соответствующим растворителем или 0,9%-ным раствором натрия хлорида, а затем объединяют либо непосредственно в резервуаре для установок I типа, либо в отдельной стерильной емкости, с последующим разделением объема препарата на две половины для фильтрации в 2-х резервуарах для установок II типа. Если емкости больших объемов, то фильтрацию можно проводить без предварительного объединения, разделив их содержимое приблизительно поровну между двумя резервуарами, если не предусмотрено автоматического разделения, как, например, в установке Steritest Compact System ("Millipore"). Для препаратов, представляющих собой вязкую жидкость или суспензию, не поддающихся быстрой фильтрации, используют разведение достаточным количеством жидкости 1 для увеличения скорости фильтрации. При фильтрации препаратов, обладающих антимикробным действием, в конце процедуры фильтр промывают 3 порциями по 100 мл жидкости 1. Если препарат содержит лецитин или масла, вместо жидкости 1 используют жидкость 2 (Приложение).X

Для контроля стерильности условий, в которых проводятся испытания, необходимо фильтровать растворитель без испытуемого МИБП, с последующим воспроизведением всех вышеописанных операций.

Тиогликолевую среду с помещенными в нее фильтрами выдерживают при температурах от 30 до 35 °С и от 20 до 25 °С в течение 7 сут. при ежедневном осмотре.