Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Virusa_shpory_modul_1.docx
Скачиваний:
0
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
105.61 Кб
Скачать

3.Живильні середовища й розчини для кк,перещеплювана кк.

Перещеплювана КК.-це клітини,здатні до необеженої кількості пассажів ін вітро,результатом чого є їхнє невизначено тривале розмноженняпоза ор-змом.Отрим.їх із первинних культур шлях.багаторазового пересівання(не менше 70) з однієї посудини в ін.зі свіжим живильним сер.впродовж кількох місяців.Для отрим.перещеплюваної КК викор.як здорові,так і пухині тканини ор-му тв.Переваги-просте готування,економічніші за часом і затратами праці,забезпеч.більш стандартні умови для культівування вірусів. Недоліки-можливість контамінації вірусами й мікоплазмами,схольність до малігнізації,гетероплодність.

4.Ріф і її використання у вірусології,перевага та недоліки.

Реакція імунофлуоресценції (РІФ) (син.: метод флуорес­ціюючих антитілМФА) ґрунтується на взаємодії антигенів із міченими флуорохромом антитілами, внаслідок чого виникає сві­тіння при люмінесцентній мікроскопії. Серед флуорохромів, запро­понованих для мічення антитіл, найчастіше використовують флуо- ресцеїнізотіоціанат (ФІТЦ), який зумовлює люмінесценцію зеле­ного кольоруНепрямий метод РІФ (РНІФ)

Постановка реакції:фіксовані в ацетоні препарати наносять специфічну сиро­ватку, витримують 30 хв у вологій камері за температури +18...+22 °С або +37 °С, потім відмивають (так само, як при прямому методі РІФ).

На препарати наносять флуоресціюючу антивидову сироватку, витримують 30 хв у вологій камері за температури +18...+22 °С або +37 °С, потім відмивають, висушують на повітрі й досліджують у люмінесцентному мікроскопі.

При наявності вірусного антигену виникає флуоресценція за­ражених клітин (у результаті утворення складних комплексів анти­ген — антитіло — антивидове антитіло).

Одночасно ставлять контролі:незаражені клітини, оброблені флуоресціюючою антивидовою сироваткою;заражені клітини, оброблені флуоресціюючою антивидовою сироваткою;

заражені клітини, оброблені спочатку нормальною сироваткою, а потім флуоресціюючою антивидовою сироваткою;заражені клітини, оброблені спочатку специфічною сироваткою (після попередньої адсорбції антитіл гомологічним антигеном), а потім — флуоресціюючою антивидовою сироваткою.Непрямий метод РІФ має переваги. Він потребує лише однієї флуоресціюючої сироватки — антивидової, з допомогою якої можна виявити антигени різних вірусів (за умови, що специфічні сироват­ки до цих вірусів одержані шляхом імунізації тварин одного виду). Крім того, РНІФ використовується не тільки для ідентифікації віру­су, але й для виявлення антитіл. РІФ характеризується високою чутливістю, специфічністю і шви­дким одержанням результатів . РІФ дає можливість вивчи­ти процеси взаємодії вірусів із клітинами, дослідити динаміку на­громадження вірусних антигенів у клітинах, антигенні зв’язки ві­русів, а також патогенез вірусних інфекцій. Недолік РІФ — випадки неспецифічної флуоресценції, яка може бути спричинена наявністю в специфічних сироватках норма­льних антитіл або антитіл до гетерогенних тканинних білків, фік­сацією мічених антитіл на лейкоцитах, кров’яних пластинках, воло­кнах тощо.

Білет 3

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]