- •1.Роль биохимических методов в современной лабораторной диагностике
- •2.Ученые в описании методов биохимической диагностики
- •3.Колориметрические методы в определении бжу
- •4.Спектрофотометрические методы в определении бжу
- •5.Газохроматографический метод в определении бжу
- •6.Титрометрические методы в определении бжу
- •7.Поляриметрический метод в определении методы в определении бжу
- •8.Редуктометрический метод в определении бжу
- •9.Цитохимические методы в определении бжу.
- •10.Потенциометрический метод в определении бжу
- •11.Рефрактометрический метод в определении бжу
- •12.Гравиметрический метод в определении бжу
- •13.Хроматографический метод в определении бжу
- •14.Нефелометрический метод в определении бжу
- •15.Преципитационный метод в определении бжу
- •16.Газометрический метод в определении бжу
- •17.Расчетные методы в определении бжу
- •18.Электрофоретический метод в определении бжу
- •19.Иммунометрический метод в определении бжу
- •20.Турбидиметрический метод в определении бжу
7.Поляриметрический метод в определении методы в определении бжу
Метод, основанный на измерении вращения плоскости поляризации света оптически активными веществами. Это свойство обусловлено наличием в молекуле асимметричного атома углерода или других функциональных групп, обусловливающих пространственную асимметрию молекулы.
Явление оптической активности известно с начала XIX века. Именно с открытия оптической активности (Ж. Био, 1815) начала развиваться стереохимия.
В поляриметрии возможны качественный анализ и количественный анализ. Угол вращения плоскости поляризации света при прохождении его через анализируемый раствор измеряют на поляриметре.
Плюсы:
занимает очень мало времени,
не требует реактивов,
анализируемый раствор после поляриметрического исследования может быть применен для любой цели.
прост в осуществлении.
Минусы:
малоспецифичен, неточен
Поляриметрический метод, который до недавнего времени широко использовался в клинике для количественного определения глюкозы в моче, основан на свойстве глюкозы, находящейся в растворе, вращать плоскость поляризации света вправо. Угол вращения плоскости поляризации пропорционален концентрации глюкозы в растворе. Так же этим методом определяют лактозы.
8.Редуктометрический метод в определении бжу
Редуктометрические методы практически не используются в клинике.
Редуктометрические методы, основанные на свойстве сахара восстанавливать в щелочной среде соли тяжелых металлов.
К ним относятся: Титрометрический метод Хагедрона и Йенсена (1923), в котором используется свойство сахаров восстанавливать при кипячении в щелочной среде красную кровяную соль в желтую кровяную соль. По степени этого восстановления титрометрически определяют концентрацию сахара в крови.
9.Цитохимические методы в определении бжу.
Цитохимические исследования проводят в препаратах (мазках или отпечатках) костного мозга, крови, различных органов и новообразований, пунктатов;
Эти методы основаны на использовании специфических химических цветных реакций для определения в клетках различных веществ (под действием специально подобранных реактивов происходит окрашивание тех или иных веществ в цитоплазме, а по степени и характеру окраски судят о количестве или активности исследуемых веществ). Цитохимические исследования относительно несложны, но уступают в точности количественному анализу, проводимому с помощью биохимических методов.
При цитохимическом исследовании чаще пользуются полуколичественной оценкой результатов, используя принцип Астальди, основанный на выявлении различной степени интенсивности специфической окраски. В зависимости от нее исследуемые элементы делят на 4 группы: с отрицательной реакцией (-), слабоположительной (+), положительной (++) и резко положительной (+++).
Для количественного выражения результатов подсчитывают 100 клеток определенного вида, дифференцируя их по указанному принципу, затем число клеток с одинаковой интенсивностью окраски умножают на соответствующее данной группе число плюсов, сумма этих произведений составляет условные единицы. Можно выразить результат в виде среднего цитохимического показателя по L
Цитохимическое исследование гликогена
локализуется в цитоплазме клеток. При цитохимическом исследовании гликогена используют главным образом PAS-реакцию или ШИК-реакцию (по названию реактивов - шифф-йодная кислота).
Метод Шабадаша Под влиянием перйодата калия гликоген окисляется с образованием альдегидных соединений, легко реагирующих с реактивом Шиффа.
Методы цитохимического определения липидов. Локализуются в мембранах органелл и обнаруживаются преимущественно в нейтрофильных гранулоцитах. Цитохимическое исследование основано на применении красящих веществ, растворяющихся в жирах (судан III, судан IV, черный судан и др.). Для выявления нейтрального жира пользуются суданом III, окрашивающим жир в оранжевый цвет. Липоиды выявляются лучше суданом черным (черное окрашивание).
