4.Спектрофотометрические методы в определении бжу

Спектрофотометрический метод анализа — основан на поглощении монохроматического излучения, т. е. излучения с одной длиной волны в видимой и УФ областях спектра.

Спектрофотометрические метод определения мочевины

Уреазный метод. Ферментативные методы базируются на гидролизе мочевины уреазой в инкубационной среде на углекислый газ и аммиак. Образовавшийся аммиак можно определить по высокочувствительной и специфичной реакции с фенолгипохлоритом и катализатором нитропруссидом, по салицилатно‑гипохлоритной реакции, по реакции с реактивом Несслера (является в 10 раз менее чувствительной по сравнению с фенолгипохлоритной, малоспецифична), по дихлоризоциануратной реакции (наличие белка мешает определению).

Спектрофотометрический метод определения ПВК

Энзимный метод. Пировиноградная кислота под влиянием лактатдегидрогеназы (ЛДГ) восстанавливается в молочную. При этом происходит окисление восстановленного никотинамидадешшдинуклеотида (НАД • И»): по изменению оптической плотности реакционной смеси и можно судят о концентрации пировиноградной кислоты.

Спектрофотометрический метод определения углеводсодержащих белков

Гликозилированный гемоглобин. Фруктоза, входящая в состав стабильной формы гликозилированного гемоглобина дегидрируется фосфорной кислотой с образованием 5-оксиметилфурфурола, который взаимодействует с тиобарбитуровой кислотой с образованием окрашенного комплекса с максимальным поглощением при 443 нм

5.Газохроматографический метод в определении бжу

Газохроматографический метод анализа заключается в том, что проба воздуха в виде газообразных или испаряющихся компонентов вводится в поток соответствующего газа-носителя и вместе с ним пропускается через колонки с твердыми адсорбентами или нанесенными на твердые поверхности нелетучими жидкостями. Компоненты, составляющие смесь, в соответствии с их различными коэффициентами распределения между неподвижной (твердой) и подвижной (газообразной) фазами перемещаются в колонке с различной скоростью, выходят из нее отдельными фракциями и могут быть определены в виде отдельных веществ в смеси с газом-носителем. Способ отличается очень высокой селективностью, а при использовании соответствующих детекторов - и высокой чувствительностью.

Газохроматографический метод анализа широко распространен в области анализа синтетических и природных жирных кислот.

Хорошо разработаны газохроматографические методы, позволяющие установить положение гидроксильных и аминогрупп в молекуле и различить, например, первичные, вторичные и третичные амины.

В настоящее время описаны газохроматографические методы как качественного, так и количественного анализа кислых углеводов. Липиды и белки как правило не летучи и определяются этим методом редко и в основном количественно по продуктам сгорания или продуктам реакций.

6.Титрометрические методы в определении бжу

Метод основан на определении содержания вещества путем точного измерения объема раствора реагента (титранта), вступившего в химическую реакцию с определяемым веществом. Концентрация раствора титранта должна быть точно известна.

Основы титриметрического метода были заложены еще в середине XVIII столетия. Еще в 1726 г. К. Ж. Жоффруа осуществил нейтрализацию кислот в аналитических целях. К 1750 г. в качестве титранта стали использовать раствор с известной концентрацией, а индикатором служил фиалковый экстракт. В 1795 г. был предложен метод определения гипохлорита. Здесь были отработаны устройства для титрования — пипетки, бюретки, мерные колбы. Ж. Л. Гей-Люссак позднее предложил индиго в качестве индикатора для окислительно-восстановительного титрования. Он ввел и термин “титрование”.

Плюсы: быстрота определения; простота оборудования; возможность автоматизации; точность – относительная погрешность 0,1 – 0,01 %, так же преимуществом метода является дешевизна и возможность использования в любой лаборатории;

Минус: метод малоспецифичен, т.к. определяются все восстанавливающие вещества.

Титрометрические методы определения глюкозы.

Метод Хагедорна‑Йенсена: Основан на свойстве сахара восстанавливать при кипячении в щелочной среде железистосинеродистую и железосинеродистую соли калия. По степени этого восстановления титрометрически исследуют концентрацию глюкозы в крови.