Валидационная оценка методики анализа кислоты борной алкалиметрическим методом

Построение градуировочного графика

Точную навеску кислоты борной (около 2,0г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

На титрование отмеривают последовательно 0,5 мл; 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл раствора А (0,01г; 0,02г; 0,03г; 0,04г; 0,05г.), добавляют 2 мл свежепрокипячённой и охлаждённой воды, 10 мл глицерина, нейтрализованного по фенолфталеину. Титруют 0,1М раствором натрия гидроксида до розового окрашивания.

1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида соответствует 6,183 мг (0,006183 г )кислоты борной.

Строят градуировочный график зависимости объема титранта от содержания кислоты борной, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу 68.

Таблица 68. Результаты титрования кислоты борной.

Объем раствора А (мл)	0,5	1	1,5	2	2,5
Содержание кислоты борной в г в навеске	0,01	0,02	0,03	0,04	0,05
Объем 0,1М р-ра натрия гидроксида, мл

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Готовят 3 раствора модельных смесей №1, №2, №3 .

Проводят по 3 параллельных титрования на трех уровнях концентраций (9 определений), по методике количественного определения, отмеривая по 2 мл каждой из модельных смесей А_1,, А₂, А₃ .

Расчет содержания борной кислоты в % проводят по формуле:

где: V- объем титранта (мл);

К- поправочный коэффициент его;

Т- титр титранта по определяемому веществу;

Р- общий объём лекарственного средства, мл;

а- навеска для анализа, мл;

С –содержание кислоты борной в модельной смеси (1,0; 2,0 или 3,0 г).

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор фурацилина с борной кислотой №2.

Определение №1.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1 мл ЛП.

Определение №2.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 2 мл ЛП.

Определение №3.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 3 мл ЛП.

Расчет содержания натрия хлорида (г) проводят по формуле:

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

7.19. Фурацилина 0,02 Раствора натрия хлорида 0,9% – 100,0 валидационная оценка методики анализа фурацилина спектрофотометрическим методом

Изучить УФ-спектр папаверина гидрохлорида

Точную навеску фурацилина (около 0,02 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 50 мл воды при нагревании на водяной бане, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата (раствор А).

В мерные колбы вместимостью 100 мл последовательно вносят 2,0 мл раствора А и доводят водой до метки (0,0004% раствор) и изучали спектр поглощения на участке 250 – 400 нм. Максимум должен находиться при длине волны 375 нм.

ЛИНЕЙНОСТЬ

Построение градуировочного графика

Точную навеску фурацилина (около 0,02 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют при нагревании на водяной бане, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают (раствор А).

В мерные колбы вместимостью 100 мл последовательно вносят 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл; 3,0 мл раствора А и доводят водой до метки (получают 0,0002%; 0,0003%; 0,0004%; 0,0005% и 0,0006% растворы).

Измеряют оптическую плотность каждого раствора на спектрофотометре при длине волны 375 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – вода очищенная.

Строят градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу 69.

Таблица 69. Результаты измерения оптической плотности

V 0,02% р-ра А (мл)	1,0	1,5	2,0	2,5	3,0
Конц. р-ра в %	0,0002	0,0003	0,0004	0,0005	0,0006
Оптическая плотность А

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных раствора ЛП:

Таблица 70. Приготовление модельных смесей фурацилина с натрия хлоридом

Модельная смесь	1	2	3
Навеска фурацилина (г)	0,01	0,02	0,03
Навеска натрия хлорида (г)	0,45	0,9	1,35
Воды очищенной (мл),	100	100	100

Раствор А₁. Точные навески фурацилина (около 0,01 г) и натрия хлорида (около 0,45 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 30 мл воды при нагревании, после охлаждения доводят водой до метки.

Раствор А₂. Точные навески фурацилина (около 0,02 г) и натрия хлорида (около 0,9 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 30 мл воды при нагревании, после охлаждения доводят водой до метки.

Раствор А₃. Точные навески фурацилина (около 0,03 г) и натрия хлорида (около 1,35 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 30 мл воды при нагревании, после охлаждения доводят водой до метки.

Растворы Б₁, Б₂, Б₃. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл раствора А₁ и доводят водой до метки.

Растворы Б₄, Б₅, Б₆. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл раствора А₂ и доводят водой до метки.

Растворы Б₇, Б₈, Б₉. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл раствора А₃ и доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 375 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность СО 0,0004% раствора фурацилина.

Расчет содержания фурацилина в процентах (открываемость) проводят по формуле:

(1) ,

где: А_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

А_о – оптическая плотность раствора СО фурацилина;

а_х – масса навески исследуемого образца фурацилина (0,01; 0,02 или 0,03 г);

0,000004 – содержание фурацилина в г в 1 мл раствора СО, г.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор ЛП №2 (табл.2).

Готовят параллельно по три раствора.

Растворы А₁, А₂, А₃. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 0,5 мл модельной смеси № 2 и доводят водой до метки.

Растворы А₄, А₅, А₆. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл модельной смеси № 2 и доводят водой до метки.

Растворы А₇, А₈, А₉. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,5 мл модельной смеси № 2 и доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов Б на спектрофотометре при длине волны 375 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО фурацилина.

Расчет содержания фурацилина в г проводят по формуле:

(2) ,

где: А_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

А_о – оптическая плотность раствора СО фурацилина;

0,000004 – содержание фурацилина в г в 1 мл раствора СО.

Р – общая масса лекарственного средства (100,0);

а_x – навеска лекарственной формы, взятая для анализа.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).