спектр и фотометр

Подлинность указанных лекарственных веществ выпоняется данными УФ- и ИК-спектроскопии. ИК-спектр лидокаина гидрохлорида, снятый в вазелиновом масле в области 4000-700 см-1, должен иметь те же полосы поглощения, что и спектр стандартного образца.).

УФ-спектр раствора тримекаина гидрохлорида в водно-спиртовой смеси, подкисленной хлороводородной кислотой, имеет в области 250300 нм максимумы поглощения при 262,5 и 271 нм и минимум – при 255 нм. Раствор бупивакаина гидрохлорида в 0,1М растворе хлороводородной кислоты имеет максимум поголощения при 271 нм.).

Чистота: Посторонние примеси в тримекаина гидрохлориде (ТСХ на Пластинке «Силуфол УФ-254» ).

Посторонние примеси в лидокаина гидрохлориде (примесь первичных аминов по цветной реакции с п-диметиламинобензальдегидом – не более 0,01%)

Посторонние примеси в бупивакаина гидрохлориде (примесь 2,6-ди- метиланилина методом ГЖХ с пламенно-ионизационным детектором, газ-носитель – азот, носитель 30% SE-30 на хромосорбе WAW).

91

Количественное определение этих препаратов осуществляются методами ГЖХ и ВЭЖХ.

ГЖХ (для лидокаина гидрохлорида испытание выполняют при температуре детектора и испарителя – 290°С (газ-носитель -азот) в аналитической колонке, заполненной Инертоном с 3% неподвижной жидкой фазы OV-17).

ВЭЖХ (для бупивакаина и тримекаина гидрохлорида: время удерживания около 6 мин, неподвижная фаза – лихосорб, подвижная – смесь ацетонитрила с фосфатным буферным раствором (рН=6,8). Одновременно определяют количественной содержание с использованием внутреннего стандарта).

Артикаина гидрохлорид –Articaine Hydrochloride

4-метил-3[2-пропиониламинопропионамидо]-2-тиофенкарбоновой кислоты метилового эфира гидрохлорид

Многочисленными химико-фармакологическими исследованиями ученых установлено, что местноанестезирующим действием обладают не только производные п-аминобензойной кислоты и дифенилацетамида, но и сложные эфиры карбоновых кислот гетероциклического ряда. К этой группе относится артикаина гидрохлорид.

Молекула артикаина имеет сходство со структурой кокаина. Она включает элементы анестезиофорной части его молекулы, в частности радикал 2-пропиониламинопропионамид. Это как бы раскрытая тропановая часть молекулы, а аналогичная кокаину сложно-эфирная группа отличается лишь тем, что связана с тиофенкарбоновой кислотой.

Применение: это местноанестезирующее средство быстрого и относительно длительного действия при всех видах анестезии.

Применяют его главным образом в стоматологии (1-2%-ные растворы для инъекций по 1 мл).

Ультракаин D-C – сочетание (в 1 мл) артикаина гидрохлорида (0,04 г) с адреналина гидрохлоридом (0,006 мг).

92

Сульфаниламидные препараты

Сульфаниламидные препараты – это группа химических веществ, производных амида сульфаниловой кислоты.

По химическому строению ЛС этой группы делятся на производные

бензолсульфохлорамида, сульфаниламида, бензолсульфонилмочевины, производные амида хлорбензолсульфоновой кислоты.

Сходство в химическом строении обуславливает общность в свойствах и возможность применения общих методов анализа для этой группы лекарственных веществ.

Структуры этих соединений и их продуктов превращения однозначно определяются различными химическими и спектральными методами

(см. рис. 52 и 53).

93

Применение спектральных методов в анализе сульфаниламидных препаратов

Внастоящее время практически все виды спектрофотометрии ис-

пользуются для идентификации и количественного определения ЛВ,

вчастности, исследования состава, строения субстанций, анализа индивидуальных веществ и многокомпонентных систем. Кривая зависимости поглощения (функция поглощения) от длины волны или волнового числа называется спектром поглощения вещества и является специфической характеристикой данного вещества.

