Диагностика

Экспресс диагностика дает ответ о виде основного возбудителя через 2 часа.

Включает: 1. Световую микроскопию

2. ИФА, исследование на наличие токсинов с сыворотками.

Из клинического материала готовят мазки и красят по Граму. Определяют подвижность (препарат висячей капли). Обнаружение большого количества Гр(+) крупных бактерий с обрубленными концами с субтерминальными спорами в совокупности с другими клиническими симптомами дает основание предполагать, что инфекция вызвана бактериями клостридиальной этиологии.

Чувствительность к ам препаратам

Чувствительны к : левомицетину, метронидазолу, клиндамицину.

Обязательно проверить на чувствительность к АМП – культивирование проводят в микроанаэростате (37^оС, 4 часа, 1 атм).

C. botulinum

Вызывают заболевание – ботулизм – тяжелая токсикоинфекция – специфические параличи. Известны с 1896г., когда в результате пищевого отравления погибло много людей. C. botulinum выделили посмертно из любителей колбасы (ветчины). Вotulus – колбаса (лат.).

Морфология

Крупные Гр(+) палочки (молодые клетки Гр(+), старые Гр(-)), длина 4-9 мкм, ширина 0,6-0,9 мкм. Субтерминальные и терминальные споры – теннисная ракетка. Подвижны – 4-35 жгутиков – перетрихи. В мазках наблюдаются по отдельности, парами, в старых культурах – цепочки. Капсул не образуют.

Аг свойства

Выделяют 8 серотипов А, В, С1, С2, D, E, F, G. Деление связано с различием в структуре токсинов. Строение АГ разное, но по морфологии, биохимическим, культуральным свойствам, действию на человека и животных – представители разных серотипов не отличаются.

Наибольшее значение в патологии человека имеют серотипы А, В, Е. В разных странах чаще встречаются разные серотипы: в США – А, Франция – В, Япония – Е, у нас А, В, Е, нет только F.

Культуральные свойства

Строгие анаэробы – развиваются и образуют токсин внутри больших кусков продуктов или в герметически закрытых упаковках.

Место постоянного обитания - вода, почва → фрукты, овощи → кишечник человека и животных, где и размножается → с испражнениями в окружающую среду → переходят в состояние споры.

Кроме того, C. botulinum в норме могут существовать в кишечнике животных, рыб без проявления заболевания.

Споры обнаруживаются в 9% проб почвы, в 4% проб воды.

В ЖПС – равномерное помутнение, запах прогорклого масла, но может быть и без него.

Для выделения используют накопительную среду – Кита-Тароцци.

На кровяном агаре с 1% глюкозой – колонии R и S формы с зоной гемолиза – сероватые с ровными и неровными краями.

В пробирках, в высоких столбиках агара – рост в виде чечевичек и комочков ваты с плотной серединкой – они продуцируют токсин, а чечевички – нет.

Оптимальная температура для C. botulinum А, В, С, D – 34-35^оС

Е, F – 26 – 30^оС

Вегетативные клетки погибают при кипячении 2-5 мин, NaCl – 6-7% задерживает их развитие, NaCl 10% подавляет жизнедеятельность и токсикообразование. Но если токины образовались до засолки, поваренная соль на них не действует. Токсины устойчивы и в кислой среде, в щелочной теряет силу на 90%. Токсины частично разрушаются при нагревании до 70-80^оС. При температуре 100^оС в течение 10-15 мин полностью разрушаются. Длительное хранение пищевых продуктов, содержащих токсин, при низких температурах не приводит к его инактивации.