Клиническая картина
Инкубационный период составляет 1—2 недели. Заболевание развивается, как правило, постепенно и не имеет специфических черт. Но больные обычно предъявляют четыре основные жалобы:
перемежающаяся боль в суставах, преимущественно в нижних конечностях, иногда весьма сильная и мучительная.
повышение температуры тела (до 38 °C) или волнообразного типа с резкими подъёмами и падениями.
усиленная потливость, испарина, иногда ночная потливость.
резкая слабость и упадок сил.
Системные поражения многообразны и затрагивают практически все органы. Встречаются:
Опорно-двигательный аппарат
Сердце
Дыхательная система
Пищеварительная система
Мочеполовая система
Центральная нервная система
Лимфатические узлы, селезёнка
Глаза
Леффлера метод окраски
(F.A.J. Loeffler, 1852—1915, нем. бактериолог) — 1) окраска жгутиков бактерий путем последовательного применения протравы (танина) и красителя; 2) окраска дифтерийных бактерий метиленовым синим Леффлера.
Окрашивание по Леффлеру: на мазок кладут кусочек фильтровальной бумаги и наливают раствор синьки Леффлера на 3–5 минут; препарат промывают дистиллированной водой и высушивают. Метод суправитальной окраски бриллиантовым крезиловым синим
Каплю насыщенного раствора бриллиантового крезилового синего в абсолютном спирте наносят на хорошо вымытое, обезжиренное и подогретое стекло и делают из него тонкий мазок.
На приготовленное стекло наносят каплю крови, делают тонкий мазок и сразу помещают стекло во влажную камеру.
Мазки выдерживают 3—5 мин, затем высушивают на воздухе.
Зернисто-ниточная субстанция ретикулоцитов окрашивается в фиолетово-синий цвет, четко выделяясь на зеленовато-голубоватом фоне эритроцитов
Окраска спор по Мёллеру.
Высушивание мазка; фиксация; действие 5-проц. раствором хромовой кислоты — 1—2 мин.; промывание водой; окрашивание фуксином Циля с подогреванием до появления паров; обесцвечивание 5-проц. раствором серной или 15-проц. раствором азотной кислоты; промывание водой; дополнительное окрашивание контрастной краской — метиленовой синью 0,5—1 мин. Споры красные, вегетативные формы микробов синие.
Окраска капсул основана на явлении метахромазии, т. е. способности одной краски окрашивать различные по химическому составу части микроба в различные цвета. Некоторые способы окраски капсул основаны на контрастной окраске.
Способ Ольта.
Фиксированный препарат красят 1—2 мин., при нагревании, 4-проц. водным раствором сафранина; смывают водой; не высушивая, накрывают покровным стеклом и рассматривают под микроскопом. Микробы красные, а капсулы оранжево-желтые.
Способ Ребигера.
Препарату дают хорошо высохнуть; без фиксации красят 20 сек. раствором генцианвиолета (15—20 а) в 40-проц. формалине (100—150 г); обмывают водой, исследуют. Капсулы фиолетоворозовые; бациллы темнофиолетовые.
Способ Клетта.
Фиксированный препарат красят 2—3 мин. метиленовой синью, с подогреванием до появления паров; обильно промывают водой; красят фуксином Пфейфера 5 сек.; быстро промывают водой. Микробы синие, капсулы розовые.
Способ Маккиавелло — Здродовского
(А.М. Macciavello, чилийский врач XX в.; П.Ф. Здродовский, 1890—1976, советский микробиолог и иммунолог)
Окраска фиксированных на пламени бактериологических препаратов карболовым фуксином и метиленовым синим; предназначен для обнаружения риккетсий, которые при этом окрашиваются в красный цвет (клеточные элементы окрашиваются в голубой цвет).
___________________________________________________________________________________
Более интенсивного окрашивания достигают увеличением продолжительности окрашивания или подогреванием на спиртовой лампочке до появления паров. Если препарат перекрашен, то можно частично удалить краску обильным промыванием водой или непродолжительным промыванием спиртом. Более сильное средство обесцвечивания — промывание препарата 5% раствором серной кислоты или 15% раствором азотной кислоты.
