3. Схема описания постановки опыта

ОПРЕДЕЛЕНИЕ БИОЛОГИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ АНТИБИОТИКОВ

Для определения биологической активности вновь синтезированной лекарственной формы антибиотика применяется метод диффузии препарата в питательный агар. Метод основан на сравнении степени угнетения роста стандартной культуры микроорганизма (тест-микроба) в присутствии известной концентрации рабочего стандарта антибиотика и раствора антибиотика, биологическую активность которого необходимо определить. Рабочие стандарты антибиотиков готовятся и выпускаются в запаянных ампулах Государственным институтом Контроля медицинских биологических препаратов им. Л.А. Тарасевича. Это специально изготовленные и очищенные образцы антибиотиков, которые хранят при температуре не выше 0 градусов по Цельсию.

В качестве тест-микроба используют непатогенные или условно-патогенные штаммы, наиболее чувствительные к данному антибиотику. Например, для определения биологической активности антибиотиков группы пенициллинов используется штамм стафилококка N209.

Методика определения.

В чашки Петри, установленные строго на горизонтальной поверхности, разливают расплавленную и остуженную до 45⁰С питательную среду, в которую предварительно вносят тест-культуру в определенной концентрации. После застывания питательной среды, на ее поверхности с помощью трафарета (подложенного под дно чашки Петри) расставляют 6 стерильных цилиндриков диаметром 6-8 мм или специальным пробойником делают лунки такого же диаметра. В три цилиндрика (лунки) через один пипеткой вносят 0,1 мл испытуемого раствора антибиотика, в остальные, 0,1 мл рабочего стандарта антибиотика известной концентрации. Чашки выдерживают при комнатной температуре в течение 2 часов (за это время происходит диффузия антибиотика в агар). Затем чашки инкубируют в термостате при t+37⁰C в течение 16-18 часов, после чего измеряют зону задержки тест-микроба вокруг цилиндрика (лунки). При определении биологической активности для каждого образца антибиотика готовят не менее 2-х разведений препарата и для каждого разведения используется 2 чашки. На каждой чашке измеряют зоны задержки роста тест-микроба и рассчитывают среднюю арифметическую величину для испытуемого образца и рабочего стандарта антибиотика. Определяют разницу между полученными средними арифметическими величинами первого и второго разведений и по специальной таблице разности диаметров зон определяют биологическую активность испытуемого раствора антибиотика. Полученный показатель биологической активности умножают на показатель разведения и получают активность основного раствора испытуемого антибиотика, которую выражают в (ЕД/мл).

4. Образец Титульного листа контрольной работы

Государственное бюджетное образовательное учреждение

высшего профессионального образования

«Рязанский государственный медицинский

университет имени академика И.П. Павлова»

Министерства здравоохранения Российской Федерации

Кафедра микробиологии, вирусологии, иммунологии

дисциплина

МИКРОБИОЛОГИЯ

Контрольная работа

(шифр - Р2)

студента 2 курса, группы№___

заочного отделения

фармацевтического факультета

___________________________

(Ф.И.О.

Работа сдана: ______________

(дата, подпись принявшего работу)

Работа проверена:________________________

(Ф.И.О., подпись, дата)

Рязань, 2013

Темы раздела «Общая и частная микробиология»

№ п/п	Тема раздела
1	Тема № 1. Микроскопический метод исследования.
2	Тема № 2. Структура бактериальной клетки.
3	Тема № 3. Морфология и физиология грибов, спирохет, простейших, актиномицетов, вирусов.
4	Тема № 4. Действие физических и химических факторов на микроорганизмы. Стерилизация. Дезинфекция.
5	Тема № 5. Питание бактерий. Питательные среды, Методы культивирования бактерий. Ферменты. Пигменты.
6	Тема № 6. Иммунитет. Естественная резистентность организма человека. Использование реакций иммунитета в фармации.
7	Тема № 7. Нормальная микрофлора тела человека.
8	Тема № 8. Возбудители контактных инфекций.
9	Тема № 9. Возбудители респираторных бактериальных инфекций.
10	Тема № 10. Возбудители кишечных бактериальных инфекций.
11	Тема № 11. Возбудители зоонозных инфекций.
12	Тема № 12. Возбудители заболеваний, передающихся половым путем.
13	Тема № 13. Возбудители грибковых заболеваний и актиномикоза.
14	Тема № 14. Возбудители вирусных инфекций.

Тема № 1. Микроскопический метод исследования

I. Каково место микробов в систематике организмов?

2. В чем состоят особенности микробов как объектов изучения

микробиологии?

3. Каковы задачи медицинской микробиологии?

4. Каково значение микробиологии в деятельности врача-провизора.

