Приготовление срезов в бузине.

Цилиндрические палочки из сердцевины бузины разрезают на куски длиной 1-1,5 см, кладут на стол и разрезают скальпелем пополам по длине. Между половинками кладут тонкий корень, лист, стебель; бузину с объектом плотно зажимают пальцами и делают срезы, ориентируя лезвие вдоль щели, начиная срез с поверхности бузины, срезают объект вместе с бузиной, которую затем отбрасывают.

Приготовление срезов в пробке.

Берут небольшие (около 1 см) "бархатные" пробки (лишенные темных ходов), перед употреблением их кипятят в воде 15 минут, затем надрезают на 3/4 скальпеля и, поместив в разрез объект, делают срез.

Приготовление срезов в парафине.

Из куска парафина скальпелем вырезают прямоугольный блок, который удобно держать в руке (1x2 см). В верхнюю часть парафина вставляют нагретый кончик препаровальной иглы, в расплавленную ямочку быстро опускают размягченное семя или плод. Парафин через несколько минут застывает, выравнивают поверхность парафина, отрезают верхушку объекта, затем делают срезы вместе с парафином, парафин отбрасывают.

Приготовление срезов в сыром картофеле.

Картофель используют вместо сердцевины бузины, вырезают из картофеля прямоугольный блок, в него помещают объект и делают срезы.

- 23 –

Изготовление временных препаратов.

1. Моют и тщательно вытирают предметное и покровное стекло. (Чтобы не сломать хрупкое покровное стекло, его споласкивают в воде, помещают в складку полотенце между большим и указательным пальцами и осторожно вытирают круговыми движениями пальцев).

2. Наносят на предметное стекло кашпо жидкости (воды, глицерина, раствор реактива или красителя).

3. Делают срез изучаемого органа при помощи бритвы (некоторые органы рассма-

тривают целиком).

4. Выбрав самый тонкий срез (или кусок органа), кладут его на предметное стекло

в каплю жидкости.

5. Закрывают срез покровным стеклом так, чтобы под него не попал воздух. Для

этого покровное стекло берут двумя пальцами за грани, подводят нижнюю

грань к краю капли жидкости (под углом 45°) и плавно опускают.

6. Если жидкости много и она вытекает из-под покровного стекла, удаляют её кусочком фильтровальной бумаги. Если же под покровным стеклом остались места, заполненные воздухом, добавляют жидкость, поместив каплю её рядом с краем покровного стекла.

- 24 -

Техника приготовления микропрепаратов из лёкарственного растительного сырья.

ЛИСТЬЯ. (цельное и резаное сырье)

Из тонких листьев готовят препараты листа с поверхности, из толстых и кожистых при необходимости поперечные срезы.

Мелкие листья используют целиком, от крупных берут кусочки пластинки листа с краем и жилкой.

Просветление:

а) Несколько кусочков сырья помещают в колбу или пробирку, +5% р-р ΝаОН, разведенный водой 1:1 и кипятят 1-2 мин. Затем содержимое выливают в чашку Петри, жидкость сливают и сырье тщательно промывают водой. Из воды кусочки сырья вынимают скальпелем, лопаточкой или препаровальной иглой и помещают на предметное стекло в каплю раствора хлоралгидрата или глицерина, (кусочек должен лежать ровно!).

6) Кусочки сырья кипятят в растворе хлоралгидрата, разведенного водой(1:1) 5-10 Просветленный кусочек помещают на предметное стекло в каплю раствора хлорал-

гидрата или глицерина, разделяют скальпелем или препаровальной иглой на 2 части, одну осторожно переворачивают, объект накрывают покровным стеклом, и рассматривают под микроскопом сначала при малом, затем при большом увеличении. при приготовлении микропрепаратов из толстых листьев их предварительно раздавливают скальпелем.

в) Для приготовления поперечных срезов листья кипятят в растворе хлоралгидрата 10

Готовые срезы помещают в воду и используют для приготовления микропрепаратов.

ТРАВЫ. (цельное и резаное сырье)

«Готовят микропрепарат листа с поверхности. В некоторых случаях готовят препараты стебля. Для исследования стеблей их отрезки кипятят в 5% р-ре NaOH, промывают водой, снимают эпидермис скальпелем или препаровальными иглами и рассматривают его с поверхности, из остальных тканей готовят препарат, раздавливая объект скалъпелем на предметном стекле в растворе хлоралгидрата или глицерина. При необходимости готовят поперечные срезы стебля, предварительно просветлив (как листья см. пункт "в").

ЦВЕТКИ. (цельное и резаное сырье)

Готовят микропрепараты из отдельных частей соцветия (цветки, листочки, обертки) частей цветка( лепестки, чашелистики), рассматривают их с поверхности (подготовка сырья также как у листьев, см. пункт "а, б").

-25-

ПЛОДЫ И СЕМЕНА. (цельное сырье)

Готовят препараты кожуры семени и околоплодника с поверхности или поперечные срезы.

-Препараты с поверхности: 2-3 семени или плода кипятят в пробирке в 5 %

растворе NaOH 2-3 мин, затем тщательно промывают водой. Объект помещают на предметное стекло, препаровальными иглами отделяют капсулу семени или ткани околоплодника и рассматривают их в растворе хлоралгидрата или глицерина.

Срезы: для приготовления срезов сухие плоды и семена размягчают, поместив на сутки о влажную камеру или водяным паром в течение 15-30 мин и более в зависимости от твердости.

КОРА.

-Цельное сырье: готовят поперечные или продольные срезы, кусочки коры размером 2-3хО,5-1 см кипятят в пробирке с водой в течение 5 мин. Размягченные куски выравнивают скальпелем так, чтобы они имели строго поперечное или продольное сечение. Делают срезы и готовят микропрепа-раты в растворе хлоралгидрата или глицерина.