Окраска карболовым тионином Николя
1 часть насыщенного спиртового раствора тионина, 10 частей 1% водного раствора фенола, мазки окрашивают 3-5 мин. Окрашивают в проточной воде, дифференцируют 30 сек в 96% спирте, снова ополаскивают и высушивают. Препарат изучают при масляной иммерсии. Бактерии окрашиваются в синий цвет.
Методы окраски бактерий (мазков)
Окраску мазка производят простыми или сложными методами. Простые заключаются в окраске препарата одним красителем; сложные методы (по Граму, Цилю-Нильсену и др.) включают последовательное использование нескольких красителей и имеют дифференциально-диагностическое значение. Отношение микроорганизмов к красителям расценивают как тинкториальные свойства. Существуют специальные методы окраски, которые используют для выявления жгутиков, клеточной стенки, нуклеоида и разных цитоплазматических включений.
При простых методах мазок окрашивают каким-либо одним красителем, используя красители анилинового ряда (основные или кислые). Если красящий ион (хромофор) — катион, то краситель обладает основными свойствами, если хромофор - анион, то краситель имеет кислые свойства. Кислые красители — эритрозин, кислый фуксин, эозин. Основные красители — генциановый фиолетовый, кристаллический фиолетовый, метиленовый синий, основной фуксин. Преимущественно для окраски микроорганизмов используют основные красители, которые более интенсивно связываются кислыми компонентами клетки. Из сухих красителей, продающихся в виде порошков, готовят насыщенные спиртовые растворы, а из них — водно-спиртовые, которые и служат для окрашивания микробных клеток. Микроорганизмы окрашивают, наливая краситель на поверхность мазка на определенное время. Окраску основным фуксином ведут в течение 2 мин, метиленовым синим — 5—7 мин. Затем мазок промывают водой до тех пор, пока стекающие струи воды не станут бесцветными, высушивают осторожным промоканием фильтровальной бумагой и микроскопируют в иммерсионной системе. Если мазок правильно окрашен и промыт, то поле зрения совершенно прозрачно, а клетки интенсивно окрашены.
Сложные методы окраски применяют для изучения структуры клетки и дифференциации микроорганизмов. Окрашенные мазки микроскопируют в иммерсионной системе. Последовательно нанести на препарат определенные красители, различающиеся по химическому составу и цвету, протравы, спирты, кислоту и др.
При простых методах окраски используется лишь одна краска. С этой целью в бактериологии используются, как правило, или водный фуксин или метиленовая синька. Простые методы окраски используются для ориентировочной, предварительной, микроскопии – определения наличия в патологическом материале бактерий, определение их формы и расположения в мазке.
При сложных методах окраски используются ряд красок в определенной последовательности. Такие методы используются для выявления в патологическом материале конкретных микроорганизмов, а также определения особенностей их ультраструктуры. 1. Окраска по Граму используется для определения типа строения клеточной стенки. Это основной метод в бактериологии. В зависимости от окраски по Грамму все бактерии подразделяются на грампо-ложительные и грамотрицательные. 2. Окраска по Цилю-Нильсену используется для выявления кислотоустойчивых бактерий (а именно – микобактерий), а также для обнаружения спор. 3. Окраска по Нейссеру используется для выявления цитоплазматических включений волютина и идентификации по их наличию коринебактерий (в частности – возбудителей дифтерии). 4. Окраска по Бури-Гинсу используется для выявления макрокапсул. 5. Окраска по Морозову используется для выявления жгутиков. Этот метод окраски используется также для выявления трепонем. Кроме того, окраску по Морозову используют в вирусологии – для выявления в оспенных пузырьках вирусов натуральной и ветряной оспы. 6. Окраска по Здрадовскому используется для выявления риккетсий и хламидий. 7. Окраска по Романовскому-Гимзе также, наряду с окраской по Здрадовскому, используется для вы-явления риккетсий и хламидий; кроме того, этот метод окраски используется для выявления спирохет (с их идентификацией до рода в зависимости от цвета окрашивания), а также для выявления простейших.