5. В чем состоят различия: эукариотов и прокариотов?

6. Какие признаки лежат в основе классификации прокариотов?

7. Назовите основные группы прокариотов.

8. Из чего формируется и как пишется название вида микроорганизма?

9. Какие методы исследования используются в микробиологии?

10.В чем преимущества и недостатки микроскопического метода

исследования?

11. Какие типы микроскопов используют для изучения морфологии микробов?

12.Каковы состав и назначение иммерсионной системы «светового» микроскопа?

13.В каких случаях для световой микроскопии используют объективы х40 и х8?

14. Как определить общее увеличение микроскопа?

15. Какова разрешающая способность современных «световых»

микроскопов с иммерсионной системой?

16. Назовите основные формы бактерий.

17. Как приготовить препарат для микроскопического исследования живых бактерий и бактерий в окрашенном состоянии?

18. Для чего и как проводят фиксацию мазков? Какова техника окраски по Граму?

19. В чем состоит принципиальное различие простых и сложных методов окраски микропрепаратов? Приведите примеры.

20. Почему метод Грама относится к дифференциальным методам окраски? В чем его сущность? Приведите примеры Гр+ и Гр- бактерий.

Тема № 2 Структура бактериальной клетки.

I . Перечислите обязательные структурные элементы

бактериальной клетки.

2. Из каких элементов состоит геном бактерий? Какие из них не относят к постоянным элементам? Что представляет собой хромосома бактерий?

3. Какова биологическая роль цитоплазматической мембраны?

4. Назовите особенности строения клеточной стенки Грам- бактерий.

5. Назовите особенности строения клеточной стенки Грам+ бактерий.

6. Перечислите необязательные структурные элементы бактериальной клетки, какова их биологическая роль?

7. Какими методами можно выявить капсулу?

8. Как происходит спорообразование у бактерий? Перечислите

спорообразующие бактерии.

9. Перечислите бактерии образующие капсулу. Какова роль капсулы для микроба?

10. L-формы бактерий. В каких случаях образуются, свойства?

11. Особенности строения клеточной стенки туберкулезных бактерий.

12. Какова биологическая роль бактериальных рибосом?

13. Какова биологическая роль спор, включений?

14. Какова биологическая роль жгутиков, какую роль выполняют пили?

15. Какие методы позволяют изучить подвижность бактерий? Перечислите подвижные и неподвижные бактерии (по 5 примеров)

16. Какими методами можно выявить нуклеоид, цитоплазматическую мембрану, клеточную стенку?

17. Основные функции клеточной стенки.

18. Сферопласты. Протопласты.

19. Какими методами можно выявить споры?

20. Какими методами можно выявить включения? Примеры бактерий имеющих включения.

Тема № 3 Морфология и физиология грибов, спирохет, простейших, актиномицетов, вирусов.

1. К каким доменам относятся спирохеты, грибы, простейшие, актиномицеты?

2. Какую форму имеют клетки грибов? В чем отличие ложного и истинного мицелия?

3. Перечислите способы размножения грибов. Можно ли считать

образование спор способом размножения грибов? Чем отличаются споры грибов от спор бактерий?

4. В чем проявляются культуральные особенности грибов?

5. Есть ли среди микроскопических грибов полезные для человека грибы? Назовите их?

6. Как классифицируют грибы? Как изучают морфологию грибов?

7. Каково значение грибов для человека?

8.Каково значение актиномицетов для человека? Для фармации?

9. В чем состоят морфологические и физиологические особенности спирохет? Приведите примеры патогенных для человека спирохет. Как их культивируют?

10.Можно ли использовать микроскопический метод для дифференциации спирохет?

11.Простейших относят к прокариотам или эукариотам? С чем это связано?

12.Каковы морфологические особенности простейших? Как осуществляется у простейших движение, питание, дыхание, размножение?

13.Как классифицируют простейших, вызывающих заболевания у человека?

14.Чем вирусы отличаются от бактерий?

15. Какие принципы заложены в основу классификации вирусов?

16. Перечислите ДНК-овые и РНК-овые вирусы. Какие заболевания вызывают эти вирусы?

17.Из чего состоит вирион? Приведите примеры сложных вирусов.

18.Что понимают под дизъюнктивным способом размножения ви­русов. Какие известны способы выхода вирусных частиц из клеток? Примеры.

19. Какие существуют способы культивирования вирусов? Как получают культуры клеток? Примеры культур клеток.

20. Что понимают под внутриклеточными включениями при вирусных инфекциях? Как и для чего их выявляют?

Тема № 4 Действие физических и химических факторов на микроорганизмы. Стерилизация. Дезинфекция.

1. Какие факторы внешней среды могут оказать неблагоприятное воздействие на микробы?

