Подсчет количества тромбоцитов

Тромбоциты, или кровяные пластинки, представляют собой наряду с эритроцитами и лейкоцитами третий форменный элемент крови, являясь цитоплазматическими осколками гигантских клеток костного мозга — мегакариоцитов. Кровяные пластинки выполняют в организме важные биологические функции, главным образом в процессах гемостаза. Их физиологическая активность связана с содержанием большого количества ферментов. Описан ряд пластиночных факторов, определяющих фибрино-, тромбопластическое, антигепариновое, адгезивное, ретрактильное, сосудосуживающее и другие свойства тромбоцитов, благодаря которым они занимают видное место в свертывающей системе крови.

Срок пребывания тромбоцитов в периферической крови составляет 5-8 дней; ежедневно обновляется 12-20% общей массы кровяных пластинок. Определение количества тромбоцитов приобретает особенно большое значение при различных видах кровоточивости.

Функции тромбоцитов:

1. Участие в остановке кровотечения:

а) вызывают спазм поврежденного сосуда, содержат серотонин и гистамин

б) участие в образовании первичного тромба (процессы адгезии и агрегации)

в) запуск системы свертывания (тромбоциты содержат факторы свертывания)

г) обеспечение ретракции кровяного сгустка

2. Укрепление кровеносных сосудов (питание для эндотелия, выработка факторов роста эндотелия)

3. Участие в иммунитете организма:

а) эффекторы иммунитета; перенос молекул иммуноглобулинов.

б) поглощают чужеродные микрочастицы и вирусы (вирусы в тромбоцитах погибают, т. к. тромбоциты не содержат ядра).

в) участие в аллергических реакциях, способны к антителзависимой цитотоксичности (могут разрушать бактерии, опухолевые клетки).

Определение количества тромбоцитов крови в камере Горяева

Оснащение: дезраствор, средства индивидуальной защиты, микроскоп, камера Горяева, пробирки, дозаторы на 4,0 и 0,02 мл, фазово-контрастное устройство, влажная камера (чашка Петри с уложенной на дно фильтровальной бумагой, смоченной водой), исследуемый материал, бланки общего анализа крови.

Реактивы: раствор оксалата аммония (10 г/л).

Алгоритм действий:

1. В сухую чистую пробирку налить 4,0 мл раствора оксалата аммония (10 г/л)

2. В эту же пробирку внести 0,02 мл крови

3. Содержимое пробирки хорошо перемешать

4. Оставить на 30 мин при комнатой температуре

5. Подготовить камеру Горяева и влажную камеру

6. Через 30 мин содержимое пробирки перемешать

7. Немедленно заполнить камеру Горяева

8. Заполненную камеру Горяева поместить на 5 мин во влажную камеру (за это время имеющиеся тромбоциты осядут на поверхность сетки счетной камеры).

9. Подсчитать тромбоциты с помощью фазово-контрастного устройства при увеличении окуляр 10х, объектив 40х, в 25 больших квадратах, каждый из которых разделен на 16 малых квадратов.

10. Количество тромбоцитов в 1 мкл крови определить по формуле:

Х = а*200*4000

400

где, а — количество подсчитанных тромбоцитов.

11. Практически, для определения количества тромбоцитов в 1 л крови, используют формулу:

Х = а*2*10⁹/л

12. Полученные результаты занести в бланк исследования.