Литература:

1. Адаскевич, В.П. Поражение ногтей у больных с различными клиническими формами псориаза/ В.П. Адаскевич, О.С. Зыкова, Э.Ю. Михута// Медицинская панорама. – 2010. - №1. – С.20-22.

2. Зыкова, О.С. Клинические аспекты дерматологической диагностики артропатического псориаза / ARSMedica. - №1 (81). – 2014. – С. 150-154.

3. Bruce, I.N. Psoriatic arthritis: Clinical features / I.N. Bruce // Rheumatology, third edition. Edited by M.C. Hochberg et al. – L. Sevier Ltd., London, 2003. – P. 1241-1252

4. Бёнке, В.-Х. Сопутствующие заболевания при псориазе/ В.-Х. Бёнке, Х.Бюргер, С.Бёнке// Дерматолог. – 2010. - №1. – С. 025-030.

5. Кундер, Е.В. Псориатический артрит: монография, Е.В. Кундер. – Витебск: ВГМУ, 2011. – 255 с.

Исследование каталитической активности поликлональных иммуноглобулинов у стационарных пациентов с псориазом

Малютина К.А., Матюшкова А.В. (6 курс, лечебный факультет)

Научные руководители: к.м.н., доцент Зыкова О.С., к.м.н. Волкова М.В.

УО «Витебский государственный медицинский университет»

г. Витебск

Актуальность. Псориаз является актуальной проблемой в современной дерматовенерологии. Псориаз относится к группе воспалительных дерматозов, является мультифакторным заболеванием с наследственной предрасположенностью. При псориазе происходит нарушение всех звеньев иммунной регуляции кожи. Это приводит к тому, что активированные клетки эпидермиса и дермы выделяют многочисленные медиаторы иммунного ответа и воспаления и других биологически активных веществ, которые в свою очередь усиливают пролиферацию клеток эпидермиса и усиливают развитие воспаления в дерме [1].

Одним из важных дерматологических симптомов псориаза является поражение ногтей – псориатическаяониходистрофия. Среди разновидностей ониходистрофий при псориазе различают признаки патологииногтевого ложа, матрикса ногтя, а также околоногтевых валиков. Патология матрикса клинически проявляется пунткиформными вдавлениями (симптом «напёрстка»), лейконихией, продольной исчерченностю, трахионихией, койло-и платонихией, линией Бо. Следствием патологиии ногтевого ложа считаются симптом «масляного пятна», онихолизис, онихомадез, подногтевой гиперкератоз и онихогрифоз, онихошизис и подногтевые геморрагии. Псориатическая паронихия характеризуется воспалением, утолщением, гиперемией и инфильтрацией околоногтевых валиков[2]. Отмечено, что ониходистрофия чаще регистрируется при тяжёлых формах псориаза: эритродермической, артропатической и экссудативной, а также у пациентов с псориазом, имеющих патологию сердечно-сосудистой системы [1, 2].

Псориаз является системным заболеванием. По данным литературы, у 5 - 40% страдающих псориазом развивается поражение суставов, встречаются поражения внутренних органов. Заболевание имеет коморбидность с артериальной гипертензией, заболеваниями обмена веществ. Это объясняется важной ролью фактора некроза опухолей α (ФНОα), который вызывает повреждение эндотелия сосудов и выработку антител [3]. Аутоиммунных характер псориаза подтверждается тем, что антитела, которые вырабатываются в организме пациентов с псориазом, обладают собственной каталитической активностью, при этом уровень этих активностей различается у пациентов с различными клиническими формами псориаза [4].

Цель. Исследовать ДНКазную и супероксиддисмутазную активности поликлональных иммуноглобулинов сыворотки крови у пациентов с распространённым псориазом с поражением и без поражения ногтевых пластин.

Материалы и методы. Обследованы 15стационарных пациентов с поражением кожи и ногтей (псориатическаяониходистрофия) – группа 1. Группой сравнения послужили клинические и лабораторные данные 16 стационарных пациентов с псориатическим поражением кожи – группа 2.Учитывали возраст пациентов, для оценки тяжести псориаза рассчитывали индекс тяжести и площади поражения кожи (PASI).

