Валидационная оценка методики анализа новокаина гидрохлорида нитритометрическим методом

МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

К 10 мл 0,5 % раствора ЛС добавляют 5 мл воды и 5 мл кислоты хлористоводородной разведенной, прибавляют воду до общего объема 30 мл, 0,5 г калия бромида. Раствор охлаждают до 0-5°С и при постоянном перемешивании титруют 0,05 М раствором натрия нитрита до перехода от красно-фиолетовой окраски к голубой. Индикатор 4 капли раствора тропеолина 00 и 2 капли раствора метиленового синего.

В начале титрования прибавляют 0,05 М раствор натрия нитрита со скоростью 1 мл в минуту, а в конце титрования за 0,5 мл до эквивалентного количества) – по 0,05 мл в минуту.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 13,64 мг (0,01364 г) новокаина гидрохлорида.

ЛИНЕЙНОСТЬ

Построение градуировочного графика

Точную навеску новокаина (около 0,5 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

На титрование отмеривают последовательно 5 мл; 10мл; 15 мл; 20 мл; 25 мл раствора А (0,025 г; 0,05 г; 0,075 г; 0,100 г; 0,125 г), добавляют 5 мл кислоты хлористоводородной разведенной, прибавляют воду до общего объема 30 мл, 0,5 г калия бромида. Раство охлаждают до 0-5°С и при постоянном перемешивании титруют 0,05 М раствором натрия нитрита до перехода от красно-фиолетовой окраски к голубой. Индикатор 4 капли раствора тропеолина 00 и 2 капли раствора метиленового синего.

В начале титрования прибавляют 0,05 М раствор натрия нитрита со скоростью 1 мл в минуту, а в конце титрования за 0,5 мл до эквивалентного количества) – по 0,05 мл в минуту.

Строят градуировочный график зависимости концентраций от объема титранта, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу 40.

Таблица 40. Результаты титриметрического определения новокаина гидрохлорида нитритометрическим методом

V 0,5% р-ра А (мл)	5	10	15	20	25
Взято новокаииа г/хл,г	0,025	0,050	0,075	0,100	0,125
V 0,05 М р-ра натрия нитрита,мл

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных раствора новокаина гидрохлорида

Таблица 41. Приготовление модельных смесей раствора новокаина гидрохлорида

Модельная смесь	1	2	3
Навеска новокаина гидрохлорида (г)	0,25	0,50	0,75
Раствора кислоты хлороводородной 0,1 моль/л	До рН 3,8 – 4,5	До рН 3,8 – 4,5	До рН 3,8 – 4,5
Воды для инъекций	До 100 мл	До 100 мл	До 100 мл

Раствор А₁. Точную навеску новокаина гидрохлорида (около 0,25 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют воды для инъекций 50 мл, раствор кислоты хлороводородной 0,1 моль/л до рН 3,8 – 4,5 и доводят объем раствора до метки водой для инъекций.

Раствор А₂. Точную навеску новокаина гидрохлорида (около 0,5 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют воды для инъекций 50 мл, раствор кислоты хлороводородной 0,1 моль/л до рН 3,8 – 4,5 и доводят объем раствора до метки водой для инъекций.

Раствор А₃. Точную навеску новокаина гидрохлорида (около 0,75 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют воды для инъекций 50 мл, раствор кислоты хлороводородной 0,1 моль/л до рН 3,8 – 4,5 и доводят объем раствора до метки водой для инъекций.

Проводят 3 параллельных титрования на трех уровнях концентраций (9 определений), по методике количественного определения, отмеривая по 10 мл каждого из модельных растворов (А_{1 ,} А_2, А₃).

Расчет содержания новокаина гидрохлорида в % (открываемость) проводят по формуле:

где: V– объем титранта, мл;

К– поправочный коэффициент;

Т– титр 0,05 М раствора натрия нитрита по определяемому веществу, мг/мл;

а – навеска раствора А, взятая на анализ, мл (10 мл);

С – содержание новокаина гидрохлорида в исходном растворе (0,25; 0,5; 0,75 г).

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор новокаина гидрохлорида №2.

Определение №1.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 5 мл ЛП.

Определение №2.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 10 мл ЛП.

Определение №3.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 15 мл ЛП.

Расчет содержания новокаина гидрохлорида (г/мл) проводят по формуле:

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).