Валидационная оценка методики анализа натрия хлорида аргентометрическим методом

МЕТОДИКА КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ

К 2 мл раствора ЛС добавляют 5 мл воды и 2 капли индикатора калия хромата. Титруют 0,1М раствором нитрата серебра до оранжево - желтого окрашивания.

Написать уравнения химических реакций.

Рассчитать титр по определяемому веществу и теоретический объем 0,1М раствора нитрата серебра.

1 мл 0,1 М раствора серебра нитрата соответствует 5,844 мг (0,005844 г) натрия хлорида.

ЛИНЕЙНОСТЬ

Построение градуировочного графика

Точную навеску натрия хлорида (около 0,9г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

На титрование отмеривают последовательно 1,0 мл; 2,0 мл; 3,0 мл; 4,0 мл; 5,0 мл раствора А (0,009г; 0,018г; 0,027г; 0,036г; 0,045г.) и проводят определение по методике описанной для количественного определения.

Строят градуировочный график зависимости концентраций от объема титранта, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу.

Таблица 37. Результаты измерения оптической плотности.

V 0,9% р-ра А (мл)	1	2	3	4	5
Взято в-ва в г	0,009	0,018	0,027	0,036	0,045
V 0,1М р-ра нитрата серебра(мл)

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных раствора левомицетина с натрия хлоридом( раствор А₁, раствор А₂, раствор А₃).

Проводят 3 параллельных титрования на трех уровнях концентраций (9 определений), по методике количественного определения, отмеривая по 3 мл каждой из модельных смесей (А_1, А_2, А₃ ).Расчет содержания натрия хлорида (г) проводят по формуле:

где: V- объем титранта (мл);

К- поправочный коэффициент;

Т- титр по определяемому веществу;

Р- общий объём ЛП;

а- навеска (мл).

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор левомицетина с натрия хлоридом №2.

Определение №1.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 2 мл ЛП.

Определение №2.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 3 мл ЛП.

Определение №3.

Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 4 мл ЛП.

Расчет содержания натрия хлорида (г) проводят по формуле приведенной при определении правильности.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

7.9. Раствор новокаина гидрохлорида

для инъекций 0,5%

ВАЛИДАЦИОННАЯ ОЦЕНКА

МЕТОДИКИ АНАЛИЗА НОВОКАИНА ГИДРОХЛОРИДА СПЕКТРОФОТОМЕТРИЧЕСКИМ МЕТОДОМ

Изучить УФ-спектр новокаина гидрохлорида

Точную навеску СО новокаина гидрохлорида (около 0,1 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).

В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят 1,0 мл; раствора А и доводят водой до метки (0,001%).

УФ-спектр 0,001% раствора новокаина гидрохлорида в области

220 – 320 нм должен иметь максимум поглощения при длине волны 288±2 нм.

ЛИНЕЙНОСТЬ

Построение градуировочного графика

Точную навеску новокаина (около 0,05 г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают (раствор А).

В мерные колбы вместимостью 100 мл последовательно вносят 1,0 мл; 1,5 мл; 2,0 мл; 2,5 мл; 3,0 мл раствора А и доводят водой до метки (получают 0,00050%; 0, 00075%; 0,00100%; 0,00125% и 0,00150% растворы).

Измеряют оптическую плотность каждого раствора на спектрофотометре при длине волны 288 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – вода очищенная.

Строят градуировочный график зависимости концентрации от оптической плотности, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции.

Данные заносят в таблицу.

Таблица 38. Результаты измерения оптической плотности.

V 0,05% р-ра (мл)	0,5	0,75	1,00	1,25	1,50
концентрация новокаина г/х в %	0,00050	0,00075	0,00100	0,00125	0,00150
оптическая плотность А

ПРАВИЛЬНОСТЬ

Приготовить три модельных раствора новокаина гидрохлорида .

Таблица 39. Приготовление модельных смесей раствора новокаина гидрохлорида

Модельная смесь	1 (А1)	2 (А2)	3 (А3)
Навеска новокаина гидрохлорида (г)	0,025	0,05	0,075
Раствора кислоты хлороводородной 0,1 моль/л	До рН 3,8 – 4,5	До рН 3,8 – 4,5	До рН 3,8 – 4,5
Воды для инъекций	До 10,0 мл	До 10,0 мл	До 10,0 мл

Раствор А₁. Точную навеску новокаина гидрохлорида (около 0,025 г) помещают в мерную колбу вместимостью 10,0 мл, добавляют воды для инъекций 5 мл, раствор кислоты хлороводородной 0,1 моль/л до рН 3,8 – 4,5 и доводят объем раствора до метки водой для инъекций.

Раствор А₂. Точную навеску новокаина гидрохлорида (около 0,05 г) помещают в мерную колбу вместимостью 10,0 мл, добавляют воды для инъекций 5 мл, раствор кислоты хлороводородной 0,1 моль/л до рН 3,8 – 4,5 и доводят объем раствора до метки водой для инъекций.

Раствор А₃. Точную навеску новокаина гидрохлорида (около 0,075 г) помещают в мерную колбу вместимостью 10,0 мл, добавляют воды для инъекций 5 мл, раствор кислоты хлороводородной 0,1 моль/л до рН 3,8 – 4,5 и доводят объем раствора до метки водой для инъекций.

Раствор Б₁. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 1,0 мл раствора А₁ и доводят водой до метки (0,025% раствор).

Раствор Б₂. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 1,0 мл раствора А₂ и доводят водой до метки (0,05% раствор).

Раствор Б₃. В мерную колбу вместимостью 10 мл переносят 1,0 мл раствора А₃ и доводят водой до метки (0,075% раствор).

Растворы В₁, В₂, В₃. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл раствора А₁ и доводят водой до метки.

Растворы В₄, В₅, В₆. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл раствора А₂ и доводят водой до метки.

Растворы В₇, В₈, В₉. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1,0 мл раствора А₃ и доводят водой до метки.

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 288 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность 0,001% раствора СО новокаина гидрохлорида.

Расчет содержания новокаина в процентах (открываемость) проводят по формуле:

(1) ,

где: А_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

А_о – оптическая плотность раствора СО новокаина;

С – масса навески исследуемого образца новокаина (0,025; 0,05; 0,075 г);

0,00001 – содержание новокаина в г в 1 мл раствора СО.

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).

ПРЕЦИЗИОННОСТЬ

Приготовить модельный раствор новокаина гидрохлорида №2 (А₂).

Готовят раствор Б₂.

Раствор Б₂. В мерную колбу вместимостью 25 мл переносят 2,5 мл раствора А₂ и доводят водой до метки (0,05% раствор).

Готовят параллельно три раствора.

Растворы В₁, В₂, В₃. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 0,5 мл раствора Б₂, доводят водой до метки, перемешивают.

Растворы В₄, В₅, В₆. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 1,0 мл раствора Б₂, доводят водой до метки, перемешивают.

Растворы В₇, В₈, В₉. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 1,5 мл раствора Б₂, доводят водой до метки, перемешивают.

Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов Б на спектрофотометре при длине волны 288 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.

Параллельно измеряют оптическую плотность 0,001% раствора СО новокаина гидрохлорида.

Расчет содержания новокаина гидрохлорида в г/мл проводят по формуле:

(2) ,

где: А_х – оптическая плотность исследуемого раствора;

А_о – оптическая плотность раствора СО новокаина;

0,00001 – содержание новокаина гидрохлорида в г в 1 мл раствора СО.

V – объем раствора Б₂, взятый для приготовления растворов В (0,5; 1,0 или 1,5 мл).

Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).