Вспектрофотометрических методах применяют спектрофотометры. Эти приборы позволяют проводить анализ соединений по избирательному поглощению монохроматического излучения в видимой, ультрафиолетовой и инфракрасной областях спектра. Природа полос поглощения

вультрафиолетовой и видимой областях спектра связана с различными электронными переходами в поглощающих молекулах и ионах (электронные спектры); в инфракрасной области она связана с колебатель-

ными переходами и изменением колебательных состояний ядер,

входящих в молекулу поглощающего вещества (колебательные спекры). Распространенная. в настоящее время аппаратура позволяет измерять ультрафиолето-вые спектры в области от 190 до 380 нм, видимые – от 380

до 780 нм, инфракрасные спектры – от 780 до 40000 нм (40 мкм).

Для испытания подлинности сульфаниламида ФС рекомендует измерять УФ-спектр 0,0008%-ного раствора в 0,01 М растворе гидроксида натрия. Он должен иметь максимум поглощения при 251 нм. УФ-спектр 0,015%-ного раствора сульфаниламида в 1 М растворе хлористоводородной кислоты характеризуется наличием максимумов поглощения при 264 и 271 нм, минимумов поглощения при 241, 268 нм и плеча от 257 до 261 нм.

УФ-спектр 0,001%-ного раствора сульфацетамида натрия имеет максимум поглощения при 256 нм и минимум – при 227 нм, а сульфален имеет два максимума поглощения – при 250 и 318 нм (растворитель 0,1 М раствор гидроксида натрия).

Характерные особенности имеют УФ-спектры растворов других сульфаниламидов. Они широко применяются для идентификации и количественного спектрофотометрического определения сульфаниламидов с использованием таких растворителей, как вода, 0,01 М и 0,002 М растворы гидроксида натрия, 0,1 М раствор хлористоводородной кислоты и др.

Например, в водных растворах определяют при 258 нм сульфаниламид и сульфацетамид натрия, а сульфадиметоксин спектрофотометрируют при длине волны 270 нм (растворитель 0,002 М раствор гидроксида натрия).

Для сульфалена и сульфадиметоксина ФС рекомендован способ измерения УФ-спектров поглощения щелочных растворов по сравнению

94

с кислыми растворами той же концентрации. Такой дифференциальный УФ-спектр у сульфалена имеет один максимум поглощения при 325 нм, а у сульфадиметоксина – один минимум поглощения при 260 нм и два максимума при 253 и 268 нм. Одновременно измеряют дифференциальные УФ-спектры кислых растворов сульфалена и сульфадиметоксина относительно щелочных. Они имеют по одному максимуму поглощения: при 289 нм – у сульфалена, при 288 нм – у сульфадиметоксина.

Характерные спектры, обусловленные наличием в молекуле азогруппы, имеют в видимой области спектра (400-600 нм) азопроизводные сульфаниламидов. Их используют для иденти-фикации и количественной оценки. Так, салазодин идентифицируют по наличию максимума поглощения в области 457 нм (растворитель 0,1 М раствор гидроксида натрия).

Для испытания на подлинность сульфаниламидов также применяют ИК – спектроскопию в области 4000 – 400 см-1. Идентифицируют по наличию характеристических полос поглощения ИК-спектров, которые должны совпадать с прилагаемыми к ФС рисунками ИК-спектров или с параллельно снятыми спектрами стандартных веществ-свидетелей.

Для идентификации и количественного определения сульфаниламидов может быть использован один из наиболее информативных методов – спектроскопия ЯМР 1Н и 13С. Оптимальным для получения ПМР-спек- тров является 5%-ный раствор NaOD в D2O. Для всех сульфаниламидов являются характеристическими дублеты протонов бензольного цикла (п-амино-бензолсульфониламидной группы) в области 6,7-8,2 м.д. с суммарной интенсивностью 4 Н.

