Прецизионность
Приготовить модельный раствор кислоты аскорбиновой №2.
Определение №1.
Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 0,5 мл ЛП.
Определение №2.
Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1,0 мл ЛП.
Определение №3.
Проводят 3 параллельных титрования, отмеривая каждый раз по 1,5 мл ЛП.
Расчет содержания натрия хлорида (г) проводят по формуле приведенной при определении правильности.
Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).
7.4.Таблетки кислоты ацетилсалициловой 0,5 валидационная оценка методик анализа кислоты ацетилсалициловой спектрофотометрическим методом
Приготовить модельную смесь:
Кислоты ацетилсалициловой 0,5
Наполнителей (натрия хлорида) 0,1
Изучить УФ-спектр кислоты ацетилсалициловой (КАС). Точную навеску (около 0,05 г) стандартного образца (СО) КАС помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, добавляют 50 мл 0,1 М раствора кислоты серной, нагревают на водяной бане в течение 15 минут, охлаждают и доводят до метки тем же растворителем (раствор А). Раствор перемешивают.
2 мл раствора А переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят растворителем до метки, перемешивают (раствор Б) и изучают спектр поглощения, который в области 220-350 нм должен иметь максимумы при 228 и 276 нм.
ЛИНЕЙНОСТЬ
Построение градуировочного графика
В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят точную навеску (около 0,050 г) СО кислоты ацетилсалициловой, добавляют 50 мл 0,1 М раствора кислоты серной и нагревают на водяной бане, охлаждают и доводят до метки растворителем (раствор А). Раствор перемешивают.
В мерную колбу вместимостью 100 мл вносят последовательно 1,0; 2,0; 3,0; 4,0; 5,0 мл раствора А и доводят 0,1 М раствором кислоты серной до метки. Получают растворы КАС с концентрацией 0,0005%, 0,001%, 0,0015%; 0,002%, 0,0025%. Измеряют оптическую плотность каждого раствора на спектрофотометре при длине волны 228 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. Раствор сравнения – 0,1 М раствор кислоты серной.
Строят градуировочный график зависимости оптической плотности от концентрации, рассчитывают уравнение градуировочного графика и коэффициент корреляции. Данные заносят в таблицу 20.
Таблица 20 – Зависимость оптической плотности от концентрации.
Объем раствора А, мл |
1,0 |
2,0 |
3,0 |
4,0 |
5,0 |
Концентрация полученного раствора, % |
0,0005 |
0,001 |
0,0015 |
0,002 |
0,0025 |
Оптическая плотность |
|
|
|
|
|
ПРАВИЛЬНОСТЬ
Таблица 21. Приготовить три раствора модельной смеси.
Модельная смесь |
№ 1 (А1) |
№ 2 (А2) |
№ 3 (А3) |
КАС, г |
0,04 |
0,05 |
0,06 |
Наполнителя (натрия хлорида), г |
0,008 |
0,010 |
0,012 |
Общая масса, г |
0,048 |
0,060 |
0,072 |
Объем мерной колбы, мл |
100 |
100 |
100 |
Раствор А1. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,04 г КАС и 0,008 г натрия хлорида, растворяют в 0,1 М растворе кислоты серной при нагревании на водяной бане, охлаждают и доводят водой до метки. Раствор перемешивают.
Раствор А2. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,05 г КАС и 0,01 г натрия хлорида, растворяют в 0,1 М растворе кислоты серной при нагревании на водяной бане, охлаждают и доводят водой до метки. Раствор перемешивают.
Раствор А3. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,06 г КАС и 0,012 г натрия хлорида, растворяют в 0,1 М растворе кислоты серной при нагревании на водяной бане, охлаждают и доводят водой до метки. Раствор перемешивают.
Растворы Б1, Б2, Б3. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1 мл раствора А1 и доводят тем же растворителем до метки.
Растворы Б4, Б5, Б6. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1 мл раствора А2 и доводят тем же растворителем до метки.
Растворы Б7, Б8, Б9. В три мерные колбы вместимостью 50 мл переносят по 1 мл раствора А3 и доводят тем же растворителем до метки.
Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 228 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО КАС.
Приготовление раствора СО кислоты ацетилсалициловой.
Точную навеску СО КАС (около 0,0500г) помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 0,1 М растворе кислоты серной при нагревании на водяной бане, охлаждаю, доводят водой до метки и перемешивают (раствор А).
В мерную колбу вместимостью 50 мл вносят 1,0 мл раствора А и доводят до метки 0,1 М раствором кислоты серной (раствор Б).
1 мл раствора Б содержит 0,00001 г СО КАС.
Расчет содержания КАС в процентах (открываемость R) проводят по формуле:
(1) ,
где: Ах – оптическая плотность исследуемого раствора;
Ао – оптическая плотность раствора СО КАС;
ах – масса навески модельной смеси (0,048 или 0,06 или 0,072 г);
0,00001 – содержание КАС в г в 1 мл раствора СО;
Р – средняя масса 1 таблетки (0,6 г);
С – теоретическое содержание КАС в одной таблетке (0,5 г).
Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).
ПРЕЦИЗИОННОСТЬ
Приготовить раствор А2 модельной смеси.
Растворы Б1, Б2, Б3. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 0,5 мл раствора А2 и доводят 0,1 М раствором кислоты серной до метки.
Растворы Б4, Б5, Б6. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 1,0 мл раствора А2 и доводят 0,1 М раствором кислоты серной до метки.
Растворы Б7, Б8, Б9. В три мерные колбы вместимостью 50 мл помещают по 1,5 мл раствора А2 и доводят 0,1 М раствором кислоты серной до метки.
Измеряют оптическую плотность каждого из 9 приготовленных растворов на спектрофотометре при длине волны 228 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО КАС.
Приготовление раствора СО кислоты ацетилсалициловой (см. выше).
Расчет содержания КАС в граммах в одной таблетке проводят по формуле:
(1) ,
где: Ах – оптическая плотность исследуемого раствора;
Ао – оптическая плотность раствора СО КАС;
ах – масса навески модельной смеси (0,048 или 0,06 или 0,072 г);
0,00001 – содержание КАС в г в 1 мл раствора СО;
Р – средняя масса 1 таблетки (0,6 г);
Va – объем аликвоты раствора Б, взятый для разведения (0,5 или 1,0 или 1,5) мл.
Результаты заносят в таблицу №___ и рассчитывают стандартное отклонение (SD) и относительное стандартное отклонение (RSD).