Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
polnaya_shpora.docx
Скачиваний:
2
Добавлен:
01.07.2025
Размер:
294 Кб
Скачать

Методы культивирования продуцентов ферментов

Глубинный метод производства ферментов

Микр-мы выращ-ся в жидкой пит.среде. Технически более совершенен, чем поверх-ный, т.к. легко поддается автоматизации и механизации. Конц-ция фермента в среде при глубинном культ-нии значительно ниже, чем в водных экстрактах поверх-ной культуры.

При глубинном культ-нии продуцентов ферментов выделяют 5 этапов.

1. Пригот-е пит.сред зависит от состава компонентов.

Некот-е предварит. измельчают, отваривают или гидролитически расщепляют. Готовые к растворению компоненты подают при постоянном помеш-нии в емкость для пригот-ния среды в определенной послед-ти. Стер-цию среды проводят либо путем микрофильтрации с пом. полупрониц-х мембран, либо при пом. высоких t°. t обработки в этом случае зависит от интенсивности фактора и от ур-ня обсемененности

объекта. Стер-ся также все коммуникации и аппараты. Воздух очищ-ся до и после аэрир-ния.

2. Получ-е засевного материала.

Для засева пит.среды материал готовят также глубинным методом. Вид его зависит от продуцента: для грибов это мицелиальная вегетат-ная масса, для бакт. - молодая растущая культ. на начальной стадии спорообраз-ния. Получ-е посевного мат-ла сост. в увеличении массы продуцента в 3-4 стадии. V посевного мат-ла зависит от физиол-ких особенностей продуцента. Если продуцент размнож-ся только вегетативно, он резко возрастает (до 5-20%). Если же происходит обильное спороношение - сокращ-ся до 1%.

3. Произв-ное культ-ние.

Биосинтез ферментов в глубинной культ. протек. в теч-е 2-4 сут при непрер-й подаче воздуха и перемеш-нии. Выс. конц-ция пит.в-в на 1-ых этапах могут тормозить рост биомассы продуцента, потому часто свежая среда или некот. её компоненты вводятся в ферментер на стадии активного роста. t°-ный оптимум нах-ся в интервале 22-32оС. В современных технол-х процессах ведется непрерывное автоматическое определение содержания в среде углеводов, кол-ва образ-шихся метаболитов и конц-ции кл. Данные поступают в комп., α определяет стратегию коррекции процесса и автоматически регулирует его. Этим достиг-ся max производит-ть и наилучшее кач-во продуктов.

4. Выделение.

В мицелии 3-хсуточной культуры остается не более 15% ферментов. Остальные выдел-ся в окр. жидкую среду. В этом случае препараты ферментов выделяют из фильтратов после отделения биомассы.

5. Получение товарной формы.

Пр-во ферментов при поверх-ном культ-нии продуцентов

При пов-ном методе культура растет на пов-ти твердой увлажненной пит.среды. Мицелий полностью обволакивает и довольно прочно скрепляет твердые частицы субстрата, из α получают пит.в-ва. Т.к. для дыхания кл. исп-ют О2, то среда должна быть рыхлой, а слой культуры-продуцента небольшим.

Преимущ-ва пов-ной культуры: более высокая конечная конц-ция фермента на единицу массы среды (при осахаривании крахмала 5 кг пов-ной культуры заменяют 100 кг культ-ной жидкости), пов-ная культура относит-но легко высуш-ся, легко переводится в товарную форму.

Посевной материал может быть 3 видов:

- культура, выросшая на твердой пит.среде;

- споровый материал;

- мицелиальная культура, выращенная глубинным способом.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]