§1.1.2. Материал для исследования. Отбор материала и транспорта проб

При бактериологическом исследовании отбор материала и транспортировка проб являются ответственным этапом работы, в известной мере предопределяющим ее результаты. Успех исследований по выделению тех или иных энтеробактерий из различных клинических материалов обеспечивается за стенами лаборатории. Естественно, что эффективность деятельности бактериологической лаборатории зависит от многих факторов, но все последующие усилия могут оказаться бесплодными, если на первом этапе допущены ошибки. Какой материал, в какие сроки, как брать - эти вопросы решают лечащие врачи или врачи-эпидемиологи. Во взаимопонимании и контакте этих специалистов с бактериологами, в знании патогенеза заболеваний, в неформальной подготовке среднего медицинского персонала, контроле за его деятельностью - залог правильных решений и действий по отбору и доставке материалов для исследования. В каждом конкретном случае необходимо учитывать клинические проявления заболевания, его сроки, анамнестические данные, конкретную эпидемиологическую ситуацию, предполагаемый диагноз, преимущественную локализацию возбудителя на разных этапах патогенеза и показания к обследованию. Так при заболевании брюшным тифом и паратифами А и В важнейшим ранним методом лабораторной диагностики является метод гемокультур, а исследование испаржнений в эти же сроки является неоправданным. В тоже время при других сальмонеллезных инфекциях, дизентерии, прочих кишечных инфекциях метод конрокультур (исследование испражнений) наиболее эффективен с первых часов заболевания, а исследование крови на гемокультуру является малопродуктивным. Исходя из этого, материалом для бактериологических исследований могут служить испражнения, рвотные массы, промывные воды желудка, кровь, моча, слизь из зева и носа, мокрота, желчь (дуоденальное содержимое), пунктат костного мозга, гной, экссудат, спиномозговая жидкость, раневое отделение, женское грудное молоко, содержимое червеобразного отростка, желсного и мочевого пузыря при оперативных вмешательствах. При аутопсии исследованию подвергают кровь из сердца и синуса твердой мозговой оболочки, кусочки органов и д.р. Ориентировачные рекомендации, касающиеся количества отбираемого материала, следует уточнять, корригировать с учетом выраженности клинической картины, дня заболевания и т.п.; так, например, объем крови для посева на гемокультуру увеличивают от 5-10 до 20 мл при стертой картине заболевания и в более поздние сроки. Эффективность и достоверность результатов исследования секционного материала тем выше, чем скорее после наступления смерти возможно получить материал для исследования.

Материалы, подлежащие бактреиологическому исследованию, собирают в стерильную посуду (банки, пробирки, флаконы), которую хорошо укупоривают, снабжают этикеткой с фамилией обследуемого и наменованием материала; надписи следует делать шариковой ручкой или карандашом, но не химическими чернилами (во избежание размывания). Каждый образец материала помещают в отдельную емкость. В сопроводительном документе (направлении) необходимо указывать, какое учреждение направляет материал, фамилию, имя, отчество и возраст обследуемого, место работы; для детей - название детского учреждения, школу, дату заболевания, предполагаемый диагноз или показания к обследованию, дату и час взятия пробы материала, фамилию и должность лица, направляющего материал.

Испражнения. Оптимальным с т очки зрения возможности выделения возбудителя является получение испражнений сразу после дефекации. Сбор их осуществляется из судна, горшка, пеленки, специальных лотков или другой посуды, тщательно дезинфицированной осветвленным раствором хлорной извести и многократно отмытой горячей водой для полного удаления следов дезинфектанта. При наличии патологических примесей (гной, слизь, хлопья) их обязательно включают в отбираемую пробу. При невозможности получения испражнений после дефекации материал собирают непосредственно из прямой кишки с помощью ректальных ватных или ватно-марлевых тампонов (укрепленных на деревянной палочке или проволочной петле). Ректальный тампон вводят в прямую кишку на 8-10 см. При обследовании на носительство сальмонелл взятие материала ректальными тампонами малоэффективно, в связи с чем у здоровых людей при отсутствии противопоказаний, выявленных лечащим врачом, целесообразно брать испражнения после дефекации, вызванной приемом солевого слабительного. Испражнения собирают указанным выше образом из суден, горшков и др. или ректальным тампоном из прямой кишки, но после дефекации. Весьма желательно посев испражнений осуществлять непосредственно после их сбора или в пределах двухчасового периода; если это ен удается, необходимо законсервировать материал, т.е. обеспечить стабилизацию количественных соотношений в микробной ассоциации с тем, что бы преобладающая сопутствующая флора при размножении не привела к отмиранию искомых возбудителей. Консервирование исследуемого материала может быть обеспечено воздействием физических (сохранением при температуре 2-6 С или высушиванием) и химических факторов. Наиболее широко в качестве химического консерванта используют глицериновую смесь.

Кровь. Метод получения гемокультуры является убедительным при диагностике брюшного тифа и паратифов, но он может применяться и при лихорадочных состояниях неустановленной этиологии, связанных иногда с энтеробактериями. Наилучшие результаты дает посев крови, взятой в самом начали заболевания, даже в первые его часы. Кровь берут стерильным щприцем в количестве от 10 до 15-20 мл (в зависимости от сроков заболевания и выраженности клинических проявлений) и тут же у постели больного с соблюдением правил асептики вносят во флаконы с десятикратнопревышающим объемом жидкой накопительной среды (среда Рапорт, 10-20% желчный бульон) или стерильной дистилированной ( по Клодницкому), или водопроводной (по Самсонову) воды. В отдельных случаях для посева на гемокультуру берут сгустки крови, направляемой для серологических исследований. Все манипуляции при этом проводят строго аспетически, после обведения сгустка и отсасывании сывороткои сгусток растирают в пробирке стеклянной палочкой и вносят в среду обогащения также в соотношении 1 : 10.

Рвотные массы и промывные воды желудка исследуют при острых кишечных заболеваниях, сопровождающихся соответствующей симптоматикой. Для бактериологического исследования используют первые порции промывных вод без добавления перманганата калия(KMnO₄) или других дезинфицирующих средств. Материал (50-100 мл) доставляют в лабораторию в стерильных банках с соблюдением упомянутых выше требований.

Спинномозговая жидкость подлежит исследованию при заболеваниях, сопровождающихся менингеальным, менингоэнцефалитическим синдромом. Спинномозговую жидкость получают при люмбальной пункции в лечебном учреждении, соблюдая при этом строжайшим образом принципы асептики. Пробу (3-5 мл) вносят в стерильную пробирку и после соответствующего оформления направляют в лабораторию. Во время транспортировки жидкость следует предохранять от охлаждения. С этой целью пробирка с материалом может быть помещена в термос.

Женское грудное молоко исследуют у больных женщин, находящихся в периоде лактации. После обмывания соска и области кожи вокруг него мыльной водой, обработки спиртом и обмывания стерильным изотоническим раствором натрия хлорида сцеживают несколько капель молока, а последующие 5-10 мл собирают в стерильную посуду, пробу оформляют обычным порядком и направляют в лабораторию.

Слизь из зева и носа, отделяемое цервикального канала матки забирают стерильными ватными или марлевыми тампонами и либо непосредственно засевают в соответствующие питательные среды, либо направляют в лабораторию в стерильных пробирках.

Мокроту собирают натощак. После того как пациент почистит зубы и ополоснет рот, его просят энергично отхаркнуть мокроту в стерильную посуду; при наличие комочков гноя их обязательно включают в пробу, направление в лабораторию осуществляют по общим правилам.