В первую группу (n=15) вошли 7 мужчин и 8 женщин. Средний возраст пациентов группы 1составил36,9±2,8 лет (от 24 до 63 лет). Обыкновенная клиническая форма псориаза была установлена у 4 пациентов (27%).

Вторую группу составили 16 пациентов с псориатическим поражением кожного покрова, из них 12 мужчин и 2 женщины. Средний возраст пациентов группы 2 составил23,0±1,7года (от 16 до 39 лет). Обыкновенная клиническая форма псориаза была установлена у 14 пациентов (88%).

Материалом для исследования послужили сыворотки крови и IgG подклассов 1,2 и 4 пациентов 1 группы. Для выполнения задач использовали комбинацию методов очистки поликлональныхIgG[5].

Определение ДНКазной(деполимеризующей) активности. Постановка реакции осуществлялась согласно методике [5]. В состав реакционной смеси входили иммуноглобулины в концентрации 1 мг/мл в 0,1 мл пробы, 0,1мл 0,02М трис- HCl буферного раствора pH 7,4, содержащего 0,01М раствор хлорида магния и 0,2 мл раствора ДНК в концентрации 300 мкг/мл. Затем осуществлялась инкубация при 37^оС в 20 часов. Учет результатов выполнялся визуально после добавления в пробы по 20 мкл 0,75% раствора риванола по величине образовавшихся сгустков нераспавшейся ДНК. В контрольных пробах вместо препаратов антител вносили 0,1 мл. Количественный учет производился в баллах. Отсутствие активности (сгусток ДНК) принимали за 0 баллов, минимальная активность (рыхлый сгусток) – 1 балл, слабая активность (рыхлый сгусток, хлопья, нити ДНК) – 2 балла, умеренная активность (хлопья, нити) - 3 балла, высокая активность (хлопья, нити, распад сгустка) – 4 балла и распад сгустка ДНК (очень высокая активность) – 5 баллов.

Определение СОД- активности. Постановка реакции осуществлялась согласно методике [5]. В состав реакционной смеси входили иммуноглобулины в концентрации 1 мг/мл, 10 мкл раствора феназинаметасульфата, приготовленного extempore, 10 мкл раствора НАДН и 0,02 мл раствора 0,9% раствора NaCl. Инкубация проводилась при 37^оС 10 минут. Измерение проводилось на фотометре при длине волны 570 нм. Расчет СОД активности проводили по формуле A = (Ek – Eo)/ Ek x 100%, где, А – активность препарата; Ek – средняя оптическая плотность контрольных проб;Eo- средняя оптическая плотность опытных проб.

Цифровые данные обрабатывались с помощью пакета программ Excel.

Результаты и обсуждение. ДНКазная активность иммуноглобулинов в группе пациентов с поражением кожи и ногтей (№1) составила 2,4 1,1 баллов, уровень СОД активности – 6,73,1. Уровень ДНКазной активностииммуноглобулинов в группе пациентов с поражением кожи (№2) составил 2,12 0,3, уровень СОД активности – 14,11,5.

Таким образом, в обеих группах уровни ДНКазной активности не имели существенных различий, в то время как уровни СОД – активности существенно различались и были более высокими в группе пациентов без поражения ногтевых пластин. Более низкие значения активности СОД сочетались с более высоким средним возрастом пациентов из группы обследования (№1). Предполагают, при псориазе СОД активность проявляет защитную роль, разрушая избыточное количество супероксида, и увеличение активности СОД может оцениваться как защитный противовоспалительный механизм[4].

Выводы:

1. В группах обследованных пациентов выявлены ДНКазная, и супероксиддисмутазная активности поликлональных иммуноглобулинов.

2. У пациентов с более длительным стажем псориаза и поражением кожи и ногтей соотношение исследуемых деполимеризующей и оксидоредуктазной активностей иммуноглобулинов смещено в сторону деполимеризующей активности по сравнению с группой пациентов и поражением кожи.

3. Сочетание поражения кожи и ногтевых пластин при псориазе может указывать на снижение защитных противовоспалительных механизмов в организме пациентов.