2.Как действует на микробы высушивание? Что такое лиофильное высушивание?

3.Каков механизм губительного действия на микробы лучистой энергии?

4.Можно ли использовать ультразвук для стерилизации воздуха закрытых помещений?

5. Как действует на микробы замораживание, замораживание и оттаивание?

6.Перечислите методы стерилизации. От чего зависит выбор метода?

7.Какие материалы можно стерилизовать дробными методами теплового воздействия? Как этот метод осуществляется?

8.Назовите основные режимы, аппаратуру и стерилизуемые материалы при тепловых методах стерилизации (в качестве примеров материалы, используемые в аптеке – посуда, халаты).

9.Почему при дробных методах стерилизации материал оставляют на сутки не в холодильнике, а в термостате или при комнатной температуре?

10.Как стерилизуют белковые среды? Металлические предметы? Лабораторную посуду? Вспомогательный материал: пробки, прокладки, упаковочный материал?

11. Можно ли отнести пастеризацию и тиндализацию к методам стерилизации? Почему?

12. Какие материалы и как стерилизуют ионизирующим излучением?

13. Перечислите методы дезинфекции. От чего зависит выбор метода?

14. Охарактеризуйте основные группы галоидосодержащих соединений дезинфектантов.

15. В чем состоит отличие дезинфектантов и антисептиков?

16. Назовите основные механизмы действия дезинфектантов.

17. Что понимают под асептикой? В чем состоит сущность асептического приготовления лекарственных препаратов?

18. В чем состоит отличие стерилизации от дезинфекции?

19. Охарактеризуйте основные группы кислородсодержащих дезинфектантов.

20. Охарактеризуйте основные группы альдегидсодержащих дезинфектантов и спиртов.

Тема № 5. Питание бактерий. Питательные среды, Методы культивирования бактерий.

I. Назовите основные механизмы питания бактерий. Как делятся бактерии по типу усвоения углерода? Азота?

2. Какие микроорганизмы относят к сапрофитам? Паразитам?

3. Какие требования предъявляются к питательным средам? Как делятся питательные среды по происхождению и назначению?

4. Какие питательные среды относят к «простым»? Примеры. Чем отличаются специальные и «элективные» питательные среды? Примеры.

5. С какой целью используются дифференциально-диагностические среды? Примеры и принципы их работы.

6. Какие вы знаете ферменты бактерий? Их назначение.

7. Как и для чего изучают ферменты бактерий?

8. Какова роль ферментов при микробном обсеменении растительного лекарственного сырья и готовых лекарственных форм? Приведите примеры.

9. Какие Вы знаете пигменты бактерий? Для чего их изучают? 10. Назовите основные принципы культивирования микроорганизмов. Что такое рост и размножение бактерий? Назовите особенности размножения бактерий.

11. Назовите основные фазы роста микробной культуры. Что такое чистая культура бактерий, штамм, клон?

12. По каким признакам определяют чистоту выросшей культуры бактерий? Что такое колония бактерий?

13. Что понимают под культуральными свойствами бактерий?

14. Как подразделяются бактерии по типу дыхания? Каковы механизмы дыхания бактерий?

15. Как выделяют чистую культуру аэробов? Перечислите этапы исследования по дням.

16. Назовите бактерии, являющиеся по типу дыхания строгими анаэробами. Возбудителями, каких заболевания они являются? Почему облигатные анаэробы погибают в присутствии кислорода?

17. Перечислите методы культивирования строгих анаэробов. В чем состоит сущность биологического метода?

18. Как выделяют чистую культуру анаэробов?

19. В чем состоит отличие выделения чистой культуры аэробов и строгих анаэробов?

20. Какие питательные среды используют для культивирования строгих анаэробов? Использование, каких веществ в составе питательных сред способствует снижению окислительно-восстановительного потенциала среды?

Тема № 6. Иммунитет. Естественная резистентность организма человека. Использование реакций иммунитета в фармации.

1. Что такое иммунитет?

2. Какие Вы знаете виды иммунитета?

3. Дайте краткую характеристику формам приобретенного иммунитета. В чем состоят его отличия от «естественной» резистентности?

4. Какие Вы знаете формы иммунитета?

5. Поясните механизмы видовой невосприимчивости.

6. Какие механизмы лежат в основе естественной резистентности?

7. Перечислите общефизиологические факторы защиты организма.

8. В чем состоит защитное действие лихорадки, воспаления, аутомикрофлоры?

9. Какие факторы «естественной» резистентности относят к клеточным факторам? В чем проявляется их защитная роль?

10. Что такое фагоцитоз? Перечислите клетки-фагоциты.

