Качественная оценка наличия нитритов в продукции растениеводства с помощью йодкрахмальной бумажки
Приборы и реактивы: исследуемые овощи; 1%-й раствор соляной кислоты; картофельный или рисовый крахмал; йодид калия.
Ход анализа
3 г средней пробы заливают 50 мл дистиллированной воды.
Смесь, периодически помешивая, настаивают при комнатной температуре в течение часа, после чего фильтруют через простой бумажный фильтр.
Подготавливают йодкрахмальную бумажку: небольшое количество рисового или картофельного крахмала тщательно смешивают с небольшим количеством воды. Полученную суспензию малыми порциями вливают в кипящую воду, перемешивают стеклянной палочкой и продолжают кипятить до получения прозрачного раствора. К охлажденному раствору крахмала прибавляют немного чистого йодида калия. Этим раствором пропитывают полоски фильтровальной бумаги, которые затем высушивают.
На йодкрахмальную бумажку наносят каплю 1%-го раствора соляной кислоты и 3–4 капли нейтрализованного дистиллята. При наличии нитритов в дистилляте йодкрахмальная бумажка синеет.
Качественная реакция определения нитритов с помощью реактива Грисса
Приборы и реактивы: исследуемый корм; 2%-й раствор уксусной кислоты; 12%-й раствор уксусной кислоты; порошок активированного угля; реактив Грисса; фотоэлектроколориметр ФЭК-М.
Ход анализа
3 г средней пробы исследуемого корма заливают 50 мл 2%-го раствора уксусной кислоты и добавляют на кончике скальпеля порошок активированного угля.
Смесь, периодически помешивая, настаивают при комнатной температуре в течение 1 ч, после чего фильтруют через простой бумажный фильтр.
Для определения нитритов в пробирку с 10 мл фильтрата вносят 0,2 г реактива Грисса, а в контрольную – 0,2 мл 12%-го раствора уксусной кислоты.
После тщательного смешивания при наличии нитритов появляется розовое окрашивание, интенсивность которого определяют с помощью фотоэлектроколориметра ФЭК-М через 15 мин (при зеленом светофильтре с длиной волны 536 мкм в кюветах с шириной рабочих граней 10 мм против контрольной пробы) или визуально, используя шкалу окраски эталонных растворов.
Концентрацию нитритов определяют по заранее подготовленному калибровочному графику из стандартных растворов нитрита натрия, содержащих в 1 мл от 1 до 12,5 мкг NO2-.
Фотоэлектроколориметрическое измерение интенсивности окраски
Для построения калибровочного графика готовят шкалу стандартных растворов:
Берут 0,1 г азотистокислого натрия, растворяют в воде, количественно переносят в мерную колбу на 50 мл, доводят водой до метки и перемешивают.
Для приготовления рабочего раствора 3 мл основного раствора растворяют в 120 мл воды и тщательно перемешивают.
Из полученного рабочего раствора готовят серию стандартных растворов: 2, 5, 10, 15, 20 и 25 мл рабочего раствора пипеткой вносят в 6 мерных колб на 100 мл, доводят водой до метки и перемешивают. Полученные стандартные растворы содержат в 1 мл соответственно 1; 2,5; 5; 7,5; 10 и 12,5 мкг азотистокислого натрия. Полученные стандартные растворы нестабильны, поэтому их готовят непосредственно перед построением калибровочного графика.
В каждую колбу добавляют по 0,2 г реактива Грисса для проведения цветной реакции, перемешивают и выдерживают в темном месте 10 мин при 20±20С. Интенсивность красной окраски измеряют на фотоэлектроколориметре с зеленым светофильтром в кювете с толщиной поглощающего свет слоя 1 см. Параллельно при этих же условиях исследуют контрольный раствор. Из полученных данных строят калибровочный график. При этом на оси абсцисс откладывают концентрацию азотистокислого натрия (мкг/мл), на оси ординат – соответствующую оптическую плотность. Калибровочный график должен проходить через начало координат.
Содержание нитритов (Х, мг) на 100 г продукта вычисляют по формуле 3
(3)
где С – содержание нитрита натрия в 1 мл окрашенного раствора, найденного по калибровочному графику, мкг; М – масса навески, г; Y – количество фильтрата, взятое для фотоколориметрии, мл; 1000 – перевод в мг.
Результаты проведенных анализов оформляют в виде таблицы и делают вывод из проделанной работы.