В фармацевтическом анализе используют характеристические дублеты протонов бензольного цикла для алифатических (R) производных, а сигналы поглощения протонов гетероциклов и их заместителей – для сульфаниламидов, имеющих гетероциклическую и ароматическую структуру.

Для обнаружения и количественного определения сульфаниламидов, в том числе, в биологических жидкостях, применяют методов ТСХ и ВЭЖХ с использованием подвижной фазы, состоящей из воды, метанола и фосфатного буферного раствора (рН 4,9).

Например, для подтверждения подлинности сульфаметоксазола на ряду с ИК-спектром Британская фармакопея использует метод ТСХ:

-пластинка Силикагель F-254;

-объем пробы – 5 мкл;

-система растворителей:

раствор аммиака/ вода/ нитрометан/ диоксан (3:5:41:51); - детектирование в УФ-свете при длине волны 254 нм.

Основное пятно на хроматограмме тестируемого раствора должно соответствовать по положению и размеру основному пятну СОВС.

95

ПРИМЕРЫ:

Сульфаниламид

Описание. Белый кристаллический порошок без запаха. Растворимость. Мало растворим в воде, легко – в кипящей воде, в

разведённой хлористоводородной кислоте и ацетоне, трудно – в спирте, практически не растворим в эфире и хлороформе.

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца стрептоцида (см. рис. 54).

Рис. 54. ИК-спектр стрептоцида. Стандартный образец USP в диске калия бромида

Сульфацетамид натрия

Подлинность. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца сульфацетамида натрия (см. рис. 55).

96

Рис. 55. ИК-спектр сульфацетамида натрия. Стандартный образец USP в диске калия бромида

0,1 г субстанции растворяют в фосфатном буфере (рН=7.0) и доводят до 100 мл тем же растворителем. Ультрафиолетовый спектр, снятый в области от 230 до 350 нм, должен иметь максимум поглощения при 255 нм.

Сульфаметоксазол

Подлинность. Температура плавления должна быть 169-172оС. Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в

области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца сульфаметоксазола (см. рис. 56).

Рис. 56. ИК-спектр сульфаметоксазола. Стандартный образец USP в диске калия бромида

97

Сульфадоксин

Рис. 57. ИК-спектр сульфадоксина. Стандартный образец USP в диске калия бромида

Подлинность.

Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца сульфадоксина (см. рис. 57). На рис. 58 представлен ПМР-спектр сульфадоксина, который однозначно подтверждает структуры и подлинность сульфадоксина.

98

Рис. 58. ПМР-спектр сульфадоксина в DMSO-d6

Фталилсульфатиазол

Рис. 59. ИК-спектр фталилсульфатиазола. Стандартный образец USP в диске калия бромида

Подлинность.

Инфракрасный спектр субстанции фталилсульфатиазола, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см- 1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного об - разца (см. рис. 59). ПМР-спектр фталилсульфатиазола представлен на рис. 60.

Подлинность подтверждают также методом ТСХ на пластинках Кизельгель при хроматографирование подвижной фазе состава хлоро- форм-ментол-раствор аммиака концентрированный (80:20:3). После проявления реактивом Драгендорфа должны обнаруживаться два основных пятна на уровне стандартных образцов веществ-свидетелей триметоприма и сульфаметоксазола.

99

Рис. 60. ПМР-спектр фталилсульфатиазола в DMSO-d6

Комбинированные сульфаниламидные препараты

Эффективным комбинированным противомикробным средством являются таблетки «Ко-тримоксазол-ICN». Они известны также под названием бисептол (бактрим). Таблетки включают два компонента: сульфаметоксазол 0,4 г и триметоприм 0,08 г.

По внешнему виду это таблетки с кремоватым оттенком цвета. Средняя масса таблеток от 0,57 до 0,63 г.

100