11. Какие Вы знаете стадии фагоцитоза? Что при этом происходит?

12. Какова роль незавершенного фагоцитоза для организма?

13. Какие факторы стимулируют фагоцитоз? Подавляют его?

14. Перечислите гуморальные факторы «естественной» резистентности.

15. В чем состоит биологическая роль комплемента, лизоцима, интерферонов?

16. В чем состоит сущность иммуноферментного анализа?

17. Какие Вы знаете разновидности ИФА, ингредиенты, учетные признаки? В чем ее преимущества? Практическое использование ИФА в фармации.

18. Какие ингредиенты нужны для постановки ИФА для выявления антигена?

19. Можно ли считать нестерильный иммунитет антиинфекционным?

20. В чем сущность механизмов специфического иммунного ответа?

Тема № 7. Нормальная микрофлора тела человека

1. Что понимают под нормальной микрофлорой тела человека?

2. Когда и откуда получает человек нормальную микрофлору?

3. Где локализуется аутомикрофлора и какова ее численность?

4. Какие органы и ткани в норме стерильны?

5. Дайте характеристику положительной и отрицательной роли нормальной микрофлоры.

6. Могут ли представители аутомикрофлоры быть возбудителями заболеваний у человека? У других людей?

7. Охарактеризуйте количественный и качественный состав микрофлоры полости рта.

8. Каковы особенности состава микрофлоры пищевода, желудка, тонкого и толстого кишечника?

9. Можно ли считать, что E.coli является преобладающим видом в нормальной микрофлоре толстой кишки?

10. Каковы особенности состава микрофлоры конъюнктивы глаза, носа, кожи и мочеполовых путей?

11. Какие факторы и как влияют на состав нормальной микрофлоры?

12. Что такое дисбиоз? Каковы его причины?

13. Можно ли отнести дисбиоз к заразным болезням?

14.Чем может характеризоваться дисбиоз кишечника?

15. Как диагностируют и лечат дисбиоз кишечника? 16.Препараты для коррекции дисбиоза содержит живые или убитые микробы. Как следует хранить эти препараты?

17.Дайте характеристику «Коли-протейного» бактериофага. Как назначают данный препарат для лечения?

18. Дайте характеристику Колибактерина. Бифилиза.

19. Дайте характеристику Лактобактерина. Линекса.

20. Дайте характеристику Бифидумбактерина. Бифидумбактерина - форте.

Тема № 8. Возбудители контактных инфекций.

1.Назовите клинически значимые виды стафилококков. Какова их роль в патологии человека?

2.Перечислите основные свойства стафилококков, используемые при идентификации и оценке вирулентности выделенного штамма.

3.Каково значение бактерионосительства стафилококка у работников аптек. Назовите условия формирования стафилококкового бактерионосительства?

4. Какими свойствами обладает экзотоксин Clostridium tetani?

5.Как классифицируются стрептококки по антигенной структуре? По характеру роста на «кровяном агаре»?

6.Перечислите источники и пути заражения человека стрептококковой инфекцией.

7.Назовите основные группы антимикробных препаратов, используемых при лечении стафилококковой и стрептококковой инфекциях.

8.Что содержат и для чего используются стафилококковый и стрептококковый бактериофаги?

9.С какой целью и как проводится типирование стафилококков?

10.Дайте характеристику и объясните механизм действия стафилококковой вакцины и стафилококкового анатоксина.

11.Почему столбняк и газовую анаэробную инфекцию (гангрену) относят к клостридиальными анаэробными раневыми инфекциями?

12.Почему газовая анаэробная инфекция относится к заболеваниям с полимикробной этиологией?

13.Перечислите общие биологические свойства клостридий столбняка и газовой анаэробной инфекции? Какие методы исследования используют для обнаружения спор клостридий?

14. Что лежит в основе классификации клостридий газовой анаэробной инфекции на серовары?

15. Перечислите свойства токсинов возбудителей газовой анаэробной инфекции. Какие методы исследования используют для определения токсигенности клостридий столбняка и газовой анаэробной инфекции?

16. Перечислите пути инфицирования человека клостридиями. В чем состоит своеобразие патогенеза газовой гангрены, по сравнению с патогенезом столбняка?

17. Какие признаки заболевания у человека, которое вызвано токсинами Clostridium tetani?

18. В чем состоит особенность проведения экстренной профилактики при клостридиальных анаэробных инфекциях, кому и в каких случаях проводят?

19. Какие иммунобиологические препараты используют для создания активного иммунитета при столбняке

20. Назовите основные принципы лечения газовой анаэробной инфекции. В чем состоит отличие поливалентной и моновалентных противогангренозных сывороток.

Тема № 9. Возбудители респираторных бактериальных инфекций.