Валидационная оценка методики анализа калия йодида аргентометрическим методом

МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

К 1мл раствора ЛС добавляют 1мл воды, 0,5мл кислоты уксусной разведенной и 2 капли 0,1% раствора натрия эозината. Титруют 0,1М раствором нитрата серебра до ярко-розового окрашивания осадка.

Написать уравнения химических реакций.

1 мл 0,1 М раствора нитрата серебра соответствует 0,0166 г калия йодида.

Рассчитать теоретический объем 0,1М раствора нитрата серебра.

ЛИНЕЙНОСТЬ

Построение градуировочного графика

Точную навеску калия йодида (около 3,0г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

На титрование отмеривают последовательно 0,5 мл; 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл раствора А (0,015г; 0,03г; 0,045г; 0,06г; 0,075г.) и проводят определение по методике описанной для количественного определения.

Строят градуировочный график зависимости концентраций от объема титранта, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу 56.

Таблица 56. Результаты титрования.

V р-ра А (мл)	0,5	1,0	1,5	2,0	2,5
Конц. р-ра в г/ в навеске	0,015	0,030	0,045	0,060	0,075
V 0,1М р-ра нитрата серебра

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных раствора рибофлавина с калия йодидом.

Проводят 3 параллельных титрования на трех уровнях концентраций (9 определений), по методике количественного определения, отмеривая по 3 мл каждой из модельных смесей (А₁.(модельная смесь 1)_, А₂.(модельная смесь 2)_, А₃ .(модельная смесь 3)).

Расчет содержания калия йодида (г) проводят по формуле:

где: V- объем титранта (мл);

К- поправочный коэффициент;

Т- титр по определяемому веществу;

Р- общий объём ЛП;

а- навеска (мл).

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор рибофлавина с калия йодидом №2.

Определение №1.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1 мл ЛП.

Определение №2.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 2 мл ЛП.

Определение №3.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 3 мл ЛП.

Расчет содержания калия йодида (г) проводят по формуле приведенной при определении правильности.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

7.15. Рибофлавина 0,002

Раствора кислоты борной 2% 10,0

.ВАЛИДАЦИОННАЯ ОЦЕНКА МЕТОДИКИ АНАЛИЗА РИБОФЛАВИНА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

ЛИНЕЙНОСТЬ

Для установления максимума светопоглощения раствора рибофлавина снимают спектр поглощения 0,001% раствора СО в воде очищенной. Приготовление раствора описано ниже при построении градуировочного графика. Установлено, что максимум находится при длине волны 445 нм, при этом оптическая плотность А_ст=0,486.

Построение градуировочного графика

Точную навеску рибофлавина (около 0,05г) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

В мерные колбы вместимостью 100 мл последовательно вносят 1,0 мл; 3,0 мл; 5,0 мл; 7,0 мл; 9,0 мл раствора А и доводят водой до метки (получают 0,0002%; 0 0006%; 0,0010%; 0,0014% и 0,0018% растворы).

Измеряют оптическую плотность каждого раствора на спектрофотометре при длине волны 445 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – вода очищенная.

Строят градуировочный график зависимости концентрации от оптической плотности , рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу.

Таблица 57. Результаты измерения оптической плотности.

V 0,02% р-ра (мл)	1	3	5	7	9
Конц. р-ра в %	0,0002	0,0006	0,0010	0,0014	0,0018
Оптическая плотность А

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных раствора рибофлавина с борной кислотой.

Таблица 58. Приготовление модельных смесей рибофлавина с борной кислотой.

Модельная смесь	1	2	3
Навеска рибофлавина (г)	0,03	0,05	0,07
Навеска борной килоты (г)	3,0	5,0	7,0
Воды очищенной	до 250 мл	до 250 мл	до 250 мл

Раствор А₁. (модельная смесь 1) Точные навески рибофлавина (около 0,03 г) и борной кислоты(около 3,0 г) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Раствор А₂. (модельная смесь 2) Точные навески рибофлавина (около 0,05 г) и борной кислоты(около 5,0 г) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Раствор А₃. (модельная смесь 3) Точные навески рибофлавина (около 0,07 г) и натрия хлорида (около 7,0 г) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане и доводят водой до метки.

Растворы Б₁, Б₂, Б₃. В три мерные колбы вместимостью 100 мл переносят по 5,0 мл А₁ и доводят водой до метки.

Растворы Б₄, Б₅, Б₆. В три мерные колбы вместимостью 100 мл переносят по 5,0 мл А₂ и доводят водой до метки.

Растворы Б₇, Б₈, Б₉. В три мерные колбы вместимостью100 мл переносят по 5,0 мл А₃ и доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 445 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность СО 0,002% раствора рибофлавина.

Приготовление раствора СО рибофлавина.

Точную навеску рибофлавина (около 0,05г) помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл, растворяют в воде при нагревании на водяной бане, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 50 мл вносят 5,0 мл раствора А и доводят водой до метки (раствор Б).

1 мл раствора Б содержит 0,00002 г СО рибофлавина.

Расчет содержания рибофлавина в процентах (открываемость) проводят по формуле:

(1) ,

где: А_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

А_о – оптическая плотность раствора СО рибофлавина;

а_х – масса навеска исследуемого образца рибофлавина;

0,00002 – содержание рибофлавина в г в 1 мл раствора СО.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить раствор модельной смеси рибофлавина №2 (табл.2).

Готовят параллельно по три раствора.

Растворы А₁, А₂, А₃. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 3,0 мл раствора модельной смеси 2 и доводят водой до метки.

Растворы А₄, А₅, А₆. В другие три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 5,0 мл раствора модельной смеси 2 и доводят водой до метки.

Растворы А₇, А₈, А₉. В следующие три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 7,0 мл раствора модельной смеси 2 и доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 445 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО рибофлавина.Расчет содержания рибофлавина в г/мл проводят по формуле:

(2) ,

где: А_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

А_о – оптическая плотность раствора СО рибофлавина;

0,00002 – содержание рибофлавина в г в 1 мл раствора СО.

V_a – объем аликвоты раствора модельной смеси 2, взятый для разведения, мл.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).