Лабораторная работа № 7.6 Осмотическая устойчивость эритроцитов

Цель работы: определить осмотическую резистентность эритроцитов.

Материалы и оборудование: эритроцитарная масса, штатив с 8 пробирками, хлорид натрия в концентрациях 0,2 %; 0,3 %; 0,4 %; 0,5 %; 0,6 %; 0,7 %; 0,8 %; 0,9 %, неградуированные пипетки.

Объект исследования: человек.

Ход работы

В каждую пробирку налить по 5 мл раствора хлорида натрия разной концентрации и добавить одинаковое количество (3-5 капель) дефибринированной крови. Полученный раствор взболтать и оставить в штативе на 1 час. Частичный гемолиз характеризуется окрашиванием раствора и появлением осадка неразрушенных эритроцитов. Полный гемолиз определяется по интенсивности алой окраски и отсутствию осадка. Бесцветный раствор и большое количество осадка свидетельствует об отсутствии гемолиза.

Рекомендации к оформлению

Полученные результаты занести в таблицу. Сделать заключение о механизме осмотического гемолиза, максимальной и минимальной осмотической устойчивости.

NaCl,%	Окраска раствора	Осадок эритроцитов	Заключение	Границы устойчивости
0,9 %
0,8 %
0,7 %
0,6 %
0,5 %
0,4 %
0,3 %
0,2 %

Лабораторная работа № 7.7

Определение групповой принадлежности крови

по системе АВО

Цель работы: знакомство с методикой определения групповой

принадлежности крови по системе АВО.

Материалы и оборудование: исследуемая кровь, стандартные сыворотки всех групп двух разных серий, изотонический раствор хлористого натрия, предметные стекла, пипетки, стеклянные палочки, 70 % раствор спирта, вата.

Объект исследования: человек.

Ход работы

Определение группы крови производят при температуре 15-20◦ С.

1. На чистые предметные стекла в обозначенные участки наносят по капле сыворотки Ι, IΙ, IΙI групп двух серий (всего шесть капель).

2. В каждую каплю сыворотки с помощью стеклянных палочек или разных углов чистых предметных стекол вносят небольшое количество крови и размешивают. Соотношение объемов крови и сыворотки должно составлять примерно 1:10.

3. Покачивают стекла в течение пяти минут.

4. По мере наступления агглютинации, но не раньше, чем через три минуты, в каждую смесь добавляют по капле изотонического раствора хлористого натрия для предупреждения образования «монетных столбиков» из эритроцитов.

5. Определяют наличие агглютинации в каждой капле. При отсутствии агглютинации во всех каплях кровь относят к Ι группе. При отсутствии агглютинации в сыворотке IΙ группы и наличии ее в сыворотках I и ΙII групп кровь относят ко ΙI группе. При отсутствии агглютинации в сыворотке IΙI группы и наличии ее в сыворотках I и II групп кровь относится к III группе. При наличии агглютинации во всех сыворотках кровь можно отнести к IV группе. В этом случае для исключения неспецифической агглютинабельности исследуемых эритроцитов необходимо провести дополнительное исследование со стандартной сывороткой труппы АВ (IV). Отсутствие агглютинации в этой капле позволит считать реакцию специфической и отнести исследуемую кровь к IV группе.

Возможные ошибки при проведении работы:

1. Оценка реакции как отрицательной при фактическом наличии агглютинации. Это может быть обусловлено:

а) поздней или слабо выраженной агглютинацией в связи с малой активностью стандартных сывороток;

б) нарушением соотношения 1:10 при взятии большого количества крови;

в) наличием температуры воздуха, большей, чем 25◦ С, в таких

условиях исследование проводят при охлаждении стекла.

2. Оценка реакции как положительной при фактическом отсутствии специфической агглютинации. Это может быть обусловлено:

а) образованием «монетных столбиков»;

б) наличием панагглютинации, которая развивается при температуре 15◦ С; для ее исключения следует повторить определение при более высокой температуре;

в) подсыханием сыворотки и образованием по краям капель «зернистости», принимаемой за агглютинацию; это может быть в случаях, когда чтение результатов производят более, чем через пять минут.

Рекомендации к оформлению

В заключении в протокол следует записать, к какой группе относится исследуемая кровь, и тщательно обосновать полученный результат. Для этого необходимо последовательно сделать выводы об отсутствии или наличии агглютиногенов А и В в исследуемой крови по развитию или отсутствию агглютинации в каждой капле сыворотки, а затем подвести общий итог и сделать заключение о группе исследуемой крови, исходя из её антигенного состава.

Следует указать, в каких случаях исследуемая кровь может быть использована в качестве донорской.

8. ФИЗИОЛОГИЯ ПИЩЕВАРИТЕЛЬНОЙ СИСТЕМЫ

Лабораторная работа № 8.1

Изучение ферментативного действия слюны человека

на углеводы

Цель работы: доказательство карбогидразного действия слюны и настроенности ферментов слюны человека на расщепление термически обработанных углеводов.