Для выявления различных структур или веществ готовят микропрепараты в соответствующих реактивах.

-Резаное сыръе: соскоб коры или мелкие кусочки кипятят в течение 3-5 мин в 5% р-ре NaOH, промывают водой и готовят микропрепараты, раздавливая объект скальпелем в р-pe глицерина или хлоралгидрата (препарат давления»).

ПОДЗЕМНЫЕ ОРГАНЫ.

Цельное сырье- готовят поперечные и продольные срезы, небольшие кусочки помещают в холодную воду и выдерживают около суток, затем помещают в смесь 95% спирта и глицерина( 1:1) на 3 суток. Размоченные объекты выравнивают скальпелем, делают срезы и готовят микропрепараты в р-ре хлоралгидрата или глицерина и рассматривают диагностические приз-наки сначала при малом, затем при большом увеличении.

Резаное или дробленое сырье

Кусочки подземных органов кипятят 3-5 мин в 5% р-ре NaOH, тщательно промывают водой и готовят микропрепараты "давления" (раздавливая кусочки в р-ре глицерина или хлоралгидрата).

РАСТИТЕЛЬНЫЕ ПОРОШКИ.

На предметное стекло наносят 1-2 капли включающей жидкости, смачивают в ней конец препаровальной иглы и берут ей исследуемый порошок, перенося его на предметное стекло в жидкость, тщательно размешивают, осторожно, чтобы не попал воздух, накрывают покровным стеклом, и нагревают до просветления, затем придавливают слегка стекло ручкой препаровальной иглы, выступившую жидкость по краям удаляют полоской фильтровальной бумаги), препараты готовят в р-ре хлоралгидрата или в р-ре щелочи, порошки кожистых листьев просветляют кипячением в 5% р-ре NaOH), крахмал рассматривают в воде, глицерине без нагревания. Ликоподий в растворе хлоралгидрата после нагревания.

- 26 -

Анатомо -диагностические признаки

Лист

• Наличие хлорофиллоносной ткани;

• Эпидермис, который "характеризуется различной формой клеток (извилистая, многоугольная, сильно вытянутая);

• Волоски, разнообразной формы (одноклеточные, многоклеточные, головчатые, бородавчатые, звезчатые, пучковые, Т-образные, ретортовидные, конусовидные, бичевидныс, гуссницеобразные и другие)-наиболее характерный признак;

• Характер кутикулы (гладкая, складчатая, различной толщины);

• Вместилище с эфирным маслом (строение их характерно для каждого вида, а иногда для целого семейства);

• Кристаллы оксалата кальция или углекислот кальция (рафиды, друзы, одиночные кристаллы, сферокристаллы, кристаллический песок, цистолиты);

• Устьица и их расположение:

околоустьичные клетки две - перпендикулярно устьичной щели, околоустъичные клетки две - параллельно устьичной щели, околоустьичные клетки три - одна из которых мелкая околоустьичных клеток от трех до шести.

Плоды и семена

• Строение семенной оболочки или околоплодника (механическая ткань, эфиромасличные канальцы, волоски на эпидермисе)

• Химическая природа запасных питательных веществ в семенном ядре Коры

• Механические элементы:

Лубяные волокна (узкие, длинные; толстые, короткие; лежат группами, по одиночке; сопровождаются кристаллоносной обкладкой),

Каменистые клетки (одиночные или группами),

Строение пробки (ее толщина, окраска, характер),

Наличие колленхимы,

• Ширина сердцевинных лучей;

• Соотношение первичной и вторичной коры;

• Включение оксалата Са⁺⁺

• Млечники, клетки с эфирным маслом. Корни и корневища

Проводящие элементы ксилемы (сосуды, которые могут быть сетчатыми, пористыми, спиральными лестничными и др.)

• Механические элементы - волокна, каменистые клетки.

• Запасные питательные вещества - крахмал, инулин, жирное масло. Цветки

• Строение эпидермиса;

• Наличие и строение волосков, железок;

• Кристаллические включения;

• Механические элементы в листочках обвертки;

• Формы и размер пыльцевых зерен. Травы

• Форма клеток эпидермиса;

• Тип устьиц;

• Наличие волосков, железок с особенностями их строения;

• Наличие механической ткани;

• Вместилища, млечники, секреторные каналы;

Расположение и строение проводящих пучков (в препаратах поперечного среза).

-27-

Р ис. 7. Различные типы волосков и железок.

1 — простые волоски многоклеточные; 2 — волоски с бородавчатой поверх­ностью; 3 — головчатые волоски; 4 — бичевидные волоски; 5 — звездчатые волоски; 6 — Т-образный волосок; 7 — ретортовидный волосок; 8 — жгучий волосок; 9 — конусовидный волосок; 10 — гусеницеобразный волосок; 11 — ветвистый волосок; 12 — пучковый волосок. Железка семейства сложно­цветных; 13 — вид с поверхности; 14 — вид сбоку. Железка семейства губоцветных; 15 — вид с поверхности; 16 — вид сбоку.

-28-

Рис. 8. Различные формы кристаллов оксалата кальция.

1 — одиночные кристаллы; 2 — кристаллоносная обкладка жилок; 3 — кри­сталлоносная обкладка волокон; 4 —друзы; 5 —рафиды, 6 — клетки с кристаллическим песком.

-29-

1

Р ис 9. Сосуды и механические элементы.

1а — кольчатый и спиральный; 16 — сетчатый; 1в — лестничный; 1г — пори­стый;

2 — каменистые клетки; 3 — волокна; ;4 — волокна в поперечном сечении. ;

- 30 –