Материалы: три пробирки с делениями, крахмальный клейстер, взвесь сырого крахмала, водяная баня, спиртовый раствор йода, пипетки.

Объект исследования: человек.

Ход работы

1. Собирают в пробирку 2 мл слюны.

2. Слюну разливают в две пробирки по 1 мл. В одну пробирку

прибавляют 0,5 мл крахмального клейстера, в другую – 0,5 мл сырого крахмала.

3. Пробирки ставят на 10-20 мин. в водяную баню при температуре 38-40°С.

4. Охлаждают пробирки водопроводной водой.

5. Прибавляют к содержимому каждой пробирки по одной-две капли йода. По изменению окраски смеси оценивают степень расщепления слюной сырого и обработанного крахмала.

Рекомендации к оформлению

Следует сделать вывод о степени расщепления ферментами слюны человека нативных и термически обработанных углеводов; перечислить ферменты слюны.

Лабораторная работа № 8.2

Значение механической обработки пищи в полости рта

для ее переваривания в желудке

Цель работы: анализ одного из проявлений преемственности в

работе различных отделов пищеварительного тракта.

Материалы: две пробирки, водяная баня, термометр, желудочный сок.

Ход работы

В две пробирки наливают по 1 мл свежего молока, слюны и

желудочного сока. Содержимое первой пробирки осторожно смешивают, а содержимое второй тщательно встряхивают, закрыв ее, в течение 1,5 минут, имитируя процесс жевания в полости рта. Ставят обе пробирки в водяную баню при температуре 37°С на 20 минут, после чего сравнивают характер створаживания молока по величине хлопьев.

Рекомендации к оформлению

Следует сделать вывод о роли предварительной механической обработки пищи для эффективности последующего действия желудочного сока.

Лабораторная работа № 8.3

Оценка моторной деятельности тонкой кишки человека

методом аускультации

Цель работы: убедиться в реципрокности взаимоотношений нервных центров, обеспечивающих парасимпатические и смпатические реакции.

Материалы: стетофонендоскоп.

Объект исследования: человек.

Ход работы

Испытуемый находится в положении лежа. Стетофонендоскоп установите на переднюю брюшную стенку в околопупочной области. В норме выслушиваются неравномерные приглушенные булькающие звуки 3-5 раз в минуту. Затем испытуемый выполняет физическую нагрузку (20 приседаний в течение 1 минуты) и вновь ложится. При повторном выслушивании кишечных шумов обнаруживается уменьшение их частоты.

Рекомендации к оформлению

В заключении сделайте выводы о наличии перистальтики тонкой кишки и ее торможении при мышечной работе, объясните механизм снижения активности кишечника.

Лабораторная работа № 8.4

Влияние афферентации от рецепторов полости рта на

результативность целенаправленной деятельности

Цель работы: убедиться, что афферентация от рецепторов полости рта при формировании функциональных систем с различным конечным результатом по-разному влияет на результативность умственной деятельности.

Материалы и оборудование: секундомер, кусочки хлеба (по 2 см), жевательная резинка.

Объект исследования: человек.

Ход работы

Сформировать пары «испытуемый - экспериментатор». Испытуемому необходимо устно решить три арифметических примера в разных условиях:

• спокойно, сидя за столом (фоновое исследование);

• сидя за столом, при жевании хлеба;

• сидя за столом, при жевании жевательной резинки.

Исследователю следует отмечать время, затраченное на решение каждого примера, вычислять среднее значение и проверять правильность ответов. Определить время формирования пищевого комка в фоне и при решении арифметических примеров.

Рекомендации к оформлению

Результаты занести в таблицу и сделать заключение о влиянии афферентации от рецепторов ротовой полости на показатели умственной деятельности человека.

Условия исследования	Пример	Время решения, с	Среднее значение, с	Правиль-ность решения (+/-)	Время формирования пищевого комка, с
Сидя (исх.)	37*12= 43*17= 24*22=
Жевание хлеба (исх.)
Сидя, при жевании хлеба	29*13= 51*12= 18*28=
Сидя, при жевании жевательной резинки	19*32= 16*14= 27*17=

9. ОБМЕН ВЕЩЕСТВ И ТЕРМОРЕГУЛЯЦИЯ

Лабораторная работа № 9.1

Составление пищевого рациона

Цель работы: научиться правильно составлять пищевые рационы в зависимости от суточных энерготрат и проанализировать собственный характер питания.

Материалы и оборудование: таблицы состава пищевых продуктов и их калорийности (приложение Б).

Объект исследования: человек.

Ход работы

Описать пищевой рацион любого из своих дней и, пользуясь таблицами, оценить пищевую ценность и калорийность каждого из блюд. Сравнить употреблённое количество белков, жиров, углеводов и ккал с требующимся в норме.

Рекомендации к оформлению

Составить пищевой рацион, данные занести в таблицу.

Наименование продуктов в блюде	Количество продукта	Содержание во взятом количестве продукта, г			Энергетическая ценность, ккал
		белков	жиров	углеводов
Первый завтрак
Итого
Второй завтрак
Итого
Обед
Итого
Ужин
Итого
Итого за сутки